{"id":106519,"date":"2018-03-11T10:30:29","date_gmt":"2018-03-11T10:30:29","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/respuesta-de-fase-aguda-y-estudio-de-la-inmunidad-humoral-en-cerdos-vacunados-con-diferentes-formulaciones-frente-a-haemophilus-parasuis\/"},"modified":"2018-03-11T10:30:29","modified_gmt":"2018-03-11T10:30:29","slug":"respuesta-de-fase-aguda-y-estudio-de-la-inmunidad-humoral-en-cerdos-vacunados-con-diferentes-formulaciones-frente-a-haemophilus-parasuis","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/reaccion-antigeno-anticuerpo\/respuesta-de-fase-aguda-y-estudio-de-la-inmunidad-humoral-en-cerdos-vacunados-con-diferentes-formulaciones-frente-a-haemophilus-parasuis\/","title":{"rendered":"Respuesta de fase aguda y estudio de la inmunidad humoral en cerdos vacunados con diferentes formulaciones frente a haemophilus parasuis"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Sonia Mart\u00ednez Mart\u00ednez <\/strong><\/h2>\n<p>La enfermedad de gl\u00ed\u00a4sser, causada por hemophilus parasuis, ha ido adquiriendo importancia en los \u00faltimos a\u00f1os debido a las p\u00e9rdidas econ\u00f3micas que supone en el sector porcino. Su patogenia e interacci\u00f3n con el sistema inmune presentan a\u00fan muchos aspectos desconocidos, lo que impide el avance de las estrategias de prevenci\u00f3n y control de la enfermedad.  bas\u00e1ndonos en trabajos anteriores llevados a cabo en nuestro laboratorio, se centr\u00f3 este estudio en las prote\u00ednas de h. Parasuis relacionadas con la captaci\u00f3n del hierro, ya que en otros microorganismos pr\u00f3ximos filogen\u00e9ticamente estas prote\u00ednas han desarrollado una buena respuesta inmune. Debido a que nuestro grupo de investigaci\u00f3n ya hab\u00eda expresado la prote\u00edna recombinante tbpb del serotipo 5 de h. Parasuis con fines vacunales, se dise\u00f1o y produjo ahora una prote\u00edna recombinante tbpa. Ensayada su capacidad de producir inmunogenicidad en animales de experimentaci\u00f3n, los resultados fueron favorables en conejos. se reprodujo tambi\u00e9n la enfermedad en un modelo experimental basado en el hospedador natural. Se recurri\u00f3 para ello a cerdos privados de calostro que desarrollaron un cuadro cl\u00ednico y lesional caracter\u00edstico de la enfermedad, lo que nos permiti\u00f3 estudiar la patogenia y la respuesta inmune frente a la bacteria, a la vez que la protecci\u00f3n conferida por diversas formulaciones vacunales, entre ellas, las prote\u00ednas recombinantes tbpa y tbpb.  las inmunizaciones llevadas a cabo con las prote\u00ednas recombinantes tbpa y tbpb del serotipo 5 de  h. Parasuis, cepa nagasaki, proporcionaron una protecci\u00f3n parcial, con supervivencia de tan solo algunos de los lechones inmunizados. Otro procedimiento de vacunaci\u00f3n consisti\u00f3 en la utilizaci\u00f3n de un extracto proteico con afinidad por la transferrina, obtenido a partir de un protocolo de extracci\u00f3n de prote\u00ednas de h. Parasuis en condiciones restrictivas de hierro y su posterior purificaci\u00f3n a trav\u00e9s de una columna de afinidad por la transferrina. Este extracto proteico fue inoculado en dos lotes experimentales diferentes: en un caso por v\u00eda intramuscular y en el otro, por v\u00eda intratraqueal. En ambos casos confirieron una protecci\u00f3n total frente a la infecci\u00f3n por la bacteria, con supervivencia de todos los animales sin presentar las lesiones t\u00edpicas de la enfermedad. Se utiliz\u00f3 tambi\u00e9n, un  grupo experimental al que se le administr\u00f3  una vacuna comercial inctivada basada en el serotipo 5 de h. Parasuis. La protecci\u00f3n result\u00f3 igualmente total. Por \u00faltimo, se mantuvo un grupo control, que no fue inmunizado, a fin de confirmar que la dosis de infecci\u00f3n era la correcta para el desarrollo normal de la enfermedad. Estos animales murieron como consecuencia de un proceso septic\u00e9mico agudo, tal y como se dedujo del estudio de los s\u00edntomas cl\u00ednicos y de las lesiones anamopatol\u00f3gicas.  