{"id":104378,"date":"2018-03-11T10:27:18","date_gmt":"2018-03-11T10:27:18","guid":{"rendered":""},"modified":"2018-03-11T10:27:18","modified_gmt":"2018-03-11T10:27:18","slug":"efecto-protector-de-los-isotiocianatos-y-organosulfurados-solos-o-en-combinacion-con-la-vitamina-c-frente-al-dano-al-dna-inducido-por-la-n-nitrosopiperidina-y-la-n-nitrosodibutilamina-mecanismos-de-a","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-tecnologicas\/efecto-protector-de-los-isotiocianatos-y-organosulfurados-solos-o-en-combinacion-con-la-vitamina-c-frente-al-dano-al-dna-inducido-por-la-n-nitrosopiperidina-y-la-n-nitrosodibutilamina-mecanismos-de-a\/","title":{"rendered":"Efecto protector de los isotiocianatos y organosulfurados solos o en combinaci\u00f3n con la vitamina c frente al da\u00f1o al dna inducido por la n-nitrosopiperidina y la n-nitrosodibutilamina: mecanismos de acci\u00f3n"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Almudena Garcia Perez <\/strong><\/h2>\n<p>El objetivo principal del presente trabajo de investigaci\u00f3n consisti\u00f3 en evaluar el \u00c2\u00bfefecto protector de los compuestos isotiocianatos (itcs) y de los organosulfurados (oscs) solos o en combinaci\u00f3n con la vitamina c frente al da\u00f1o al dna inducido por  la n-nitrosopiperidina (npip) y la n-nitrosodibutilamina (ndba), presentes en los alimentos. As\u00ed como, en determinar los posibles mecanismos de acci\u00f3n por los que estos compuestos ejercen su efecto protector\u00c2\u00bf. Para ello, se utiliz\u00f3 la l\u00ednea celular de hepatoma humano (hepg2) y la electroforesis alcalina de c\u00e9lulas individuales o ensayo cometa, con una modificaci\u00f3n, que consisti\u00f3 en utilizar las enzimas formamidopirimidina-dna-glicosilasa (fpg), endonucleasa iii (endo iii) y 3-metiladenina-dna g licosilasa (alka). Las dos primeras enzimas reconocen las purinas y las pirimidinas oxidadas, respectivamente, y la \u00faltima enzima las purinas alquiladas. en la fase inicial de este trabajo, evaluamos el da\u00f1o al dna inducido por la npip y la ndba. Nin guna de las n-nitrosaminas evaluadas indujeron una ruptura significativa de las cadenas del dna, mientras que cuando las c\u00e9lulas hepg2 se incubaron conjuntamente con las enzimas fpg, endo iii y alka y las n-nitrosaminas, se observ\u00f3 un incremento elev ado del da\u00f1o oxidativo y alquilativo al dna. Como era de esperar, ambas n-nitrosaminas indujeron un da\u00f1o alquilativo al dna mayor que el da\u00f1o oxidativo. Adem\u00e1s, la npip requiri\u00f3 concentraciones m\u00e1s elevadas que la ndba para ejercer su efecto genot\u00f3xi co. Posteriormente, determinamos si la npip y la ndba induc\u00edan apoptosis en dos l\u00edneas tumorales humanas: c\u00e9lulas de leucemia (hl-60) y de hepatoma (hepg2), utilizando diferentes t\u00e9cnicas como la microscop\u00eda de fluorescencia, la citometr\u00eda de flujo ( ensayo anexina v\/ip y tunel) y el western blot [ruptura de la poli-adp-ribosa polimerasa (parp)]. Las dos n-nitrosaminas redujeron la viabilidad de las c\u00e9lulas hl-60 y hepg2 mediante la inducci\u00f3n de apoptosis. La l\u00ednea celular hl-60 mostr\u00f3 una mayor sensibilidad a la inducci\u00f3n de apoptosis por la npip y la ndba, presentando esta \u00faltima n-nitrosamina un mayor efecto apopt\u00f3tico. Adem\u00e1s, la apoptosis inducida por la npip y la ndba fue dependiente de la activaci\u00f3n de las caspasas en ambas l\u00edneas cel ulares, actuando indistintamente las caspasas-8 y -9 como caspasas iniciadoras en las c\u00e9lulas hepg2. Por \u00faltimo, se utiliz\u00f3 el diacetato de 2\u00c2\u00bf,7\u00c2\u00bf-diclorodihidrofluoresce\u00edna (h2dcfda) para detectar la producci\u00f3n intracelular de las especies reactivas<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Efecto protector de los isotiocianatos y organosulfurados solos o en combinaci\u00f3n con la vitamina c frente al da\u00f1o al dna inducido por la n-nitrosopiperidina y la n-nitrosodibutilamina: mecanismos de acci\u00f3n<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Efecto protector de los isotiocianatos y organosulfurados solos o en combinaci\u00f3n con la vitamina c frente al da\u00f1o al dna inducido por la n-nitrosopiperidina y la n-nitrosodibutilamina: mecanismos de acci\u00f3n <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Almudena Garcia Perez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 22\/10\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Paloma Morales G\u00f3mez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: M\u00aa dolores Selgas cortecero <\/li>\n<li>erik Hedman (vocal)<\/li>\n<li>bego\u00f1a de Pablo bustos (vocal)<\/li>\n<li>cristian Smerdou picazo (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Almudena Garcia Perez El objetivo principal del presente trabajo de investigaci\u00f3n consisti\u00f3 en evaluar el \u00c2\u00bfefecto protector 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