{"id":110455,"date":"2018-03-11T10:36:30","date_gmt":"2018-03-11T10:36:30","guid":{"rendered":""},"modified":"2018-03-11T10:36:30","modified_gmt":"2018-03-11T10:36:30","slug":"expresion-antigenica-por-inmunohistoqua%c2%admica-e-inmunocitoqua%c2%admica-y-western-blot-de-protea%c2%adnas-del-citoesqueleto-y-de-la-mielina-en-celulas-de-ma%c2%bcller-de-la-retina-de-los-vertebrad","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/embriologia\/expresion-antigenica-por-inmunohistoqua%c2%admica-e-inmunocitoqua%c2%admica-y-western-blot-de-protea%c2%adnas-del-citoesqueleto-y-de-la-mielina-en-celulas-de-ma%c2%bcller-de-la-retina-de-los-vertebrad\/","title":{"rendered":"Expresi\u00f3n antig\u00e9nica por inmunohistoqu\u00edmica e inmunocitoqu\u00edmica y western blot de prote\u00ednas del citoesqueleto y de la mielina en c\u00e9lulas de m\u00c1\u00bcller de la retina de los vertebrados"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Adela Prada Quesada <\/strong><\/h2>\n<p>Los estudios al microscopio electr\u00f3nico en la retina de las aves han mostrado que las prolongaciones de las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller, envuelven a los axones de las c\u00e9lulas ganglionares. Sin embargo, los mecanismos de c\u00f3mo estas c\u00e9lulas contribuyen a la mielinizaci\u00f3n no se conocen. Tampoco se sabe si las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller de retinas mielinizadas en otros vertebrados participan en dicho proceso. El objetivo principal de esta tesis doctoral ha sido encontrar los datos moleculares que demuestren la participaci\u00f3n de las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller en el proceso de mielinizaci\u00f3n de los axones de las c\u00e9lulas ganglionares de la retina de las aves.  buscamos mol\u00e9culas expresadas espec\u00edficamente en la mielina y por los oligodendrocitos del snc, que no hubieran sido previamente estudiadas en la retina del pollo. Elegimos mosp, una mol\u00e9cula de la superficie de la membrana que se expresa espec\u00edficamente en la mielina y por los oligodendrocitos del snc de vertebrados (dyer y cols., 1991). hemos estudiado la expresi\u00f3n de mosp en secciones de retina del pollo inmunorreaccionadas con el anticuerpo monoclonal anti-mosp, encontrando su expresi\u00f3n en las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller, en las c\u00e9lulas peripapilares y en las terminaciones del ax\u00f3n de las c\u00e9lulas horizontales. La demostraci\u00f3n de estos hechos ha sido posible gracias a la utilizaci\u00f3n en paralelo de marcajes individuales  y dobles marcajes con anticuerpos que reconocen prote\u00ednas del citoesqueleto de las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller como la vimentina y 3cb2 (prada y cols., 1995), y anticuerpos que reconocen mol\u00e9culas funcionales como la glutamina sintetasa (gs), la cual s\u00f3lo est\u00e1 presente en astrocitos del snc y en las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller de la retina (prada y cols., 1998).  Otras mol\u00e9culas relacionadas con la mielina como mag, gal c, o4, y a2b5, tambi\u00e9n fueron testadas; encontrando que su localizaci\u00f3n est\u00e1 restringida a la capa de fibras del nervio \u00f3ptico, excepto para o4.  la expresi\u00f3n de mosp en c\u00e9lulas gliales peripapilares nos llev\u00f3 a realizar una caracterizaci\u00f3n molecular de estas c\u00e9lulas (quesada y cols., 2004). Para demostrar que ninguna otra c\u00e9lula de la retina del pollo expresa mosp, hicimos preparaciones de c\u00e9lulas disociadas con la enzima sf-proteasa, esta t\u00e9cnica disocia las c\u00e9lulas preservando sus formas naturales (l\u00f3pez y cols., 1997) las c\u00e9lulas disociadas fueron inmunorreaccionadas con anti-mosp y con anti-gs. Mosp se expreso exclusivamente en las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller y en los terminales de los axones de las c\u00e9lulas horizontales.  los inmunoblots de extractos proteicos de retinas nos han permitido determinar el peso molecular de mosp.  para demostrar que la expresi\u00f3n de mosp en las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller est\u00e1 relacionada con el proceso de mielinizaci\u00f3n, partimos de la hip\u00f3tesis de que la c\u00e9lula de m\u00ed\u00bcller de todas las retinas mielinizadas deber\u00edan expresar mosp, mientras que las c\u00e9lulas de las retinas no mielinizadas no lo expresar\u00edan. Para ello estudiamos inmunohistoqu\u00edmica e inmunocitoqu\u00edmicamente y con inmunoblot, la expresi\u00f3n de mosp en las retinas de la tortuga y del lagarto que son mielinizadas, en la retina del conejo que es parcialmente mielinizadas, y en las retinas de la rata y del ser humano que son amiel\u00ednicas (la retina humana puede sin embargo ser mielinizada). Nuestra hip\u00f3tesis fue confirmada. Adem\u00e1s pudimos observar que las retinas del lagarto y del conejo expresan mosp solamente en las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller.  finalmente, estudiamos la expresi\u00f3n de mosp en la retina embrionaria del pollo, para establecer una posible relaci\u00f3n espacial-temporal entre el inicio de la expresi\u00f3n de mosp y el comienzo de la mielinizaci\u00f3n. Encontramos que mosp comienza a expresarse espec\u00edficamente en la c\u00e9lula de m\u00ed\u00bcller en un \u00e1rea dorsocentrotemporal (dct) cerca de la cabeza del nervio \u00f3ptico en e13, un d\u00eda antes de que la mielinizaci\u00f3n empiece a ser observada por microscopia electr\u00f3nica en la retina central (nakazawa y cols., 1993). Nuestros resultados evidencian que las c\u00e9lulas de m\u00ed\u00bcller de las retinas mielinizadas son formadoras de mielina, y contribuye con mosp a la mielinizaci\u00f3n de dicho tejido.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Expresi\u00f3n antig\u00e9nica por inmunohistoqu\u00edmica e inmunocitoqu\u00edmica y western blot de prote\u00ednas del citoesqueleto y de la mielina en c\u00e9lulas de m\u00c1\u00bcller de la retina de los vertebrados<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Expresi\u00f3n antig\u00e9nica por inmunohistoqu\u00edmica e inmunocitoqu\u00edmica y western blot de prote\u00ednas del citoesqueleto y de la mielina en c\u00e9lulas de m\u00c1\u00bcller de la retina de los vertebrados <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Adela Prada Quesada <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Sevilla<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 20\/07\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Adela Quesada Ruiz<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: manuel Rosety plaza <\/li>\n<li>pablo Salinas s\u00e1nchez (vocal)<\/li>\n<li>carola Chmielewski alvarez (vocal)<\/li>\n<li>Juan Jim\u00e9nez-castellano ballesteros (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Adela Prada Quesada Los estudios al microscopio electr\u00f3nico en la retina de las aves han mostrado que 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