{"id":103290,"date":"2018-03-11T10:25:46","date_gmt":"2018-03-11T10:25:46","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/modulacion-de-la-proliferacion-de-queratinocitos-humanos-por-especies-reactivas-de-oxigeno-generadas-mediante-tratamiento-fotodinamico\/"},"modified":"2018-03-11T10:25:46","modified_gmt":"2018-03-11T10:25:46","slug":"modulacion-de-la-proliferacion-de-queratinocitos-humanos-por-especies-reactivas-de-oxigeno-generadas-mediante-tratamiento-fotodinamico","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/biologia-celular\/modulacion-de-la-proliferacion-de-queratinocitos-humanos-por-especies-reactivas-de-oxigeno-generadas-mediante-tratamiento-fotodinamico\/","title":{"rendered":"Modulacion de la proliferacion de queratinocitos humanos por especies reactivas de oxigeno generadas mediante tratamiento fotodinamico"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Alfonso Blazquez Castro <\/strong><\/h2>\n<p>Es conocida la acci\u00f3n citot\u00f3xica de las especies reactivas de ox\u00edgeno (ros), que desemboca en numerosos trastornos y enfermedades. Sin embargo, recientemente se est\u00e1 demostrando la capacidad de algunas ros para actuar como mol\u00e9culas se\u00f1alizadoras en la fisiolog\u00eda celular normal. En concreto, las ros se est\u00e1n vinculando en procesos tales como la proliferaci\u00f3n celular y la regeneraci\u00f3n tisular. Parece, por tanto, interesante definir metodolog\u00edas que permitan, mediante la manipulaci\u00f3n de la concentraci\u00f3n celular de ros, modular la tasa proliferativa celular con objeto de emplearlas, eventualmente, en la regeneraci\u00f3n de un tejido da\u00f1ado. En este sentido, la aplicaci\u00f3n de un tratamiento fotodin\u00e1mico moderado puede ofrecer la posibilidad de incrementar la tasa de proliferaci\u00f3n celular en un tejido susceptible de ser iluminado, como la piel. en este trabajo se han estudiado los efectos de un tratamiento fotodin\u00e1mico moderado sobre la proliferaci\u00f3n celular en la l\u00ednea celular establecida hacat de queratinocitos humanos. Como fotosensibilizador de la acci\u00f3n fotodin\u00e1mica se ha utilizado la protoporfirina ix, un metabolito end\u00f3geno que forma parte de la ruta de s\u00edntesis de citocromos celulares. Para elevar los niveles de protoporfirina ix las c\u00e9lulas se incubaron con metil-amino-levulinato (mal), un precursor del \u00e1cido 5-amino-levul\u00ednico, que es el primer intermediario en la ruta de s\u00edntesis de la protoporfirina ix. Como fuente de irradiaci\u00f3n se utiliz\u00f3 un iluminador de diodos emisores de luz que emit\u00eda en el rango rojo del espectro visible. los resultados obtenidos indican que la aplicaci\u00f3n de un tratamiento fotodin\u00e1mico moderado modula la proliferaci\u00f3n celular en las c\u00e9lulas hacat. la incubaci\u00f3n durante 5 h con mal 0,1 mm, para promover la producci\u00f3n end\u00f3gena de protoporfirina ix, y la posterior iluminaci\u00f3n con luz roja durante 10 minutos (dosis de 3,72 j\/cm2) provocaron un incremento puntual del n\u00famero de c\u00e9lulas hacat que entraron en ciclo celular y realizaron la mitosis en las 24 h posteriores al tratamiento. el incremento de la proliferaci\u00f3n celular fue estudiado mediante diversas t\u00e9cnicas complementarias, tales como el ensayo de viabilidad celular del mtt, el recuento del porcentaje de c\u00e9lulas en mitosis dentro de una poblaci\u00f3n celular determinada (\u00edndice mit\u00f3tico), la medida de la distribuci\u00f3n de ciclo celular mediante citometria de flujo, el marcaje con 5(6) carboxifluoresce\u00edna diacetato n-succinimidil ester (cfse), la tinci\u00f3n para el ant\u00edgeno nuclear ki-67 o el recuento del porcentaje de c\u00e9lulas que presentaron cuerpos de flemming. en paralelo se han realizado otros estudios para comprender el mecanismo de acci\u00f3n por el cual el tratamiento fotodin\u00e1mico modula la proliferaci\u00f3n en las c\u00e9lulas hacat. Estos estudios han demostrado un aumento en la acumulaci\u00f3n de protoporfirina ix conforme mayor fue la concentraci\u00f3n de mal a la que estuvieron expuestas las c\u00e9lulas. El tratamiento fotodin\u00e1mico elev\u00f3 los niveles intracelulares de ros a trav\u00e9s de la producci\u00f3n de ox\u00edgeno singlete. Tambi\u00e9n se ha demostrado que el tratamiento eleva significativamente resumen ii los niveles de ciclina d1 en las c\u00e9lulas tratadas. Se ha comprobado que, para que tenga lugar la estimulaci\u00f3n celular descrita, deben de funcionar correctamente tanto la ruta de la quinasa src como el complejo formador de ros denominado nox (nadph oxidase), y que el tratamiento provoc\u00f3 variaciones en la concentraci\u00f3n de ca2+ citoplasm\u00e1tico, fen\u00f3meno que se ha vinculado con la estimulaci\u00f3n de proliferaci\u00f3n celular. tambi\u00e9n se han observado modificaciones en la disposici\u00f3n de los microt\u00fabulos y de los microfilamentos de actina tras el tratamiento. Estas modificaciones alteraron temporalmente la morfolog\u00eda celular de forma similar a la observada cuando los queratinocitos reciben la se\u00f1alizaci\u00f3n para iniciar un proceso de regeneraci\u00f3n tisular. El tratamiento provoc\u00f3 un aumento significativo en la producci\u00f3n del factor de crecimiento vascular endotelial (vegf), que es el factor angiog\u00e9nico m\u00e1s potente. en conclusi\u00f3n, los resultados obtenidos en este trabajo ponen de manifiesto la posibilidad de utilizar tratamientos fotodin\u00e1micos moderados para modular la tasa proliferativa en queratinocitos humanos, con su posible aplicaci\u00f3n como metodolog\u00eda para optimizar procesos de regeneraci\u00f3n tisular.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Modulacion de la proliferacion de queratinocitos humanos por especies reactivas de oxigeno generadas mediante tratamiento fotodinamico<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Modulacion de la proliferacion de queratinocitos humanos por especies reactivas de oxigeno generadas mediante tratamiento fotodinamico <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Alfonso Blazquez Castro <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 23\/07\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda \u00e1ngeles Juarranz De La Fuente<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: ildefonso Bonilla mangas <\/li>\n<li>Miguel \u00e1ngel Miranda alonso (vocal)<\/li>\n<li>Luisa Mar\u00eda Botella cubells (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda laura Garc\u00eda bermejo (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Alfonso Blazquez Castro Es conocida la acci\u00f3n citot\u00f3xica de las especies reactivas de ox\u00edgeno (ros), que desemboca 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