{"id":107062,"date":"2018-03-11T10:31:15","date_gmt":"2018-03-11T10:31:15","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/strawberryfragariax-ananassa-fruit-ripeningauxin-signalling-proteomic-analysis-and-eugenol-production\/"},"modified":"2018-03-11T10:31:15","modified_gmt":"2018-03-11T10:31:15","slug":"strawberryfragariax-ananassa-fruit-ripeningauxin-signalling-proteomic-analysis-and-eugenol-production","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/genetica-bioquimica\/strawberryfragariax-ananassa-fruit-ripeningauxin-signalling-proteomic-analysis-and-eugenol-production\/","title":{"rendered":"Strawberry(fragariax ananassa) fruit ripening:auxin signalling, proteomic analysis and eugenol production"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Irene Araguez  Rey <\/strong><\/h2>\n<p>Strawberry (fragaria *ananassa) fruit ripening: auxin signalling, proteomic analysis and eugenol production resumen: en esta tesis, se han examinado tres aspectos del proceso de maduraci\u00f3n de los frutos de fresa: 1) la regulaci\u00f3n de la se\u00f1alizaci\u00f3n de auxinas por el m\u00c2\u00a1r393 a trav\u00e9s de la generaci\u00f3n y an\u00e1lisis de diferentes l\u00edneas transg\u00e9nicas, 2) los cambios proteicos que se producen durante la maduraci\u00f3n de frutos y de aquenios por electroforesis bidimensional seguida de identificaci\u00f3n proteica por maldi\/tof-tof, y 3) caracterizaci\u00f3n de tres enzimas eugenol sintasa involucradas en la producci\u00f3n del compuesto vol\u00e1til eugenol a trav\u00e9s de estudios cin\u00e9ticos de las prote\u00ednas purificadas y de expresi\u00f3n transitoria. nuestro estudio de las l\u00edneas transg\u00e9nicas que expresan ect\u00f3picamente el pre-atmir393a revela claras diferencias entre hojas y frutos en lo que respecta a los perfiles de expresi\u00f3n de genes relacionados con la se\u00f1alizaci\u00f3n de auxinas, con cambios claros en hojas, pero sin cambios en frutos. Nuestra conclusi\u00f3n es que la maquinaria para procesar el pre-atmir393 o la maquinaria para escindir la diana fatiri no es funcional en frutos maduros. Los resultados obtenidos en las plantas de fresa transformadas con 35s::atatir1 son tambi\u00e9n diferentes en hojas y en frutos. En hojas, la disminuci\u00f3n de la expresi\u00f3n de fatiri end\u00f3geno se puede explicar en base al efecto de atatiri o los productos de su procesamiento sobre la transcripci\u00f3n de fatiri. Sin embargo el efecto de la disminuci\u00f3n de la expresi\u00f3n de fatiri end\u00f3geno no se observa en frutos maduros. Estos resultados parecen indicar que en este \u00f3rgano, la concentraci\u00f3n de auxinas, m\u00e1s que tir1, podr\u00eda ser limitante en la respuesta a esta hormona. por otro lado, mediante electroforesis bidimensional hemos identificado prote\u00ednas de frutos verdes, y de frutos rojos de f. *Ananassa cv. Camarosa, acumuladas diferencialmente entre estos dos estadios de maduraci\u00f3n. Las diferentes categor\u00edas en las que las prote\u00ednas identificadas se pueden agrupar est\u00e1n de acuerdo con los procesos que tienen lugar durante la maduraci\u00f3n del fruto. Las diferencias proteicas que hemos encontrado entre aquenios verdes (134 prote\u00ednas identificadas s\u00f3lo presentes en aquenio verde) y rojos (174 prote\u00ednas identificadas s\u00f3lo presentes en aquenio rojo) reflejan los cambios fisiol\u00f3gicos que se producen durante el desarrollo y maduraci\u00f3n de las semillas. Nuestros resultados, junto con an\u00e1lisis previos de expresi\u00f3n g\u00e9nica y de metabolitos, sugieren que el programa metab\u00f3lico del aquenio est\u00e1 ampliamente relacionado con la acumulaci\u00f3n de compuestos de reserva y protecci\u00f3n para preservar la quiescencia de la semilla y asegurar la futura germinaci\u00f3n. Adem\u00e1s, los cambios que tienen lugar en el proteoma del aquenio reflejan la actividad de este en la s\u00edntesis de precursores hormonales y metabolitos secundarios, requeridos para guiar aspectos del desarrollo de la semilla. Finalmente, los resultados de prote\u00f3mica en relaci\u00f3n a las plantas