{"id":102887,"date":"2018-03-11T10:25:16","date_gmt":"2018-03-11T10:25:16","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/metodos-rapidos-microbiologicos-y-de-inmunoensayo-para-la-determinacion-de-residuos-de-antibioticos-y-sulfamidas-en-miel\/"},"modified":"2018-03-11T10:25:16","modified_gmt":"2018-03-11T10:25:16","slug":"metodos-rapidos-microbiologicos-y-de-inmunoensayo-para-la-determinacion-de-residuos-de-antibioticos-y-sulfamidas-en-miel","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/antibioticos\/metodos-rapidos-microbiologicos-y-de-inmunoensayo-para-la-determinacion-de-residuos-de-antibioticos-y-sulfamidas-en-miel\/","title":{"rendered":"M\u00e9todos r\u00e1pidos microbiol\u00f3gicos y de inmunoensayo para la determinaci\u00f3n de residuos de antibi\u00f3ticos y sulfamidas en miel"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Susana Menal Puey <\/strong><\/h2>\n<p>La presencia de residuos de antibi\u00f3ticos en la miel ha generado una creciente preocupaci\u00f3n dada su repercusi\u00f3n sobre la salud p\u00fablica. Su detecci\u00f3n constituye uno de los principales objetivos de las autoridades sanitarias, por lo que se hace necesario el desarrollo de m\u00e9todos anal\u00edticos que permitan la obtenci\u00f3n de datos fiables. en este trabajo se han puesto a punto y validado cuatro m\u00e9todos de cribado o screening para detectar residuos de penicilina-g s\u00f3dica, estreptomicina sulfatada, tetraciclina y sulfametazina en miel, siguiendo los criterios establecidos en la decisi\u00f3n de la comisi\u00f3n 2002\/657\/ce. Adem\u00e1s, se han analizado 92 muestras de miel espa\u00f1olas con diferentes or\u00edgenes geogr\u00e1ficos y bot\u00e1nicos para determinar la incidencia de dichos antibi\u00f3ticos en muestras de miel procedentes del mercado espa\u00f1ol, y evaluar el riesgo sanitario asociado a su presencia. la t\u00e9cnica de cribado en placa evaluada, implica la diluci\u00f3n de las muestras de miel en una soluci\u00f3n tamponada (tamp\u00f3n fosfato 0,1 m a ph 7) para neutralizar su acidez natural y alcanzar un ph final de la disoluci\u00f3n mayor o igual a 6, valor necesario para la obtenci\u00f3n de halos de inhibici\u00f3n significativamente similares. Para la validaci\u00f3n del m\u00e9todo se ha realizado un estudio de estabilidad, especificidad, linealidad y precisi\u00f3n mediante el an\u00e1lisis cuantitativo en tres d\u00edas diferentes de seis muestras de miel fortificadas a seis concentraciones de cada antibi\u00f3tico. La repetibilidad y reproducibilidad del m\u00e9todo han mostrado c.V. Para cada antibi\u00f3tico conformes con los valores requeridos en la decisi\u00f3n europea 2002\/657\/ce, y el m\u00e9todo ha resultado lineal en el intervalo de concentraciones estudiado de cada antibi\u00f3tico, con coeficientes de correlaci\u00f3n entre 0,980 y 0,997. La concentraci\u00f3n menor de cada antibi\u00f3tico cuyo resultado ha sido positivo (\u00c2\u00bf 2 mm) y preciso, ha definido la concentraci\u00f3n m\u00ednima detectable por el m\u00e9todo, y ha correspondido con 50 ppb para penicilina-g s\u00f3dica, 3.000 ppb para estreptomicina sulfatada, 700 ppb para tetraciclina y 75 ppm para sulfametazina. el an\u00e1lisis de miel mediante el test de inhibici\u00f3n microbiol\u00f3gica eclipse 50, ha requerido de una diluci\u00f3n en agua destilada est\u00e9ril, neutralizando el ph de la disoluci\u00f3n final con naoh 1 m hasta 7, valor \u00f3ptimo para el desarrollo de la prueba. Al tratarse de un m\u00e9todo cualitativo, la validaci\u00f3n se ha basado en un estudio de estabilidad y especificidad, y en la determinaci\u00f3n del l\u00edmite de detecci\u00f3n cualitativo a partir de las representaciones gr\u00e1ficas de la probabilidad de obtener resultados positivos a ocho niveles de concentraci\u00f3n de cada antibi\u00f3tico. Los l\u00edmites de detecci\u00f3n de esta t\u00e9cnica han sido las concentraciones a las que s\u00f3lo existe una probabilidad del 5% de obtener resultados falsos negativos, y han correspondido con 11,5 ppb para penicilina-g s\u00f3dica, 24.895 ppb para estreptomicina sulfatada, 575 ppb para tetraciclina y 1.996 ppb para sulfametazina. El nivel de ajuste de las representaciones gr\u00e1ficas ha sido satisfactorio, con unos niveles de significancia menores a 0,05. los an\u00e1lisis de miel mediante el kit eclipse 100 han puesto de manifiesto colores similares a los desarrollados en el kit eclipse 50, pese al lavado de los pocillos con agua