{"id":107131,"date":"2011-02-03T00:00:00","date_gmt":"2011-02-03T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/soportes-ha%c2%adbridos-pola%c2%admero-fibrina-para-ingenieria-tisular\/"},"modified":"2011-02-03T00:00:00","modified_gmt":"2011-02-03T00:00:00","slug":"soportes-ha%c2%adbridos-pola%c2%admero-fibrina-para-ingenieria-tisular","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/proteinas\/soportes-ha%c2%adbridos-pola%c2%admero-fibrina-para-ingenieria-tisular\/","title":{"rendered":"Soportes h\u00edbridos pol\u00edmero\/fibrina para ingenier\u00eda tisular"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Tatiana Carolina Gamboa Mart\u00ednez <\/strong><\/h2>\n<p>Soportes h\u00edbridos pol\u00edmero\/fibrina se sintetizaron con el fin de ser usados en diversas aplicaciones de ingenier\u00eda tisular. Pol\u00edmeros sint\u00e9ticos basados en poli\u00e9steres y un pol\u00edmero natural, el quitosano, se combinaron con fibrina mediante diferentes metodolog\u00edas de preparaci\u00f3n de scaffolds. Inicialmente se desarroll\u00f3 recubrimientos de fibrina sobre scaffolds de \u00e1cido poli(l-l\u00e1ctico) (plla), y policaprolactona (pcl), y posteriormente, se desarroll\u00f3 geles inyectables para ingenier\u00eda tisular utilizando la fibrina como agente aglomerante de micropart\u00edculas de quitosano de grado m\u00e9dico.  la fibrina es una prote\u00edna muy utilizada en el \u00e1rea cl\u00ednica como adhesivo y agente hemost\u00e1tico. Este biopol\u00edmero es producto de la activaci\u00f3n del fibrin\u00f3geno por la trombina. Debido a la posibilidad de obtenerla aut\u00f3logamente, en medicina regenerativa se ha pensado en combinarla con otros pol\u00edmeros con el fin de proporcionar secuencias reconocibles por las c\u00e9lulas y al mismo tiempo evitar rechazo inmunol\u00f3gico cuando se produce la implantaci\u00f3n de scaffolds biodegradables. Para tener una idea del comportamiento de la fibrina en medio fisiol\u00f3gico, se realiz\u00f3 una caracterizaci\u00f3n de las propiedades b\u00e1sicas de la prote\u00edna midiendo la cin\u00e9tica de coagulaci\u00f3n y degradaci\u00f3n del gel utilizando un espectrofot\u00f3metro multiplaca, tambi\u00e9n se estudi\u00f3 a trav\u00e9s de microscopio electr\u00f3nico de barrido (sem) la morfolog\u00eda de las redes tridimensionales formadas, teniendo como resultado una estructura fibrilar que se puede modular variando la cantidad de trombina y\/o fibrin\u00f3geno utilizado, y a la que se le puede controlar el proceso de fibrin\u00f3lisis mediante el uso de un agente entrecruzador de la prote\u00edna, el genipin. Tambi\u00e9n se realiz\u00f3 una caracterizaci\u00f3n biol\u00f3gica sembrando in vitro condrocitos humanos sobre films y geles de fibrina entrecruzados con una soluci\u00f3n acuosa de genipin 5mm en diferentes condiciones de cultivo; films de fibrina entrecruzados sin ning\u00fan tipo de estimulaci\u00f3n externa, y geles reticulados en ausencia y presencia de est\u00edmulos mec\u00e1nicos. La estimulaci\u00f3n mec\u00e1nica utilizada despu\u00e9s de 28 d\u00edas de cultivo produjo una mayor s\u00edntesis de prote\u00ednas de la matriz extracelular respecto a los films y geles no estimulados.   