transg\u00e9nicas de la especie f. Vesca que sobreexpresan fape1 est\u00e1n de acuerdo con la idea de que en estas plantas el sistema de defensa est\u00e1 reforzado. por \u00faltimo, en esta tesis se presenta la clonaci\u00f3n de tres cdnas cuyas prote\u00ednas muestran m\u00e1xima homolog\u00eda con eugenol sintasas (egss) de diferentes especies de plantas. Dos de los cdnas corresponden a alelos del mismo gen, y por tanto codifican dos formas de la misma enzima (faegsia and faegsib), mientras que el tercero, faegs2, codifica una isoenzima diferente. La expresi\u00f3n de estos genes es mayor en f. Vesca en comparaci\u00f3n con f. Xananassa, lo cual se correlaciona con la mayor producci\u00f3n de eugenol que tiene lugar en la especie silvestre. Adem\u00e1s, ambos genes presentan perfiles de expresi\u00f3n claramente diferentes a lo largo de la maduraci\u00f3n de frutos de fresa, estando faegs1a,b fuertemente expresado en aquenios verdes, mientras que la mayor expresi\u00f3n de faegs2 se encuentra en recept\u00e1culo rojo. La actividad egs de las enzimas se ha ensayado empleando como sustrato acetato de coniferilo, y nadph como cofactor. A pesar de la similitud de las secuencias de faegsia y faegsib (s\u00f3lo seis amino\u00e1cidos las diferencian), ambas enzimas muestran comportamientos cin\u00e9ticos diferentes. Sus curvas de saturaci\u00f3n revelan que mientras que la actividad de faegsia aumenta conforme se incrementa la concentraci\u00f3n de acetato de coniferilo en las mezclas de reacci\u00f3n hasta al menos 2.5 mm, faegsib presenta inhibici\u00f3n por exceso de sustrato a concentraciones de acetato de coniferilo superiores a 1.1 mm. Resulta interesante que, mientras que a bajas concentraciones de sustrato ambas enzimas presentan un comportamiento de michaelis-menten, estas muestran cooperatividad positiva a altas concentraciones de acetato de coniferilo, pero con par\u00e1metros cin\u00e9ticos diferentes. En lo que respecta al comportamiento de faegsia y faegsib frente a nadph, hemos observado dos comportamientos cin\u00e9ticos diferentes, hiperb\u00f3lico y sigmoidal, a baja y alta concentraci\u00f3n de sustrato, siendo en ambos casos los par\u00e1metros cin\u00e9ticos frente a nadph muy similares, lo que indica que la uni\u00f3n del nadph ocurre de manera an\u00e1loga en ambas enzimas. Cabe destacar que faegs2 cataliza la s\u00edntesis cooperativa tanto de eugenol como de isoeugenol, presentando tal y como cabe esperar, valores de [s05] similares frente a acetato de coniferilo para la formaci\u00f3n de ambos compuestos. Sin embargo, la velocidad m\u00e1xima de la reacci\u00f3n que conduce a la formaci\u00f3n de eugenol es cinco veces mayor que la de la formaci\u00f3n de isoeugenol. Las diferencias entre estas dos actividades de la misma enzima se extienden a los valores de km para nadph, la cual es m\u00e1s baja para la actividad egs. La expresi\u00f3n transitoria de faegsia y faegsib en frutos de fresa confirma su papel como eugenol sintasas. direcci\u00f3n del archivo en el que queda la tesis: archivo general de la universidad de m\u00e1laga<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Strawberry(fragariax ananassa) fruit ripening:auxin signalling, proteomic analysis and eugenol production<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Strawberry(fragariax ananassa) fruit ripening:auxin signalling, proteomic analysis and eugenol production <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Irene Araguez  Rey <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 M\u00e1laga<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 25\/02\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda  Nieves Medina Escobar<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: fernando Pliego alfaro <\/li>\n<li>wilfried Schwab (vocal)<\/li>\n<li>giorgio Casadoro (vocal)<\/li>\n<li>Juan Blanco mu\u00f1oz (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Irene Araguez Rey Strawberry (fragaria *ananassa) fruit ripening: auxin signalling, proteomic analysis and eugenol production resumen: en 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