destilada para eliminar la miel, y el tiempo de an\u00e1lisis se ha duplicado (4 horas 30 minutos frente a 2 horas 30 minutos para el kit eclipse 50). el an\u00e1lisis de miel mediante el kit ridascreen-tetraciclina, no ha requerido de una extracci\u00f3n en fase s\u00f3lida con columnas rida c18, ha bastado con una simple diluci\u00f3n en tamp\u00f3n pbs. La validaci\u00f3n de la t\u00e9cnica se ha basado en un estudio de estabilidad, especificidad, y precisi\u00f3n mediante el an\u00e1lisis cuantitativo en tres d\u00edas diferentes de seis muestras de miel fortificadas a 100 y 400 ppb de tetraciclina. Tanto los c.V. Obtenidos para cada d\u00eda y entre d\u00edas, como los porcentajes de recuperaci\u00f3n para ambos niveles de fortificaci\u00f3n, han estado conformes con los valores requeridos en la decisi\u00f3n europea 2002\/657\/ce, por lo que este m\u00e9todo se ha utilizado como un m\u00e9todo de semicuantificaci\u00f3n de tetraciclina en muestras de miel para niveles de fortificaci\u00f3n mayores de 7,5 ppb (l\u00edmite de cuantificaci\u00f3n de la t\u00e9cnica). el an\u00e1lisis de residuos de estreptomicina en miel mediante el kit ridascreen-estreptomicina, ha precisado doble centrifugaci\u00f3n de la muestra a 3.000 rpm durante 20 y 10 minutos, respectivamente, extracci\u00f3n en fase s\u00f3lida con columnas rida c18 eluyendo con 1 ml de metanol. Dado que los porcentajes de recuperaci\u00f3n no han sido satisfactorios (23,5-137%), se han estudiado los par\u00e1metros de funcionamiento cualitativo del m\u00e9todo. El l\u00edmite de detecci\u00f3n cualitativo, proporcionado por la concentraci\u00f3n a la que s\u00f3lo el 5% de los resultados pueden ser falsos negativos, ha correspondido con 97,7 ppb para estreptomicina, y el nivel de ajuste de la representaci\u00f3n gr\u00e1fica ha presentado un nivel de significancia menor a 0,05. mediante la metodolog\u00eda descrita en esta tesis, se han analizado 92 muestras comerciales de miel procedentes del mercado espa\u00f1ol, para conocer la incidencia de penicilina-g s\u00f3dica, estreptomicina sulfatada, tetraciclina y sulfametazina en ellas. Tres muestras han presentado residuos de estreptomicina por encima del l\u00edmite de cuantificaci\u00f3n del kit ridascreen-estreptomicina, y cuatro residuos de tetraciclina por encima del l\u00edmite de cuantificaci\u00f3n del kit ridascreen-tetraciclina. Comparando las ide con los valores establecidos de ida, se observa que, en todos los casos, \u00e9stas son inferiores al 4% de las admitidas, lo que supone un riesgo toxicol\u00f3gico muy bajo para el consumidor de miel.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>M\u00e9todos r\u00e1pidos microbiol\u00f3gicos y de inmunoensayo para la determinaci\u00f3n de residuos de antibi\u00f3ticos y sulfamidas en miel<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 M\u00e9todos r\u00e1pidos microbiol\u00f3gicos y de inmunoensayo para la determinaci\u00f3n de residuos de antibi\u00f3ticos y sulfamidas en miel <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Susana Menal Puey <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Zaragoza<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 14\/07\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan  Jos\u00e9 Carrami\u00f1ana Esteban<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Antonio Herrera marteache <\/li>\n<li>susana a. Sanz cervera (vocal)<\/li>\n<li>teresa Juan  esteban (vocal)<\/li>\n<li>M\u00aa teresa Mora ventura (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Susana Menal Puey La presencia de residuos de antibi\u00f3ticos en la miel ha generado una creciente preocupaci\u00f3n [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[2193,13610],"tags":[3115,208532,2394,51059,208531,145876],"class_list":["post-102887","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-antibioticos","category-zaragoza","tag-antonio-herrera-marteache","tag-juan-jose-carraminana-esteban","tag-ma-teresa-mora-ventura","tag-susana-a-sanz-cervera","tag-susana-menal-puey","tag-teresa-juan-esteban"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/102887","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=102887"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/102887\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=102887"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=102887"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=102887"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}