{"id":106323,"date":"2018-03-11T10:30:14","date_gmt":"2018-03-11T10:30:14","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/oxipilinas-derivadas-del-acido-oleico-en-pseudomonas-aeruginosa-biosa%c2%adntesis-caracterizacion-y-transporte\/"},"modified":"2018-03-11T10:30:14","modified_gmt":"2018-03-11T10:30:14","slug":"oxipilinas-derivadas-del-acido-oleico-en-pseudomonas-aeruginosa-biosa%c2%adntesis-caracterizacion-y-transporte","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/barcelona\/oxipilinas-derivadas-del-acido-oleico-en-pseudomonas-aeruginosa-biosa%c2%adntesis-caracterizacion-y-transporte\/","title":{"rendered":"Oxipilinas derivadas del \u00e1cido oleico en pseudomonas aeruginosa: bios\u00edntesis, caracterizaci\u00f3n y transporte."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Eriel Mart\u00ednez Guti\u00e9rrez <\/strong><\/h2>\n<p>Pseudomonas aeruginosa crecida en presencia de \u00e1cido oleico, acumula en el sobrenadante de cultivo los derivados oxigenados, \u00e1cido 7(s)10(s)-dihidroxi-8(e)-octadecen\u00f3ico (7,10-dihome) y \u00e1cido 10(s)-hidroxi-8(e)-octadecen\u00f3ico (10-home). Diferentes estudios han demostrado que estas oxilipinas tienen propiedades de inter\u00e9s para la industria y la biomedicina. Sin embargo, tanto el mecanismo de bios\u00edntesis como la funci\u00f3n biol\u00f3gica de estos compuestos permanecen sin dilucidar. En este trabajo se estudi\u00f3 el mecanismo catal\u00edticos de la s\u00edntesis del \u00e1cido 7,10-dihome en p. Aeruginosa. Este compuesto se sintetiza a partir del \u00e1cido oleico mediante una actividad diol sintasa descrita por primera vez en bacteria. En un primer paso el intermediario, \u00e1cido 10(s)-hidroperoxy-8(e)-octadecen\u00f3ico (10-hpome) se sintetiz\u00f3 a partir del \u00e1cido oleico por una actividad dioxigenasa que incluye la migraci\u00f3n del doble enlace desde la posici\u00f3n c8 a c9. Esta actividad es \u00fanica y hasta la actualidad se desconoce la naturaleza de la enzima que la cataliza. Una segunda actividad transforma el 10-hpome en 7,10-dihome en una reacci\u00f3n hidroper\u00f3xido isomerasa. El estudio de la estereoespec\u00edfica de esta actividad revel\u00f3 que utiliza como sustrato solo la configuraci\u00f3n s del 10-hpome. Se determin\u00f3 adem\u00e1s el rango de sustrato de la actividad diol sintasa. La enzima reconoce sustratos con un doble enlace en la posici\u00f3n 9 presumiblemente a trav\u00e9s del extremo carboxi-terminal. En este sentido se observ\u00f3 una excepci\u00f3n. El \u00e1cido vacc\u00e9nico parece reconocer la enzima mediante el extremo omega-terminal. El producto generado por la actividad diol sintasa sobre el \u00e1cido vaccc\u00e9nico fue el \u00e1cido 11s,14s-dihydroxi-12(e)-octadecen\u00f3ico. La actividad diol sintasa se localiz\u00f3 en el periplasma de p. Aeruginosa. A partir del periplasma se realiz\u00f3 una purificaci\u00f3n parcial de la enzima lo cual permiti\u00f3 determinar el tama\u00f1o aparente de la enzima diol sintasa (~50 kda). Se observ\u00f3 adem\u00e1s que las actividades dioxigenasa e hidroper\u00f3xido isomerasa permanec\u00edan unidas durante todos los pasos de purificaci\u00f3n lo cual sugiere que ambas actividades son catalizadas por una sola enzima. La caracterizaci\u00f3n de la actividad diol sintasa revel\u00f3 que tiene una actividad m\u00e1xima a ph 7 y a 37 \u00c2\u00b0c. Por otra parte, el an\u00e1lisis por lc-ms del 7,10-dihome gener\u00f3 una fragmentaci\u00f3n at\u00edpica. El mecanismo de fragmentaci\u00f3n fue dilucidado con la ayuda de isotop\u00f3meros. Los resultados obtenidos revelaron que el 7,10-dihome genera una serie de fragmentos que contienen el extremo \u00c2\u00bf-terminal en vez del m\u00e1s frecuente carboxi-terminal. Finalmente se identific\u00f3 el transportador de membrana externa pafadlh. Este transportador participa en la exportaci\u00f3n de los \u00e1cidos grasos oxigenados formados en el periplasma de p. Aeruginosa por la actividad diol sintasa hacia el medio extracelular donde se acumulan.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Oxipilinas derivadas del \u00e1cido oleico en pseudomonas aeruginosa: bios\u00edntesis, caracterizaci\u00f3n y transporte.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Oxipilinas derivadas del \u00e1cido oleico en pseudomonas aeruginosa: bios\u00edntesis, caracterizaci\u00f3n y transporte. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Eriel Mart\u00ednez Guti\u00e9rrez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 14\/01\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>\u00c1\u00a0ngels Manresa Presas<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Miguel Regu\u00e9 queralt <\/li>\n<li>luciano Saso (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Eriel Mart\u00ednez Guti\u00e9rrez Pseudomonas aeruginosa crecida en presencia de \u00e1cido oleico, acumula en el sobrenadante de cultivo 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