{"id":100665,"date":"2010-03-05T00:00:00","date_gmt":"2010-03-05T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/interacciones-entre-la-hipoxia-y-la-hipoglucemia-en-el-cuerpo-carota%c2%addeo-y-en-las-celulas-pc12\/"},"modified":"2010-03-05T00:00:00","modified_gmt":"2010-03-05T00:00:00","slug":"interacciones-entre-la-hipoxia-y-la-hipoglucemia-en-el-cuerpo-carota%c2%addeo-y-en-las-celulas-pc12","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/metabolismo-energetico\/interacciones-entre-la-hipoxia-y-la-hipoglucemia-en-el-cuerpo-carota%c2%addeo-y-en-las-celulas-pc12\/","title":{"rendered":"Interacciones entre la hipoxia y la hipoglucemia en el cuerpo carot\u00eddeo y en las c\u00e9lulas pc12"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Silvia Patricia Fern\u00e1ndez Mart\u00ednez <\/strong><\/h2>\n<p>Los organismos superiores dependen de un aporte continuo de ox\u00edgeno y glucosa para su supervivencia. Cuando el aporte de estos par\u00e1metros en su medio interno no es el suficiente, se producen situaciones de hipoxia tisular o de hipoglucemia, perjudiciales para el organismo. Para corregirlas existen una serie de \u00f3rganos quimiorreceptores sensibles a estas situaciones. Entre ellos est\u00e1n el cuerpo carot\u00eddeo (cc) y la m\u00e9dula adrenal (ma) neonatal, en los que se ha propuesto que son sensibles a ambos est\u00edmulos y por lo que son el objeto de estudio de este trabajo de tesis doctoral. Adem\u00e1s estudiamos el efecto de la hipoglucemia y de las interacciones entre la hipoxia y la hipoglucemia en c\u00e9lulas pc12, ya que son c\u00e9lulas que se utilizan habitualmente como modelo de las c\u00e9lulas quimiorreceptoras (cq) del cc y de las cromafines neonatales en estudios de quimiosensibilidad a la hipoxia.  para llevar a cabo este estudio, realizamos medidas de secreci\u00f3n de catecolaminas (ca) y  de los niveles de calcio (ca2+) citos\u00f3lico en estos tres sistemas, utilizando distintos tipos de preparaciones. Las medidas de secreci\u00f3n de ca se llevaron a cabo por t\u00e9cnicas radioisot\u00f3picas en preparaciones de cc intactos en fresco y explantes. En cultivos primarios de cq del cc y de c\u00e9lulas cromafines neonatales y en c\u00e9lulas pc12 aisladas o empaquetadas las medidas de secreci\u00f3n se realizaron por t\u00e9cnicas amperom\u00e9tricas. Adem\u00e1s, en los cultivos primarios y en la preparaci\u00f3n de c\u00e9lulas pc12 aisladas se midieron los niveles de ca2+ citos\u00f3lico por microfluorimetr\u00eda utilizando el fluor\u00f3foro ratiom\u00e9trico fura-2-am.  en la parte de este trabajo de tesis doctoral correspondiente al estudio de la sensibilidad a la hipoglucemia y de las interacciones entre la hipoxia y la hipoglucemia en el cc, observamos en todas las preparaciones utilizadas que el cc no es sensible de manera directa a la aplicaci\u00f3n de disoluciones deficitarias en glucosa. Cuando aplicamos simult\u00e1neamente est\u00edmulos de hipoxia y ausencia de glucosa, lo que observamos fue una gran potenciaci\u00f3n de la respuesta secretora en los explantes cultivados durante 24 horas y tambi\u00e9n en los cultivos primarios. Es la preparaci\u00f3n en fresco exist\u00eda interacci\u00f3n positiva entre ambos est\u00edmulos pero que no llegaba a ser esa potenciaci\u00f3n observada en las otras preparaciones.  