{"id":101716,"date":"2018-03-11T10:23:38","date_gmt":"2018-03-11T10:23:38","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/analisis-genetico-y-bioqua%c2%admico-del-catabolismo-del-colesteroel-en-mycobacterium-smegmatis-mc2-155\/"},"modified":"2018-03-11T10:23:38","modified_gmt":"2018-03-11T10:23:38","slug":"analisis-genetico-y-bioqua%c2%admico-del-catabolismo-del-colesteroel-en-mycobacterium-smegmatis-mc2-155","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/analisis-genetico-y-bioqua%c2%admico-del-catabolismo-del-colesteroel-en-mycobacterium-smegmatis-mc2-155\/","title":{"rendered":"An\u00e1lisis gen\u00e9tico y bioqu\u00edmico del catabolismo del colesteroel en mycobacterium smegmatis mc2 155"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Iria Uhia Castro <\/strong><\/h2>\n<p>El trabajo realizado en esta tesis se ha centrado en el estudio de la ruta aer\u00f3bica de degradaci\u00f3n del colesterol en la bacteria mycobacterium smegmatis mc2155. Con el fin de hallar los genes responsables del catabolismo de este esteroide, se analiz\u00f3  primeramente el genoma de esta cepa mediante an\u00e1lisis in silico, utilizando para ello como sondas genes de otros microorganismos que est\u00e1n implicados en la degradaci\u00f3n de esteroides (como por ejemplo los genes tes de comamonas testosteroni (horinouc hi et al (2003) appl. Environ. Microbiol. 69, 4421-4430). Los resultados indicaron que en el genoma de m. Smegmatis mc2155 aparec\u00edan supuestos genes ort\u00f3logos a la mayor\u00eda de las sondas utilizadas. Posteriormente mediante la t\u00e9cnica de retrotranscrip ci\u00f3n-pcr se confirm\u00f3 que efectivamente esos genes se expresan diferencialmente cuando la bacteria se cultiva en un medio con colesterol 1,8 mm como fuente de carbono y energ\u00eda, frente a un medio con glicerol 18 mm, lo que apoya su implicaci\u00f3n en la r uta de degradaci\u00f3n de este esterol. Seguidamente se procedi\u00f3 a un estudio global de la expresi\u00f3n g\u00e9nica diferencial en colesterol de m. Smegmatis mc2155 utilizando la tecnolog\u00eda de los microarrays. Para ello se cultiv\u00f3 la cepa en medio con colesterol  1,8 mm o glicerol como \u00fanica fuente de carbono, y tras extraer rna del cultivo y efectuar la retrotranscripci\u00f3n-pcr para conseguir cdna se procedi\u00f3 al marcaje del mismo con los fluorocromos cy3\/cy5. Posteriormente  se hibrid\u00f3 este cdna marcado a mic roarrays de m. Smegmatis. Tras la hibridaci\u00f3n se escanearon las im\u00e1genes y se procesaron y se analizaron los datos obtenidos utilizando distintos m\u00e9todos inform\u00e1ticos, como rank product o limma. Los datos obtenidos han servido para delimitar las zona s del genoma de m. Smegmatis mc2155 implicadas en el metabolismo de colesterol. Algunos de los datos obtenidos en los microarrays se hab\u00edan obtenido ya con anterioridad mediante la t\u00e9cnica de retrotranscripci\u00f3n-pcr, lo que apoya la fiabilidad de los mismos, y otros son datos nuevos que han servido para localizar nuevos genes desconocidos hasta la fecha posiblemente implicados en esta ruta. Varios de ellos fueron inactivados mediante mutag\u00e9nesis insercional y se comprob\u00f3 que su ausencia afectaba al crecimiento de esta cepa en colesterol. Tal es el caso por ejemplo del gen msmeg_5995, que codifica un citocromo p450 que se cree que puede estar implicado en el primer paso de la degradaci\u00f3n de la cadena lateral del colesterol, o del gen msmeg_13<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>An\u00e1lisis gen\u00e9tico y bioqu\u00edmico del catabolismo del colesteroel en mycobacterium smegmatis mc2 155<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 An\u00e1lisis gen\u00e9tico y bioqu\u00edmico del catabolismo del colesteroel en mycobacterium smegmatis mc2 155 <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Iria Uhia Castro <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 17\/06\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Beatriz Gal\u00e1n Sicilia<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Mar\u00eda Molina mart\u00edn <\/li>\n<li>Jos\u00e9 Mar\u00eda Luengo rodr\u00edguez (vocal)<\/li>\n<li>Jos\u00e9 Antonio Ainsa claver (vocal)<\/li>\n<li>eduardo Santero santurino (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Iria Uhia Castro El trabajo realizado en esta tesis se ha centrado en el estudio de la [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center 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