{"id":105480,"date":"2010-09-12T00:00:00","date_gmt":"2010-09-12T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudio-y-manipulacion-genetica-de-la-ruta-de-la-carotenogenesis-en-chlamydomonas-reinhardtii-mediate-la-expresion-de-genes-exogenos\/"},"modified":"2010-09-12T00:00:00","modified_gmt":"2010-09-12T00:00:00","slug":"estudio-y-manipulacion-genetica-de-la-ruta-de-la-carotenogenesis-en-chlamydomonas-reinhardtii-mediate-la-expresion-de-genes-exogenos","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica-molecular\/estudio-y-manipulacion-genetica-de-la-ruta-de-la-carotenogenesis-en-chlamydomonas-reinhardtii-mediate-la-expresion-de-genes-exogenos\/","title":{"rendered":"Estudio y manipulacion genetica de la ruta de la carotenogenesis en chlamydomonas reinhardtii mediate la expresion de genes exogenos"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Inmaculada Couso Lia\u00f1ez <\/strong><\/h2>\n<p>Plantemiento y objetivos de la tesis: los carotenoides son un amplio grupo de pigmentos isoprenoides sintetizados por todos los organismos fotosint\u00e9ticos y algunas bacterias y hongos. mediante la expresi\u00f3n de genes ex\u00f3genos, pretendemos incrementar el contenido en carotenoides y obtener un conocimiento m\u00e1s profundo de las enzimas involucradas en esta ruta y su regulaci\u00f3n in vivo en chlamydomonas reinhardtii. metodolog\u00eda y resultados obtenidos: en primer lugar el gen bktl, que codifica la enzima 3-caroteno cetolasa de haematococcus pluvialis, enzima implicada en la bios\u00edntesis de la astaxantina, fue utilizado para obtener una microalga transg\u00e9nica capaz de sintetizar ceto-carotenoides. En todos los transformantes encontrados se detect\u00f3 un nuevo pigmento con el espectro t\u00edpico de un ceto-carotenoide que identificamos como ceto-lute\u00edna. En un intento de aumentar la producci\u00f3n de dicho ceto-carotenoide se abord\u00f3 la posible manipulaci\u00f3n del genoma del cloroplasto mediante el dise\u00f1o de un nuevo vector que de forma directa permitiera la s\u00edntesis de la enzima en este org\u00e1nulo. El aumento en la producci\u00f3n de carotenoides en esta microalga fue abordado mediante la sobre-expresi\u00f3n de la enzima fitoeno sintasa, enzima clave, ya que es responsable de la producci\u00f3n del primer carotenoide de la ruta. Para ello se insert\u00f3 en el genoma nuclear de chlamydomonas el gen que codifica esta enzima en dunaliella salina. Esta aproximaci\u00f3n nos permiti\u00f3 alcanzar un aumento de hasta un 160%. tambi\u00e9n, se realizaron estudios sobre la influencia de distintos estr\u00e9s sobre la ruta de carotenoides. Estos estudios demostraron que el ciclo de xantofilas es sensible a cambios de luz y a la carencia de fuente de nitr\u00f3geno en el medio de cultivo, de hecho esto \u00faltimo no se hab\u00eda descrito anteriormente. Distintas medidas en presencia de inhibidores de la s\u00edntesis de prote\u00ednas y carotenoides sugieren que este ciclo est\u00e1 sujeto tanto a una regulaci\u00f3n en la s\u00edntesis proteica como a nivel de actividad enzim\u00e1tica y se muestra que la producci\u00f3n de zeaxantina puede tener lugar sin la s\u00edntesis de novo de carotenoides.  el an\u00e1lisis del nivel de expresi\u00f3n de genes que codifican las enzimas de la ruta mostr\u00f3 un importante incremento en el nivel de transcrito de las enzimas p- y e-hydroxylasas citocromo dependientes mostr\u00e1ndose as\u00ed el importante papel que parecen tener estas enzimas en la regulaci\u00f3n de la ruta frente a condiciones de alta luz.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estudio y manipulacion genetica de la ruta de la carotenogenesis en chlamydomonas reinhardtii mediate la expresion de genes exogenos<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estudio y manipulacion genetica de la ruta de la carotenogenesis en chlamydomonas reinhardtii mediate la expresion de genes exogenos <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Inmaculada Couso Lia\u00f1ez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Huelva<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 09\/12\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Rosa Mar\u00eda Le\u00f3n Ba\u00f1ares<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 Mar\u00eda Vega piqueres <\/li>\n<li>rene Wijffels (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda  emilia Lima costa (vocal)<\/li>\n<li>herminia Rodr\u00edguez mart\u00ednez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Inmaculada Couso Lia\u00f1ez Plantemiento y objetivos de la tesis: los carotenoides son un amplio grupo de pigmentos 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