{"id":104313,"date":"2018-03-11T10:27:12","date_gmt":"2018-03-11T10:27:12","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/aislamiento-caracterizacion-y-analisis-funcional-den-tbtri5-de-trichoderma-brevicompactum\/"},"modified":"2018-03-11T10:27:12","modified_gmt":"2018-03-11T10:27:12","slug":"aislamiento-caracterizacion-y-analisis-funcional-den-tbtri5-de-trichoderma-brevicompactum","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/farmacos-naturales\/aislamiento-caracterizacion-y-analisis-funcional-den-tbtri5-de-trichoderma-brevicompactum\/","title":{"rendered":"Aislamiento, caracterizaci\u00f3n y an\u00e1lisis funcional den tbtri5 de trichoderma brevicompactum"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Anamariela Tijerino Ayala <\/strong><\/h2>\n<p>Trichoderma brevicompactum es un hongo anam\u00f3rfico descrito recientemente por kraus y col. (2004) y, por tanto, es poco conocido. Sin embargo, dentro de las actividades biol\u00f3gicas descritas para esta especie destaca la antibiosis. En cuanto a la producci\u00f3n de metabolitos secundarios con actividad biol\u00f3gica en el clade brevicompactum, se han descrito los trichotecenos como el harzianum a o la trichodermina. Estos trichotecenos se producen en la ruta biosint\u00e9tica de los terpeneos y su bios\u00edntesis est\u00e1 regulada por factores gen\u00e9ticos y ambientales a nivel transcripcional. Se ha descrito que uno de los pasos cr\u00edticos es la ciclaci\u00f3n e isomerizaci\u00f3n de farnesil pirofosfato (fpp) a trichodieno (tdn), paso catalizado por la trichodieno sintasa, codificada por el gen tri5. A pesar que se han descrito genes similares de la ruta biosint\u00e9tica en fusarium graminearum, es muy poco lo que se conoce de los genes de esta ruta en t. Brevicompactum. La tesis doctoral est\u00e1 enfocada al aislamiento, caracterizaci\u00f3n y an\u00e1lisis funcional del gen tbtri5 en t. Brevicompactum ibt40841. Se aisl\u00f3 el gen tri5 utilizando sondas obtenidas a partir de fusarium, para hibridar con una genoteca de dna gen\u00f3mico de t. Brevicompactum. Posteriormente, se obtuvieron transformantes sobreexpresando el gen tbtri5. Se realiz\u00f3 el an\u00e1lisis funcional de tbtri5 tanto en la cepa silvestre ibt40841, como en tres transformantes seleccionados por su actividad antibi\u00f3tica. Por southern se determin\u00f3 una \u00fanica copia end\u00f3gena de tbtri5 y una sola inserci\u00f3n del cassette de expresi\u00f3n en los transformantes. Bajo diferentes condiciones de cultivo y mediante estudios de real time pcr, se determin\u00f3 una mayor expresi\u00f3n del gen en presencia de glucosa, glicerol y h2o2 y una represi\u00f3n en presencia de agentes antioxidantes como \u00e1cido fer\u00falico o tirosol. A partir de extractos acet\u00f3nicos de cultivos de la cepa silvestre (ibt40841) y de uno de los transformantes; se purificaron por hplc tres metabolitos: trichodermina, tirosol e hidroxitirosol, siendo \u00e9stos mayormente producidos por el transformante. En ensayos de actividad antimicrobiana (clsi), se demostr\u00f3 que la trichodermina es el metabolito con capacidad antibi\u00f3tica. La trichodermina fue capaz de inhibir el crecimiento de pat\u00f3genos de importancia cl\u00ednica como candida albicans, c. Glabrata, c. Tropicalis, p. Aeruginosa, s. Aureus mrsa, e. Faecalis vancomicina resistente y a. Baumannii. Adem\u00e1s, se determin\u00f3 que la trichodermina posee actividad antitumoral (mecanismo citost\u00e1tico) frente a adenocarcinoma de mama (mcf-7), carcinoma de pulm\u00f3n (a-549) y carcinoma hepatocelular (hep-3b y hep-g2). Los resultados de los ensayos antitumorales indican que la trichodermina tiene menor actividad antitumoral, pero, a su vez, menor citotoxicidad frente a la l\u00ednea hepatocelular humana sana que el taxol (paclitaxel), un antitumoral utilizado en el tratamiento de tumores s\u00f3lidos. Por tanto, los resultados indican una relaci\u00f3n del gen tbtri5 de t. Brevicompactum con las actividades anteriormente descritas. Por otro lado, an\u00e1lisis de tama\u00f1os y secuencias de productos de pcr amplificados a partir de adn gen\u00f3mico de t. Brevicompactum ibt40841 y de t. Arundinaceum ibt40837 correspondientes a genes y regiones interg\u00e9nicas del cluster tri, indican que la disposici\u00f3n de los genes es coincidente en ambas especies del g\u00e9nero trichoderma pero difiere con la descrita para el cluster tri en especies del g\u00e9nero fusarium. Adem\u00e1s, a diferencia de lo que ocurre en fusarium, en las dos cepas de trichoderma el gen tbtri5 est\u00e1 situado fuera del cluster tri. Finalmente, la aplicaci\u00f3n biotecnol\u00f3gica de t. Brevicompactum podr\u00eda residir en la explotaci\u00f3n de las capacidades antimicrobiana y antitumorales de la trichodermina. Precisamente, a diferencia de otras especies del g\u00e9nero trichoderma, \u00e9stas capacidades invalidan a t. Brevicompactum como agente de control biol\u00f3gico.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Aislamiento, caracterizaci\u00f3n y an\u00e1lisis funcional den tbtri5 de trichoderma brevicompactum<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Aislamiento, caracterizaci\u00f3n y an\u00e1lisis funcional den tbtri5 de trichoderma brevicompactum <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Anamariela Tijerino Ayala <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Salamanca<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 18\/10\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Rosa Hermosa Prieto<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 angel Garc\u00eda rodr\u00edguez <\/li>\n<li>Jos\u00e9 Luis Barredo fuente (vocal)<\/li>\n<li>Santiago Gutierrez martin (vocal)<\/li>\n<li>isidro Gonzalez collado (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Anamariela Tijerino Ayala Trichoderma brevicompactum es un hongo anam\u00f3rfico descrito recientemente por kraus y col. (2004) y, [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[36606,2444,9386,4204],"tags":[210891,1885,9876,46076,94254,4518],"class_list":["post-104313","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-biologia-molecular-de-microorganismos","category-farmacos-naturales","category-salamanca","category-terpenos","tag-anamariela-tijerino-ayala","tag-isidro-gonzalez-collado","tag-jose-angel-garcia-rodriguez","tag-jose-luis-barredo-fuente","tag-rosa-hermosa-prieto","tag-santiago-gutierrez-martin"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/104313","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=104313"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/104313\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=104313"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=104313"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=104313"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}