Esta potenciaci\u00f3n no se deber\u00eda a un d\u00e9ficit energ\u00e9tico producido por la falta de glucosa, ya que se mantiene al suplementar las disoluciones libres de glucosa con piruvato s\u00f3dico 10mm. A nivel del ca2+ citos\u00f3lico sin embargo, al aplicar simult\u00e1neamemte hipoxia y glucosa 0mm no se produce una potenciaci\u00f3n del incremento de la se\u00f1al de ca2+, sino que en este caso el efecto es de sumaci\u00f3n.  respecto a las c\u00e9lulas pc12, en este trabajo de tesis doctoral demostramos por primera vez que adem\u00e1s de ser sensibles a la hipoxia, tambi\u00e9n son sensibles a la hipoglucemia a la que responden secretando ca de manera dosis-dependiente. Adem\u00e1s, igual que observamos en las cq del cc, cuando se aplican a la vez hipoxia e hipoglucemia existe una gran potenciaci\u00f3n de la respuesta secretora, que tampoco se debe a un d\u00e9ficit energ\u00e9tico. La secreci\u00f3n de ca inducida por la hipoglucemia y por la hipoxia-hipoglucremia depende de la entrada de ca2+ extracelular fundamentalmente a trav\u00e9s de canales de ca2+ dependientes de voltaje de tipo l. Adem\u00e1s, dentro de la cascada de transducci\u00f3n a la hipoxia, esta potenciaci\u00f3n debe producirse en etapas anteriores a la inhibici\u00f3n de canales de k sensibles a ox\u00edgeno.  los cultivos primarios de c\u00e9lulas cromafines neonatales de rata son d\u00edciles de conseguir. Utilizamos varios protocolos de cultivo descritos por varios autores y modificados por nosotros, y conseguimos obtener c\u00e9lulas viables aunque solo en ocasiones observamos respuestas se secreci\u00f3n de ca y de incrementos de ca2+ citos\u00f3lico en respuesta a est\u00edmulos de hipoxia, hipoglucemia o ambos a la vez.. Esto hizo que no consigui\u00e9ramos utilizar de forma rutinaria ninguno de los protocolo de cultivo. Suplimos el uso de los cultivos primarios de c\u00e9lulas cromafines con el uso de las c\u00e9lulas pc12, que provenir de un tumor de ma comparten muchas de las caracter\u00edsticas de las c\u00e9lulas cromafines y en las que los resultados obtenidos son consistentes con los obtenidos previamente en nuestro laboratorio en ma neonatal intacta de rata.  las conclusiones generales de este trabajo de tesis doctoral son las siguientes: &#8211; el cc no es sensible de manera directa a la hipoglucemia. &#8211; in vitro, a las 24 horas de cultivo de los cc, se produce una gran potenciaci\u00f3n de la respuesta secretora hip\u00f3xica en condiciones de ausencia de glucosa que se mantine en cultivos primarios de cq aisladas. &#8211; las c\u00e9lulas pc12 son sensibles a la hipoglucemia de manera dosis-dependiente y adem\u00e1s este est\u00edmulo potencia la respuesta secretora inducida por la hipoxia. &#8211; las c\u00e9lulas pc12, adem\u00e1s de utilizarse como modelo de las cq del cc y de las c\u00e9lulas cromafines neonatales en estudios de quimiosensibilidad a la hipoxia, tambi\u00e9n pueden servir como modelo en estudios de quimiosensibilidad a la hipoglucemia.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Interacciones entre la hipoxia y la hipoglucemia en el cuerpo carot\u00eddeo y en las c\u00e9lulas pc12<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Interacciones entre la hipoxia y la hipoglucemia en el cuerpo carot\u00eddeo y en las c\u00e9lulas pc12 <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Silvia Patricia Fern\u00e1ndez Mart\u00ednez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Valladolid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 03\/05\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Constancio Gonzalez Mart\u00ednez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: M\u00aa carmen Dom\u00ednguez lobat\u00f3n <\/li>\n<li>rosario P\u00e1saro dionisio (vocal)<\/li>\n<li>emilia Monteiro (vocal)<\/li>\n<li>arcadio Gual sala (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Silvia Patricia Fern\u00e1ndez Mart\u00ednez Los organismos superiores dependen de un aporte continuo de ox\u00edgeno y glucosa para 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