{"id":110581,"date":"2018-03-11T10:36:41","date_gmt":"2018-03-11T10:36:41","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/evaluacion-de-los-metodos-de-cribado-para-el-control-de-la-presencia-de-antibioticos-en-la-leche-cruda-de-vaca\/"},"modified":"2018-03-11T10:36:41","modified_gmt":"2018-03-11T10:36:41","slug":"evaluacion-de-los-metodos-de-cribado-para-el-control-de-la-presencia-de-antibioticos-en-la-leche-cruda-de-vaca","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/productos-lacteos\/evaluacion-de-los-metodos-de-cribado-para-el-control-de-la-presencia-de-antibioticos-en-la-leche-cruda-de-vaca\/","title":{"rendered":"Evaluaci\u00f3n de los m\u00e9todos de cribado para el control de la presencia de antibi\u00f3ticos en la leche cruda de vaca"},"content":{"rendered":"

Tesis doctoral de Milagro Borr\u00c1\u00a0s Llopis <\/strong><\/h2>\n

El control de residuos de sustancias antimicrobianas en productos de origen animal, entre los que se encuentra la leche, es de gran importancia, ya que pueden ocasionar problemas al consumidor (alergias, trastornos digestivos, resistencias a medicamentos, etc.) Y, adem\u00e1s, causar interferencias en la fabricaci\u00f3n de productos l\u00e1cteos ocasionando graves p\u00e9rdidas econ\u00f3micas en la industria l\u00e1ctea. por ello, resulta conveniente establecer un adecuado sistema de control de la presencia de residuos de aquellos antimicrobianos m\u00e1s utilizados en el ganado vacuno lechero, mediante m\u00e9todos eficaces y pr\u00e1cticos que pueden ser utilizados en las explotaciones ganaderas y centros l\u00e1cteos, y as\u00ed evitar su llegada al consumidor. debido a la diversidad de m\u00e9todos anal\u00edticos disponibles en el mercado para la detecci\u00f3n de antibi\u00f3ticos se plante\u00f3 el estudio de la selectividad y sensibilidad de los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos y espec\u00edficos m\u00e1s utilizados en la etapa de cribado. en el estudio de selectividad se emplearon 14 m\u00e9todos (7 microbiol\u00f3gicos y 7 espec\u00edficos) y se analizaron, por triplicado, 100 muestras de leche procedentes de animales no tratados con ning\u00fan medicamento. La selectividad obtenida para los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos fue muy elevada: brt aim (99%), blue yellow (100%), cmt copan (100%), delvotest mcs accelerator (98%), delvotest sp-nt (98%), eclipse 50 (99%) y eclipse 100 (99%) y no present\u00f3 diferencias significativas entre los m\u00e9todos. Tambi\u00e9n la selectividad calculada para los m\u00e9todos espec\u00edficos alcanz\u00f3 valores elevados: beta star (97%), delvo xp (99%), rosa mrl bl (100%), rosa tet (99%), snap bl y snap tet (100%) y twinsensor bl (100%) y twinsensor tet (98%) que no presentaron diferencias significativas (p<0,05), mientras que el m\u00e9todo penzym fue el \u00fanico en el que la selectividad result\u00f3 m\u00e1s baja (82%) con un elevado porcentaje de resultados dudosos y estad\u00edsticamente fue diferente al resto de m\u00e9todos espec\u00edficos. en cuanto a la sensibilidad se calcul\u00f3 utilizando muestras de leche, procedentes de la mezcla de 30 animales individuales. Se ensayaron 20 sustancias antimicrobianas y se estudiaron a tres concentraciones distintas (0,5 lmr, lmr y 2 lmr), aunque en algunos casos se ensayaron diferentes concentraciones (lmr, 2 lmr y 4 lmr o 0,25 lmr, 0,5 lmr y lmr) dependiendo de la proximidad de los l\u00edmites de detecci\u00f3n de los m\u00e9todos a los l\u00edmites m\u00e1ximos de residuos (lmrs) de cada antibi\u00f3tico. Se analizaron 30 repeticiones de cada concentraci\u00f3n para los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos y 10 repeticiones para los