{"id":106288,"date":"2018-03-11T10:30:10","date_gmt":"2018-03-11T10:30:10","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-genetica-y-molecular-de-los-mutantes-venosa-y-denticulata-de-arabidopsis-thaliana\/"},"modified":"2018-03-11T10:30:10","modified_gmt":"2018-03-11T10:30:10","slug":"caracterizacion-genetica-y-molecular-de-los-mutantes-venosa-y-denticulata-de-arabidopsis-thaliana","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/desarrollo-vegetal\/caracterizacion-genetica-y-molecular-de-los-mutantes-venosa-y-denticulata-de-arabidopsis-thaliana\/","title":{"rendered":"Caracterizaci\u00f3n gen\u00e9tica y molecular de los mutantes venosa y denticulata de arabidopsis thaliana"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Almudena Moll\u00e1 Morales <\/strong><\/h2>\n<p>Con el fin de contribuir a la disecci\u00f3n gen\u00e9tica del desarrollo foliar en las plantas, hemos estudiado en esta tesis varias mutaciones que perturban propiedades locales de la morfolog\u00eda de las hojas de arabidopsis thaliana. en las hojas de los mutantes reticulados la venaci\u00f3n se distingue claramente por su coloraci\u00f3n verde, que destaca sobre un limbo p\u00e1lido. Este rasgo fenot\u00edpico ha sido utilizado anteriormente en el laboratorio de j.L. Micol como indicador externo de la existencia de alteraciones en la proliferaci\u00f3n de los tejidos intervenales internos. Estos mutantes reticulados fueron agrupados inicialmente en la clase venosa (ven), que incluye 6 grupos de complementaci\u00f3n, dos de los cuales han sido estudiados en esta tesis: ven1 y ven3. el grupo de complementaci\u00f3n ven3 incluye 4 alelos semidominantes que reducen el tama\u00f1o de las c\u00e9lulas e incrementan los espacios intercelulares del mes\u00f3filo. Hemos realizado un an\u00e1lisis metabol\u00f3mico de las hojas de los mutantes ven3, que ha evidenciado la acumulaci\u00f3n de ornitina y un d\u00e9ficit de arginina. Hemos clonado posicionalmente el gen ven3, concluyendo que codifica la subunidad grande de la carbamoil fosfato sintetasa (cps), que cataliza en otras especies la conversi\u00f3n de glutamina en glutamato y carbamoil fosfato (cp). El cp se condensa con la ornitina para dar lugar a citrulina en la ruta de bios\u00edntesis de la arginina. La suplementaci\u00f3n del medio de cultivo con estos metabolitos evidenci\u00f3 que los mutantes ven3 son m\u00e1s sensibles que el tipo silvestre a la inhibici\u00f3n del crecimiento causada por la ornitina y que la citrulina suprime su fenotipo morfol\u00f3gico.  nuestros resultados indican que la actividad cps y la arginina son particularmente necesarias para el desarrollo del mes\u00f3filo intervenal -pero no para las venas y las c\u00e9lulas perivasculares- en las hojas de arabidopsis thaliana. La expresi\u00f3n heter\u00f3loga del gen ven3 en mutantes de escherichia coli deficientes en la actividad cps nos ha permitido demostrar su actividad enzim\u00e1tica, as\u00ed como que su funci\u00f3n est\u00e1 conservada entre estas dos especies tan distantes. tambi\u00e9n hemos clonado posicionalmente el gen ven1, concluyendo que codifica la subunidad alfa de la antranilato sintasa, que cataliza la primera etapa de la ruta de bios\u00edntesis del tript\u00f3fano. El mes\u00f3filo de los mutantes ven1 contiene c\u00e9lulas m\u00e1s grandes y m\u00e1s espacios a\u00e9reos que el tipo silvestre. Ser\u00e1n necesarios m\u00e1s estudios del gen ven1 para desentra\u00f1ar su papel en el desarrollo foliar.  