{"id":102741,"date":"2010-09-07T00:00:00","date_gmt":"2010-09-07T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/alergenos-recombinantes-de-anisakis\/"},"modified":"2010-09-07T00:00:00","modified_gmt":"2010-09-07T00:00:00","slug":"alergenos-recombinantes-de-anisakis","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/parasitologia-humana\/alergenos-recombinantes-de-anisakis\/","title":{"rendered":"Al\u00e9rgenos recombinantes de anisakis"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Ana Mar\u00eda Anad\u00f3n Ruiz <\/strong><\/h2>\n<p>Con el objetivo de mejorar el serodiagn\u00f3stico de la anisakiosis se realiz\u00f3 el cribado de una genoteca de expresi\u00f3n de anisakis simplex con el anticuerpo monoclonal ua3 para tratar de obtener en forma recombinante las prote\u00ednas reconocidas por dicho monoclonal. Este procedimiento permiti\u00f3 identificar la novedosa estructura primaria del al\u00e9rgeno ani s 7, que se caracteriza por la presencia de un elevado contenido de residuos de ciste\u00edna y la repetici\u00f3n en t\u00e1ndem del motivo cx17-25cx9-22cx8cx6. la obtenci\u00f3n de un fragmento de 279 amino\u00e1cidos de dicho al\u00e9rgeno en forma recombinante (t-ani s 7) permiti\u00f3 el desarrollo de un ensayo elisa indirecto para el diagn\u00f3stico de la anisakiosis (t-ani s 7 elisa) que conservaba la especificidad del ensayo precedente elisa-ua3 pero aumentaba la sensibilidad. el polip\u00e9ptido recombinante t-ani s 7, que conserva el epitopo reconocido por el anticuerpo monoclonal ua3, fue empleado para caracterizar el al\u00e9rgeno ani s 7. La realizaci\u00f3n de experimentos de inhibici\u00f3n con p\u00e9ptidos sint\u00e9ticos derivados de la zona de mayor homolog\u00eda de la secuencia de ani s 7 permiti\u00f3 identificar el epitopo lineal de 18 amino\u00e1cidos que reconoce el anticuerpo monoclonal ua3 (mcqcvqkygtefckkrla). Mediante experimentos de inhibici\u00f3n empleando sueros de pacientes con anisakiosis se comprob\u00f3 que dicho epitopo es un epitopo inmunodominante frente al que se dirigen la mayor parte (44-85%) de los anticuerpos generados frente a ani s 7 durante la infecci\u00f3n por el par\u00e1sito. Adem\u00e1s se comprob\u00f3 que el epitopo es resistente al tratamiento con pepsina y al calentamiento hasta los 80\u00c2\u00bac. la inoculaci\u00f3n de ratas con larvas vivas y muertas de anisakis simplex permitieron comprobar que solamente se generan anticuerpos frente al polip\u00e9ptido recombinante t-ani s 7 durante la infecci\u00f3n activa del par\u00e1sito, indicando que este polip\u00e9ptido puede ser empleado para diferenciar las verdaderas infecciones de anisakis de aquellos pacientes con anticuerpos ige inducidos frente a ant\u00edgenos con reactividad cruzada con ant\u00edgenos del par\u00e1sito. Asimismo, se comprob\u00f3 que el al\u00e9rgeno ani s 7 es g\u00e9nero espec\u00edfico, de manera que puede emplearse para diferenciar las infecciones de anisakis y pseudoterranova. con el objetivo de comparar el valor diagn\u00f3stico del ensayo t-ani s 7 elisa con el de los principales m\u00e9todos de serodiagn\u00f3stico de la anisakiosis, el al\u00e9rgeno ani s 1 fue obtenido en forma recombinante y empleado para desarrollar un ensayo elisa indirecto. Para realizar la comparaci\u00f3n de los dos ensayos elisa con el m\u00e9todo comercial inmunocap (phadia) se probaron los sueros de 495 pacientes con s\u00edntomas cl\u00ednicos de alergia alimentaria. Los resultados mostraron que el uso combinado de los polip\u00e9ptidos rani s 1 y t-ani s 7 en elisa indirecto optimiza el serodiagn\u00f3stico de la anisakiosis y que adem\u00e1s puede emplearse para diferenciar las infecciones recientes de las infecciones pasadas. el ensayo elisa indirecto con los ant\u00edgenos recombinantes ani s 1 y t-ani s 7 fue empleado en un estudio epidemiol\u00f3gico de casos y controles realizado en tres hospitales espa\u00f1oles para analizar la relevancia de las infecciones previas por anisakis como factor de riesgo de hemorragias digestivas altas. El an\u00e1lisis de los resultados demostr\u00f3 que una infecci\u00f3n previa por el par\u00e1sito es un factor de riesgo de hemorragias digestivas, principalmente cuando est\u00e1 asociado a otros factores de riesgo como la infecci\u00f3n por helicobacter pylori o el consumo de antiinflamatorios no esteroideos.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Al\u00e9rgenos recombinantes de anisakis<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Al\u00e9rgenos recombinantes de anisakis <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Ana Mar\u00eda Anad\u00f3n Ruiz <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Santiago de compostela<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 09\/07\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Teresa Garate Ormaechea<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 manuel Leiro vidal <\/li>\n<li>michael Parkhouse (vocal)<\/li>\n<li>ignacio Javier Ansotegui zubeldia (vocal)<\/li>\n<li>Antonio Osuna carrillo de albornoz (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Ana Mar\u00eda Anad\u00f3n Ruiz Con el objetivo de mejorar el serodiagn\u00f3stico de la anisakiosis se realiz\u00f3 el 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