espec\u00edficos. los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos presentaron, en general, una sensibilidad elevada para los antibi\u00f3ticos betalact\u00e1micos a una concentraci\u00f3n equivalente a sus lmrs. En el caso de los m\u00e9todos espec\u00edficos a betalact\u00e1micos, los resultados fueron variables seg\u00fan el m\u00e9todo y la mol\u00e9cula ensayada. Sin embargo la sensibilidad de estos m\u00e9todos fue elevada al lmr para la penicilina g, cefalexina, cefalonio, cefoperazona, cefquinoma y ceftiofur. para los otros grupos de antimicrobianos estudiados (aminogluc\u00f3sidos, macr\u00f3lidos, quinolonas y tetraciclinas), los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos no fueron capaces de detectar ninguna de las sustancias estudiadas al lmr, excepto en algunos casos como la neomicina con el brt aim, blue yellow y delvotest sp-nt que presentaron una sensibilidad del 100% al lmr. en cuanto a los m\u00e9todos espec\u00edficos a tetraciclinas, todos los m\u00e9todos ensayados (rosa tet, snap tet y twinsensor) presentaron una sensibilidad del 100% para la detecci\u00f3n de oxitetraciclina al lmr (100 \u00c2\u00b5g\/kg) aunque el rosa tet y el snap tet obtuvieron esta sensibilidad a una concentraci\u00f3n equivalente a 0,5 lmr (50 \u00c2\u00b5g\/kg). Tambi\u00e9n la gentamicina y enrofloxacina fueron analizadas por sus correspondientes m\u00e9todos espec\u00edficos (snap gentamicin, equinox y rosa enrofloxacin) con una sensibilidad en todos los casos del 100% al l\u00edmite m\u00e1ximo de residuos. a partir de los resultados de sensibilidad obtenidos se aplic\u00f3 el an\u00e1lisis multivariante de conglomerados (cluster) y el an\u00e1lisis por componentes principales (pca). Los resultados obtenidos mostraron que los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos brt aim, blue yellow, cmt copan, delvotest mcs accelerator, delvotest sp-nt, eclipse 50 y eclipse 100 presentaron un comportamiento similar respecto a los resultados de sensibilidad, lo mismo ocurre con los m\u00e9todos espec\u00edficos beta star, twinsensor, delvo xp, rosa mrl bl y snap bl. tambi\u00e9n con los resultados de sensibilidad obtenidos y las frecuencias de uso de las sustancias antimicrobianas m\u00e1s empleadas en el tratamiento del ganado vacuno lechero se han establecido distintas agrupaciones entre los m\u00e9todos de cribado, para poder recomendar una combinaci\u00f3n de m\u00e9todos que permita garantizar el mayor espectro en la detecci\u00f3n de antimicrobianos en la leche. A partir de los resultados se evidencia que no existe un \u00fanico m\u00e9todo que pueda cubrir la detecci\u00f3n de la totalidad de los antibi\u00f3ticos. As\u00ed, con la aplicaci\u00f3n de un m\u00e9todo microbiol\u00f3gico se logra detectar entre el 51,3-70,4% de los antibi\u00f3ticos. Por otro lado, los m\u00e9todos receptores proteicos a betalact\u00e1micos solo llegan a detectar entre el 29,7-54,6% de los antibi\u00f3ticos utilizados. Adem\u00e1s, la utilizaci\u00f3n de dos m\u00e9todos de cribado de forma simult\u00e1nea microbiol\u00f3gico-espec\u00edfico betalact\u00e1micos no mejora notablemente la frecuencia de mol\u00e9culas a detectar (65,8-71,5%) en comparaci\u00f3n con los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos, pero permite un control m\u00e1s eficiente, al efectuar dos controles por cada muestra de leche. la incorporaci\u00f3n de un m\u00e9todo espec\u00edfico para la detecci\u00f3n de residuos de tetraciclinas en leche a las combinaciones de microbiol\u00f3gico-especifico betalact\u00e1micos permite incrementar el porcentaje de cobertura de antibi\u00f3ticos en leche entre el 68,1-73,8%. Adem\u00e1s, la incorporaci\u00f3n en forma peri\u00f3dica de controles de