hemos estudiado los mutantes denticulata (den), que presentan hojas apuntadas con m\u00e1rgenes indentados. La clase fenot\u00edpica den incluye 30 grupos de complementaci\u00f3n, y es por ello la m\u00e1s numerosa de las definidas en el laboratorio de j.L. Micol. Tal abundancia de mutantes den sugiere la alteraci\u00f3n de alg\u00fan proceso del desarrollo foliar en el que participan muchos productos g\u00e9nicos. Hemos clonado posicionalmente las mutaciones den5, den12, den29 y den30, concluyendo que son alelos de los genes que codifican las prote\u00ednas ribos\u00f3micas rpl7b, rpl10ab, rpl28a y rpl39c, respectivamente. Estos resultados nos han llevado a incluir en nuestro estudio, otros 21 mutantes de fenotipo similar -algunos de los cuales hab\u00edan sido llamados pointed leaves (poi)- y tambi\u00e9n portadores de mutaciones en genes que codifican prote\u00ednas ribos\u00f3micas, casi todos los cuales presentaron una reducci\u00f3n apreciable del \u00e1rea del limbo. Tambi\u00e9n manifestaron una disminuci\u00f3n en el tama\u00f1o de las c\u00e9lulas pavimentosas de la epidermis y el n\u00famero de las del mes\u00f3filo en empalizada. Los niveles de ploid\u00eda de las c\u00e9lulas de las hojas de estos mutantes indican que la divisi\u00f3n celular est\u00e1 disminuida y la endorreduplicaci\u00f3n, incrementada. Estos resultados sugieren una reducci\u00f3n de la proliferaci\u00f3n celular en las hojas de los mutantes a estudio. Hemos analizado tambi\u00e9n las interacciones gen\u00e9ticas de los mutantes den y poi con los asymmetric leaves1 (as1) y as2. La abaxializaci\u00f3n foliar que caracteriza a los mutantes as se acentu\u00f3 en los dobles mutantes den as y poi as, especialmente en los den as2-1. todas las mutaciones en genes que codifican prote\u00ednas ribos\u00f3micas de arabidopsis thaliana, tanto las estudiadas en el laboratorio de j.L. Micol como las analizadas por otros grupos, causan un fenotipo de hojas apuntadas y peque\u00f1as e interaccionan sin\u00e9rgicamente con as1 y as2. Estas caracter\u00edsticas comunes podr\u00edan deberse a una alteraci\u00f3n de la bios\u00edntesis proteica causada por la disfunci\u00f3n del ribosoma, que tiene una manifestaci\u00f3n fenot\u00edpica m\u00e1s clara en las hojas que en otros \u00f3rganos. Sin embargo, hemos observado rasgos fenot\u00edpicos espec\u00edficos en ciertos mutantes den y poi: mientras que algunos est\u00e1n alterados principalmente en la proliferaci\u00f3n celular, otros lo est\u00e1n en la polaridad foliar, seg\u00fan indican los fenotipos de sus dobles mutantes con as1 y as2. Estos resultados sugieren que algunas prote\u00ednas ribos\u00f3micas tienen papeles espec\u00edficos en determinados procesos de desarrollo. Son dos las observaciones que favorecen esta hip\u00f3tesis: por un lado, que el n\u00famero de genes de arabidopsis thaliana cuyos productos son prote\u00ednas ribos\u00f3micas supera los 230, muchos m\u00e1s de los necesarios para codificar las 80 prote\u00ednas que forman parte del ribosoma citopl\u00e1smico; por otro, que dichos genes manifiestan patrones de expresi\u00f3n espacial y temporal diversos.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizaci\u00f3n gen\u00e9tica y molecular de los mutantes venosa y denticulata de arabidopsis thaliana<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizaci\u00f3n gen\u00e9tica y molecular de los mutantes venosa y denticulata de arabidopsis thaliana <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Almudena Moll\u00e1 Morales <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Miguel hern\u00e1ndez de elche<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 14\/01\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Jos\u00e9 Luis Micol Molina<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: pilar Carbonero zalduegui <\/li>\n<li>Jos\u00e9 Leon ramos (vocal)<\/li>\n<li>\u00f3scar Lorenzo s\u00e1nchez (vocal)<\/li>\n<li>pilar Cubas dominguez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Almudena Moll\u00e1 Morales Con el fin de contribuir a la disecci\u00f3n gen\u00e9tica del desarrollo foliar en las 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