todos los ant\u00edgenos seleccionados para la prueba experimental fueron preparados con el mismo adyuvante (montanide ims 2215 vg pr), excepto las prote\u00ednas de uni\u00f3n a la transferrina administradas por v\u00eda intratraqueal, que se potenciaron con la neuraminidasa tipo vi\u00c2\u00ae  de c. Perfringens. Despu\u00e9s del desaf\u00edo, s\u00f3lo se pudo recuperar la bacteria a partir de los animales que murieron. Fueron los animales control, no inmunizados pero infectados, los que presentaron una distribuci\u00f3n de la bacteria m\u00e1s amplia, mientras que h. Parasuis no pudo ser aislado de ninguna de las localizaciones muestreadas en los animales vacunados con el extracto proteico nativo de uni\u00f3n a la transferrina o con la bacterina comercial.  antes de llevar a cabo la infecci\u00f3n, se estudi\u00f3 la actividad bactericida de los sueros de los diferentes grupos experimentales. Se observ\u00f3 c\u00f3mo en todos los animales vacunados se produc\u00edan anticuerpos tras la primera inmunizaci\u00f3n, que confer\u00edan actividad bactericida. Se puso adem\u00e1s de manifiesto la necesidad del complemento en los sueros de los animales para llevar a cabo la actividad bactericida. se estudi\u00f3 as\u00edmismo la respuesta de fase aguda valorando para ello los niveles de pig-map, haptoglobina, prote\u00edna c reactiva y apolipoprote\u00edna a-i, desde el momento de la infecci\u00f3n hasta la muerte o sacrificio de los animales. Se observ\u00f3 claramente que los animales que murieron tras la infecci\u00f3n, los cerdos control y algunos de los inmunizados con las prote\u00ednas recombinantes presentaban unas variaciones estad\u00edsticamente significativas desde el momento de la infecci\u00f3n, en todas las prote\u00ednas de fase aguda valoradas. Los valores m\u00e1ximos coincidieron, en la mayor\u00eda de los casos, con el momento previo a la muerte. Los animales que sobrevivieron, independientemente de la inmunizaci\u00f3n recibida, no presentaron variaciones significativas en sus prote\u00ednas de fase aguda hasta el momento del sacrificio.  el estudio de respuesta humoral revel\u00f3 que todos los animales inmunizados produc\u00edan anticuerpos frente a las igg totales, igg1, igg2 y igm tras la primera inmunizaci\u00f3n. Los grupos parcialmente protegidos mostraron unos valores de anticuerpos inferior al de los lotes con protecci\u00f3n total en todas y cada una de las inmunoglobulinas estudiadas. En los grupos parcialmente protegidos y en el inmunizado con la vacuna comercial, se detect\u00f3 mayores niveles de anticuerpos en todas las inmunoglobulinas, en los elisas tapizados con la bacteria inactivada. En cambio, en los inmunizados con las prote\u00ednas de uni\u00f3n a las transferrina, los valores de densidad \u00f3ptica m\u00e1s elevados se obtuvieron en los elisas tapizados con dichas prote\u00ednas. En el grupo control, cuyos animales murieron rapidamente tras la infecci\u00f3n, s\u00f3lo se pudo estudiar la respuesta humoral hasta el momento del desaf\u00edo. Estos animales no presentaron en ning\u00fan momento seroconversi\u00f3n frente a los ant\u00edgenos de h. Parasuis.  en el caso concreto de la iga, la cin\u00e9tica de sus valores dependi\u00f3 claramente del tipo de inmunizaci\u00f3n recibida. No se produjo anticuerpos en ning\u00fan grupo experimental, excepto en el inmunizado con las prote\u00ednas de uni\u00f3n a la transferrina por v\u00eda intratraqueal, en donde el principal aumento ya se detectaba tras la primera inmunizaci\u00f3n y estos valores continuaban aumentando hasta el momento del desaf\u00edo. Estos datos revelan c\u00f3mo las musosas se ven estimuladas tras la inmunizaci\u00f3n intratraqueal, lo que no parrece suceder cuando las inmunizaciones se efect\u00faan por v\u00eda intramuscular.  el estudio de la respuesta humoral en los grupos en que la protecci\u00f3n fue total determina la relaci\u00f3n directa entre los niveles de anticuerpos y la capacidad de protecci\u00f3n frente a la enfermedad. Sin embargo, esta relaci\u00f3n no se cumpli\u00f3 en los animales inmunizados con las prote\u00ednas recombinantes, ya que los animales que no sobreviv\u00edan a la infecci\u00f3n presentaban valores aceptables en la producci\u00f3n de anticuerpos, lo que significa que, o bien estos anticuerpos producidos no resultaban suficientes, o no eran espec\u00edficos para la protecci\u00f3n frente a h. Parasuis.  