gentamicina (5,7%) con el m\u00e9todo snap gentamicin y enrofloxacina (2,3%) con los m\u00e9todos equinox o enroflox permitir\u00eda llegar a detectar hasta el 81,8% de los antibi\u00f3ticos empleados en espa\u00f1a para el ganado vacuno lechero. por otra parte, ante los escasos estudios sobre el efecto de los factores metodol\u00f3gicos relacionados con la toma de muestras de la leche, se plante\u00f3 la necesidad de realizar una evaluaci\u00f3n sobre la influencia del tiempo de refrigeraci\u00f3n y la presencia de azidiol sobre la respuesta de algunos de los m\u00e9todos microbiol\u00f3gicos de cribado m\u00e1s utilizados en los laboratorios de control para la detecci\u00f3n de los residuos de antibi\u00f3ticos en la leche. en este estudio se emplearon 12 concentraciones de amoxicilina, ampicilina, penicilina g y oxitetraciclina que se analizaron a las 0, 24, 48 y 72 horas de refrigeraci\u00f3n a 4 \u00c2\u00bac, con el objetivo de calcular las p\u00e9rdidas relativas de actividad antimicrobiana para cada antibi\u00f3tico, a partir de los l\u00edmites de detecci\u00f3n de los m\u00e9todos, en muestras de leche sin conservante y con azidiol. Los resultados indicaron, de forma general, que la p\u00e9rdida de actividad antimicrobiana (paa) de los antibi\u00f3ticos aument\u00f3 con el tiempo de refrigeraci\u00f3n de las muestras de leche y que estas p\u00e9rdidas fueron menores en las muestras de leche con azidiol. Por ello, en caso de recurrir a la refrigeraci\u00f3n de las muestras de leche ser\u00eda conveniente el uso de azidiol y realizar el an\u00e1lisis dentro de las primeras 48 horas de su llegada al laboratorio. dada la importancia de la presencia de residuos de medicamentos en la leche para la seguridad alimentaria, se considera conveniente continuar con los estudios sobre m\u00e9todos de detecci\u00f3n de antibi\u00f3ticos y desarrollar metodolog\u00edas anal\u00edticas con espectros de detecci\u00f3n m\u00e1s amplios para el an\u00e1lisis de otros grupos de antimicrobianos, como los aminogluc\u00f3sidos, macr\u00f3lidos y quinolonas, dada su elevada frecuencia de uso en vacuno lechero y la falta de sensibilidad de los actuales m\u00e9todos de cribado. La implementaci\u00f3n del actual sistema de control con otros m\u00e9todos espec\u00edficos o con m\u00e9todos de mayor espectro de detecci\u00f3n permitir\u00eda establecer una estrategia anal\u00edtica m\u00e1s conveniente que la aplicada en la actualidad.\n\n\n\n \n\n\n

Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00abEvaluaci\u00f3n de los m\u00e9todos de cribado para el control de la presencia de antibi\u00f3ticos en la leche cruda de vaca<\/strong>\u00ab<\/h3>\n
    \n
  • T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Evaluaci\u00f3n de los m\u00e9todos de cribado para el control de la presencia de antibi\u00f3ticos en la leche cruda de vaca <\/li>\n
  • Autor:<\/strong>\u00a0 Milagro Borr\u00c1\u00a0s Llopis <\/li>\n
  • Universidad:<\/strong>\u00a0 Polit\u00e9cnica de Valencia<\/li>\n
  • Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 22\/07\/2011<\/li>\n<\/ul>\n

     <\/p>\n

    Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n
      \n
    • Director de la tesis<\/strong>\n
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      • Pilar Molina Pons<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n
      • Tribunal<\/strong>\n
          \n
        • Presidente del tribunal: crist\u00f3fol Peris ribera <\/li>\n
        • Carlos Gonzalo abascal (vocal)<\/li>\n
        • Ana Mar\u00eda Molina casanova (vocal)<\/li>\n
        • Miguel angel Zorraquino lozano (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n

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