{"id":104556,"date":"2018-03-11T10:27:35","date_gmt":"2018-03-11T10:27:35","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/genetic-and-molecular-analysis-of-the-virulence-plasmid-of-salmonella-enterica-serovar-typhimurium\/"},"modified":"2018-03-11T10:27:35","modified_gmt":"2018-03-11T10:27:35","slug":"genetic-and-molecular-analysis-of-the-virulence-plasmid-of-salmonella-enterica-serovar-typhimurium","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/microbiologia\/genetic-and-molecular-analysis-of-the-virulence-plasmid-of-salmonella-enterica-serovar-typhimurium\/","title":{"rendered":"Genetic and molecular analysis of the virulence plasmid of salmonella enterica serovar typhimurium"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Meritxell De Jes\u00fas Garcia Quintanilla <\/strong><\/h2>\n<p>Salmonella enterica serovar typhimurium posee un pl\u00e1smido de gran tama\u00f1o (93 kb) llamado pl\u00e1smido de virulencia o pslt. Dicho pl\u00e1smido contiene el locus spv, esencial para la infecci\u00f3n sist\u00e9mica en roedores. El pl\u00e1smido fue presumiblemente adquirido por el hospedador ancestral de salmonella mediante conjugaci\u00f3n. En la mayor\u00eda de las estirpes del serovar typhimurium, el pl\u00e1smido pslt contiene un oper\u00f3n tra completo. En esta tesis se han realizado diversos an\u00e1lisis estructurales y funcionales en el pl\u00e1smido pslt, habitualmente empleando estrategias gen\u00e9ticas (sobre todo, uso de mutantes). en condiciones de laboratorio, la adici\u00f3n de desoxicolato s\u00f3dico a los cultivos permite la detecci\u00f3n de aislados curados del pl\u00e1smido. Ello sugiere que la estabilidad de pslt puede hallarse comprometida en vivo, ya que las sales biliares alcanzan concentrationes notables en el intestino delgado y especialmente en el duodeno. La s\u00edntesis de los pili conjugativos codificados por pslt no causa sensibilidad a bilis, a diferencia de lo que ocurre con los pili codificados por el pl\u00e1smido f. Es posible que el paso de salmonella por el tracto hepatobiliar a lo largo de millones de a\u00f1os haya seleccionado variantes del pl\u00e1smido de virulencia resistentes a bilis. la frecuencia de curaci\u00f3n de pslt en presencia de desoxicolato s\u00f3dico aumenta en un mutante carente del m\u00f3dulo de adicci\u00f3n ccdab. Ello sugiere que dicho m\u00f3dulo es funcional en salmonella.  la posibilidad de que el pl\u00e1smido de virulencia sufra curaci\u00f3n en el duodeno plantea la posibilidad de que la conjugaci\u00f3n tenga un alto valor selectivo durante la infecci\u00f3n de animales. Dado que las c\u00e9lulas curadas del pl\u00e1smido de virulencia tienen menor capacidad de infecci\u00f3n sist\u00e9mica, recuperar el pl\u00e1smido pslt en el propio intestino podr\u00eda tener valor adaptativo.  la transferencia del pl\u00e1smido de virulencia durante la infecci\u00f3n del rat\u00f3n se detecta con relativa facilidad, ya que las frecuencias de conjugaci\u00f3n son sorprendentemente altas. Sustancias t\u00edpicas del duodeno (bilis) y del intestino grueso (propionato) inhiben la frecuencia de transmisi\u00f3n conjugativa de pslt. Perece probable que la conjugaci\u00f3n dentro del rat\u00f3n tenga lugar en el \u00edleon. Esta hip\u00f3tesis es apoyada por la detecci\u00f3n de transconjugantes a alta frecuencia en asas de \u00edleon de rat\u00f3n.  un factor clave en la regulaci\u00f3n de la transferencia conjugativa de pslt es la actividad del sistema finop de inhibici\u00f3n de la fertilidad. Un ensayo de an\u00e1lisis transcript\u00f3mico mostr\u00f3 que el arn finp ten\u00eda dianas en el cromosoma. Una de ellas es el gen biosint\u00e9tico cysd. En presencia de rna finp, la cantidad de transcrito cysdnc aumenta. Tambi\u00e9n se observa un aumento a nivel de prote\u00edna. La deleci\u00f3n del gen cysd aumenta la frecuencia de conjugaci\u00f3n un orden de magnitud, proporcionando un indicio de que la bios\u00edntesis de ciste\u00edna afecta a la conjugaci\u00f3n. Ya que la prote\u00edna cysd est\u00e1 implicada en la ruta biosint\u00e9tica de la ciste\u00edna a partir de sulfato, se estudi\u00f3 si el fenotipo conjugativo de la deleci\u00f3n era debido a una segunda funci\u00f3n de cysd o a su implicaci\u00f3n en la bios\u00edntesis de l-ciste\u00edna. La interrupci\u00f3n de la ruta en otro paso indic\u00f3 que la bios\u00edntesis de ciste\u00edna estaba implicada en la transferencia del pl\u00e1smido. Adem\u00e1s, los productos finales de la ruta (sulfuro y ciste\u00edna) producen una disminuci\u00f3n en la frecuencia de conjugaci\u00f3n. Por tanto, finp inhibe la transferencia del pl\u00e1smido de virulencia a trav\u00e9s de dos v\u00edas: i) como arn antisentido de traj; e ii) aumentando los niveles de l-ciste\u00edna a trav\u00e9s de dianas cromos\u00f3micas en trans, y espec\u00edficamente aumentando la expresi\u00f3n del oper\u00f3n cysdnc. finalmente, se ha estudiado la posible adaptaci\u00f3n de los pl\u00e1smidos de virulencia a su hospedador. Para ello se calcularon las frecuencias de conjugaci\u00f3n de tres estirpes diferentes: lt2, atcc 14028 y sl1344. Cada estirpe mostr\u00f3 tener una frecuencia espec\u00edfica de conjugaci\u00f3n, que depend\u00eda \u00fanicamente del propio pl\u00e1smido. En la estirpe sl1344 la frecuencia de conjugaci\u00f3n era m\u00e1s baja, y la causa principal parece hallarse en una mutaci\u00f3n en el gen trag. Sin embargo, los tres pl\u00e1smidos son totalmente intercambiables para la virulencia. Estos resultados, junto con la abundancia de deleciones en los operones tra de otros serotipos (y en menor medida en aislados naturales del serovar typhimurium) sugieren que los genes spv est\u00e1n sometidos a selecci\u00f3n, mientras que los genes tra son m\u00e1s o menos neutros. Si esta interpretaci\u00f3n es correcta, parece plausible que los pl\u00e1smidos de virulencia de salmonella evolucionen hacia formas no autotransmisibles.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Genetic and molecular analysis of the virulence plasmid of salmonella enterica serovar typhimurium<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Genetic and molecular analysis of the virulence plasmid of salmonella enterica serovar typhimurium <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Meritxell De Jes\u00fas Garcia Quintanilla <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Sevilla<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 28\/10\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Josep Casadesus Pursals<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: carmen Vargas  mac\u00edas <\/li>\n<li>Manuel Espinosa padr\u00f3n (vocal)<\/li>\n<li>Rafael Rotger anglada (vocal)<\/li>\n<li>laurent Aussel (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Meritxell De Jes\u00fas Garcia Quintanilla Salmonella enterica serovar typhimurium posee un pl\u00e1smido de gran tama\u00f1o (93 kb) 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