{"id":107447,"date":"2018-03-11T10:31:49","date_gmt":"2018-03-11T10:31:49","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudio-de-la-condrogenesis-de-celulas-madre-mesenquimales-humanas-procedentes-de-membrana-sinovial-y-estroma-de-cordon-umbilical\/"},"modified":"2018-03-11T10:31:49","modified_gmt":"2018-03-11T10:31:49","slug":"estudio-de-la-condrogenesis-de-celulas-madre-mesenquimales-humanas-procedentes-de-membrana-sinovial-y-estroma-de-cordon-umbilical","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-de-la-vida\/estudio-de-la-condrogenesis-de-celulas-madre-mesenquimales-humanas-procedentes-de-membrana-sinovial-y-estroma-de-cordon-umbilical\/","title":{"rendered":"Estudio de la condrogenesis de celulas madre mesenquimales humanas procedentes de membrana sinovial y estroma de cordon umbilical"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Alexandre De La Fuente Gonzalez <\/strong><\/h2>\n<p>En este trabajo desarrollamos un protocolo de aislamiento de c\u00e9lulas madre mesenquimales (cmms) procedentes de dos tipos de tejidos, la membrana sinovial y el estroma del cord\u00f3n umbilical humanos. Comprobamos si las c\u00e9lulas extra\u00eddas son cmms para lo cual, realizamos una caracterizaci\u00f3n fenot\u00edpica para observar la presencia o ausencia de los marcadores cl\u00e1sicos de cmms mediante citometr\u00eda de flujo e inmunofluorescencia. Despu\u00e9s realizamos una caracterizaci\u00f3n g\u00e9nica d\u00f3nde observamos la expresi\u00f3n de genes de c\u00e9lulas indiferenciadas mediante pcr a tiempo real, y por \u00faltimo realizamos una caracterizaci\u00f3n biol\u00f3gica para testar la pluripotencia de las c\u00e9lulas extra\u00eddas de estos dos tejidos y comprobar si poseen capacidad para diferenciarse hacia varias l\u00edneas celulares, adipocitos, osteocitos, miocitos o progenitores neuronales. Una vez comprobada la procedencia mesenquimal de nuestras c\u00e9lulas madre y su potencialidad nos centramos en la capacidad condrog\u00e9nica de las subpoblaciones de cmms procedentes de la membrana sinovial enriquecidas en los marcadores cd73, cd105, cd106 y cd271 as\u00ed como de las cmms procedentes del estroma del cord\u00f3n umbilical humanos, estableciendo un nuevo modelo de condrog\u00e9nesis in vitro mediante un medio de diferenciaci\u00f3n espec\u00edfico a trav\u00e9s de la formaci\u00f3n de esferoides, los cuales se recogieron despu\u00e9s de 14, 28 y 46 d\u00edas en cultivo en medio condrog\u00e9nico en el caso de las cmms procedentes de membrana sinovial y despu\u00e9s de 4, 7, 14, 28 y 46 d\u00edas en cultivo con el medio condrog\u00e9nico, en el caso de los esferoides de las cmms procedentes del estroma del cord\u00f3n umbilical, para su posterior estudio. Se evalu\u00f3 la estructura de los esferoides a los diferentes tiempos del modelo de condrog\u00e9nesis mediante tinciones de hematoxilina-eosina para observar su morfolog\u00eda y estructura, as\u00ed como el azul alci\u00e1n para evaluar la presencia de prote\u00ednas en la matriz extracelular que las c\u00e9lulas en proceso de diferenciaci\u00f3n van secretando al exterior. Tambi\u00e9n estudiamos la expresi\u00f3n de dos prote\u00ednas importantes para la condrog\u00e9nesis mediante inmunohistoqu\u00edmicas de los esferoides a los diferentes tiempos contra las prote\u00ednas de col\u00e1geno tipo i (col 1) y el col\u00e1geno tipo ii (col 2), as\u00ed como su expresi\u00f3n a nivel g\u00e9nico mediante pcr a tiempo real. Para evaluar si en la condrog\u00e9nesis se estaba produciendo hipertrofia de las c\u00e9lulas, hemos realizado inmunohistoqu\u00edmica contra la prote\u00edna del col\u00e1geno tipo x  y la metaloproteasa 13, as\u00ed como su validaci\u00f3n mediante pcr a tiempo real para observar la expresi\u00f3n a nivel de arnm de los genes que codifican para estas prote\u00ednas. Una vez testado el potencial condrog\u00e9nico de nuestras c\u00e9lulas madre se estudi\u00f3 el conjunto de prote\u00ednas que se est\u00e1n expresando durante el proceso de condrog\u00e9nesis de nuestro modelo, tanto de las prote\u00ednas que las c\u00e9lulas est\u00e1n secretando, mediante una primera separaci\u00f3n realizada por nanolc e identificaci\u00f3n pept\u00eddica por maldi tof\/tof, as\u00ed como de las prote\u00ednas intracelulares de las c\u00e9lulas madre mesenquimales del estroma de cord\u00f3n umbilical humano, mediante dige, y posterior identificaci\u00f3n de los p\u00e9ptidos por maldi tof\/tof.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estudio de la condrogenesis de celulas madre mesenquimales humanas procedentes de membrana sinovial y estroma de cordon umbilical<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estudio de la condrogenesis de celulas madre mesenquimales humanas procedentes de membrana sinovial y estroma de cordon umbilical <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Alexandre De La Fuente Gonzalez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 A coru\u00f1a<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 18\/03\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Francisco Blanco Garc\u00eda<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Francisco javier De toro santos <\/li>\n<li>antxo Vidal figueroa (vocal)<\/li>\n<li>isabel Liste noya (vocal)<\/li>\n<li>mirna Perez moreno (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Alexandre De La Fuente Gonzalez En este trabajo desarrollamos un protocolo de aislamiento de c\u00e9lulas madre mesenquimales 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