la estructura y distribuci\u00f3n de todos los soportes h\u00edbridos obtenidos fue estudiada a trav\u00e9s de sem. Los sustratos macroporosos de poli\u00e9steres mostraron un recubrimiento con apariencia fibrilar para los scaffolds de plla y una fina telilla cubriendo los microporos del scaffold para la pcl; mientras que para las micropart\u00edculas de quitosano se encontr\u00f3 que la fibrina agrupa todas las part\u00edculas en un solo sistema. En los scaffolds h\u00edbridos sintetizados se realizaron cultivos in vitro para caracterizar la respuesta de las c\u00e9lulas a estas estructuras modificadas; mediante sem y microscop\u00eda confocal se observ\u00f3 la morfolog\u00eda celular y la expresi\u00f3n de prote\u00ednas que forman las adhesiones focales en los constructos formados a partir de poli\u00e9steres. La naturaleza sint\u00e9tica e hidr\u00f3foba de los poli\u00e9steres no favorece la adhesi\u00f3n directa de diversos tipos celulares (es necesaria la deposici\u00f3n de prote\u00ednas de adhesi\u00f3n celular), por lo tanto, despu\u00e9s de la deposici\u00f3n del recubrimiento de fibrina sobre los scaffolds de plla, se encontr\u00f3 una mejor distribuci\u00f3n y adhesi\u00f3n de c\u00e9lulas preosteobl\u00e1sticas de rat\u00f3n mc3t3-e1 cuando se realizaron cultivos in vitro a cortos tiempos; sin embargo, en el scaffold de pcl recubierto con fibrina (pcl-fbn), no se observ\u00f3 una mejor distribuci\u00f3n de condrocitos cultivados sobre el sustrato h\u00edbrido a cortos tiempos. Se realiz\u00f3 un cultivo de condrocitos a largos periodos de tiempos sobre pcl-fbn con un est\u00edmulo de agitaci\u00f3n mec\u00e1nica para promover el mantenimiento del fenotipo de la c\u00e9lula, sin embargo, al finalizar el tiempo de cultivo se encontr\u00f3 un aumento significativo en la proliferaci\u00f3n celular y un contenido de glicosaminoglicanos inferior al registrado al inicio del ensayo.   se realiz\u00f3 cultivos in vitro de condrocitos humanos en condiciones est\u00e1ticas sobre el gel h\u00edbrido inyectable de quitosano, y se comprob\u00f3 que la combinaci\u00f3n de estos pol\u00edmeros naturales entrecruzados con una concentraci\u00f3n de genipin 5mm proporciona a la c\u00e9lula un entorno natural similar al fisiol\u00f3gico. Despu\u00e9s de 28 d\u00edas de cultivo se observ\u00f3 un incremento en la producci\u00f3n de prote\u00ednas de la matriz extracelular como el col\u00e1geno tipo ii y la s\u00edntesis de glicosaminoglicanos, adem\u00e1s tambi\u00e9n se encontr\u00f3 una reducida proliferaci\u00f3n celular en la superficie del soporte. Es importante mencionar que todas estas caracter\u00edsticas indican que ha sido posible mantener c\u00e9lulas condroc\u00edticas diferenciadas en este entorno tridimensional. Posiblemente los resultados obtenidos con este scaffold h\u00edbrido se mejoren utilizando estimulaci\u00f3n mec\u00e1nica y reduciendo el grado de entrecruzamiento de las muestras. Como trabajo futuro se puede implementar una manera de reticular los geles in situ de forma que este sistema se convierta en un scaffold inyectable con propiedades que estimulen la formaci\u00f3n de tejido cartilaginoso articular.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Soportes h\u00edbridos pol\u00edmero\/fibrina para ingenier\u00eda tisular<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Soportes h\u00edbridos pol\u00edmero\/fibrina para ingenier\u00eda tisular <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Tatiana Carolina Gamboa Mart\u00ednez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Polit\u00e9cnica de Valencia<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 02\/03\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Gloria Gallego Ferrer<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: manuel Monle\u00f3n pradas <\/li>\n<li>Jos\u00e9 Carlos Rodr\u00edguez cabello (vocal)<\/li>\n<li>nat\u00e1lia Mar\u00eda De ara\u00fajo  alves (vocal)<\/li>\n<li>Manuel Doblar\u00e9 castellano (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Tatiana Carolina Gamboa Mart\u00ednez Soportes h\u00edbridos pol\u00edmero\/fibrina se sintetizaron con el fin de ser usados en diversas 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