cuando se llev\u00f3 a cabo la identificaci\u00f3n de las prote\u00ednas que formaban parte del extracto proteico con afinidad por la transferrina, se obtuvieron varias de las esperadas, como la tbpa o la tbpb, as\u00ed como otras prote\u00ednas relacionadas con la captaci\u00f3n y el transporte del hierro interesantes como candidatos antig\u00e9nicos y finalmente, algunas prote\u00ednas cuya funci\u00f3n no se pudo relacionar con este elemento qu\u00edmico.  al realizar la inmunoprote\u00f3mica con los grupos que hab\u00edan obtenido la protecci\u00f3n total, se comprob\u00f3 c\u00f3mo las prote\u00ednas de las que se pod\u00eda esperar una buena respuesta inmune, como la tbpa o la tbpb, no eran capaces de desarrollarla. En cambio, otras que en el extracto proteico presentaban unas concentraciones escasas pod\u00edan producir una respuesta inmune intensa, como sucedi\u00f3 con el transportados abc o con la prote\u00edna de membrana externa omp2. En el grupo inmunizado con el extracto proteico de uni\u00f3n a la transferrina por v\u00eda intratraqueal fue en el que se obtuvo una respuesta inmune m\u00e1s intensa y frente a un mayor n\u00famero de prote\u00ednas. En el grupo inmunizado con la vacuna comercial, su respuesta result\u00f3 muy parecida a la de los cerdos vacunados con las prote\u00ednas de uni\u00f3n a la transferrina. Por tanto, ambos preparados presentaron unos resultados de inmunidad similares, con la ventaja de que nuestro ant\u00edgeno s\u00f3lo integraba un subproteoma de h. Parasuis y no la bacteria entera inactivada.  queda demostrada la importancia de las prote\u00ednas de uni\u00f3n a la transferrina en la protecci\u00f3n frente a la infecci\u00f3n por h. Parasuis, pudi\u00e9ndose encontrar entre ellas algunos candidatos vacunales eficaces frente a la enfermedad de gl\u00ed\u00a4sser. Se pone de manifiesto tambi\u00e9n c\u00f3mo las inmunizaciones intratraqueales pueden suponer una nueva v\u00eda alternativa de  protecci\u00f3n frente a esta enfermedad.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Respuesta de fase aguda y estudio de la inmunidad humoral en cerdos vacunados con diferentes formulaciones frente a haemophilus parasuis<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Respuesta de fase aguda y estudio de la inmunidad humoral en cerdos vacunados con diferentes formulaciones frente a haemophilus parasuis <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Sonia Mart\u00ednez Mart\u00ednez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Le\u00f3n<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 26\/01\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Cesar Bernardo Gutierrez Mart\u00edn<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Santiago Vadillo machota <\/li>\n<li>Mar\u00eda  rosa Caro vergara (vocal)<\/li>\n<li>oscar r. Gonz\u00e1lez llamazares (vocal)<\/li>\n<li>monica Suarez rodriguez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Sonia Mart\u00ednez Mart\u00ednez La enfermedad de gl\u00ed\u00a4sser, causada por hemophilus parasuis, ha ido adquiriendo importancia en los [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[32218,4667,4430,1775,2714],"tags":[189634,34708,189636,204829,5398,214344],"class_list":["post-106519","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-formacion-de-anticuerpos","category-inmunizacion","category-leon","category-reaccion-antigeno-anticuerpo","category-vacunas","tag-cesar-bernardo-gutierrez-martin","tag-maria-rosa-caro-vergara","tag-monica-suarez-rodriguez","tag-oscar-r-gonzalez-llamazares","tag-santiago-vadillo-machota","tag-sonia-Martinez-Martinez"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/106519","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=106519"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/106519\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=106519"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=106519"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=106519"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}