{"id":112085,"date":"2018-03-11T10:38:54","date_gmt":"2018-03-11T10:38:54","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/deficiency-of-ae2-in-mice-predisposes-to-liver-injury-associated-with-reduced-levels-of-glutathione-increased-apoptosis-and-development-of-ama\/"},"modified":"2018-03-11T10:38:54","modified_gmt":"2018-03-11T10:38:54","slug":"deficiency-of-ae2-in-mice-predisposes-to-liver-injury-associated-with-reduced-levels-of-glutathione-increased-apoptosis-and-development-of-ama","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/gastroenterologia\/deficiency-of-ae2-in-mice-predisposes-to-liver-injury-associated-with-reduced-levels-of-glutathione-increased-apoptosis-and-development-of-ama\/","title":{"rendered":"Deficiency of ae2 in mice predisposes to liver injury associated with reduced levels of glutathione, increased apoptosis and development of ama"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Alejandro Ferrer Galindo <\/strong><\/h2>\n<p>La cirrosis biliar primaria (pbc) es una enfermedad colest\u00e1sica cr\u00f3nica que afecta sobretodo a mujeres de mediana edad. Inicialmente se observan infiltrados de c\u00e9lulas mononucleares en los espacios porta, junto a da\u00f1o de los conductos biliares y subsiguiente ductopenia a lo largo del tiempo. Adem\u00e1s, la pbc se asocia a fen\u00f3menos de autoinmunidad, con linfocitos t autoreactivos en los infiltrados portales y la aparici\u00f3n de anticuerpos antimitocondriales (ama) frente a la subunidad pdc-e2 del complejo que convierte el piruvato en acetil-coenzyma a. Las modificaciones del anillo del \u00e1cido lipoico unido a la lys-254 de esta subunidad, con apertura (y exposici\u00f3n de 2 grupos \u00c2\u00bfsh) cuando la subunidad desarrolla su actividad catal\u00edtica, se sigue de glutationilaci\u00f3n con glutati\u00f3n oxidado (gssg) disponible, que previene la antigenicidad de la regi\u00f3n pept\u00eddica circundante a lys-254 si la c\u00e9lula sufre apoptosis. El desarrollo de amas en la pbc se ha relacionado con una incapacidad de los colangiocitos para suprimir dicha antigenicidad al tener niveles altos de bcl2 (que reduce el gssg, dificultando la glutationilaci\u00f3n).  hasta ahora, el \u00fanico tratamiento aceptado para la pbc consiste en la administraci\u00f3n diaria de \u00e1cido ursodesoxic\u00f3lico, una sal biliar que produce una coleresis rica en hco3\u00c2\u00bf. Es por ello interesante rese\u00f1ar que los pacientes con pbc muestran una baja expresi\u00f3n hep\u00e1tica del intercambiador de cl\u00c2\u00bf\/hco3\u00c2\u00bf ae2 que media la secreci\u00f3n biliar de hco3\u00c2\u00bf, y que el rat\u00f3n knockout para ae2 muestra caracter\u00edsticas propias de la enfermedad, incluida la presencia de amas en suero. En el presente trabajo se utilizaron extractos de h\u00edgado total as\u00ed como colangiocitos en cultivo aislados de ratones de los tres genotipos para ae2, y se analizaron los niveles de estr\u00e9s oxidativo, glutati\u00f3n total y apoptosis en estas muestras, tanto en condiciones basales como tras administraci\u00f3n del xenobi\u00f3tico 3,5-dietoxicarbonil-1,4-dihidrocolidina (ddc). Mediante inmunohistoqu\u00edmica frente a caspasa 3 activada, se observ\u00f3 que los h\u00edgados de ratones knockout mayores de 9 meses presentan apoptosis y ductopenia. Por otro lado, los niveles de glutati\u00f3n totales fueron inferiores en h\u00edgados de ratones heterozigotos y knockout ama positivos versus los ama negativos y wildtype. Al estudiar los niveles de glutati\u00f3n en colangiocitos aislados, se observ\u00f3 que estos eran m\u00e1s bajos en heterozigotos y knockout en comparaci\u00f3n a c\u00e9lulas normales. El an\u00e1lisis de expresi\u00f3n g\u00e9nica de genes incluidos en la v\u00eda del glutati\u00f3n mostr\u00f3 resultados compatibles con una situaci\u00f3n de estr\u00e9s oxidativo tanto en h\u00edgado como en colangiocitos en cultivo, indicados por la sobreexpresi\u00f3n del mensajero de glutati\u00f3n peroxidasa y glutati\u00f3n sintetasa (sin cambios en glutati\u00f3n reductasa). Adem\u00e1s, se observ\u00f3 un aumento en la proporci\u00f3n de c\u00e9lulas positivas para el marcaje con dihidroetidio, un detector de especies reactivas de ox\u00edgeno, en ambos genotipos deficientes de ae2. Esta proporci\u00f3n aument\u00f3 cuando las c\u00e9lulas fueron incubadas con el xenobi\u00f3tico ddc. Por otro lado, se estudi\u00f3 la presencia de apoptosis mediante la detecci\u00f3n por citometr\u00eda de flujo de la actividad de caspasa 3 as\u00ed como la presencia de anexina v. En ambos casos se observ\u00f3 que basalmente no hab\u00eda diferencia entre genotipos, pero que tras la incubaci\u00f3n con ddc, los niveles de apoptosis se incrementaron exclusivamente en el genotipo deficiente de ae2. De forma interesante, esta sensibilidad ante ddc por parte de los colangiocitos knockout se pudo revertir mediante la adici\u00f3n al medio de glutati\u00f3n reducido 24 horas antes de la inducci\u00f3n de da\u00f1o. Todos los datos obtenidos sugieren que la disminuci\u00f3n de ae2 provoca un aumento en el estr\u00e9s oxidativo de los colangiocitos, que puede hacerlos m\u00e1s sensibles al da\u00f1o y por tanto m\u00e1s propensos a entrar en apoptosis. Adem\u00e1s, los niveles de glutati\u00f3n disminuidos \u00fanicamente en el h\u00edgado de los ratones ama positivos indican una posible relaci\u00f3n entre la aparici\u00f3n de amas y la depleci\u00f3n de glutati\u00f3n.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Deficiency of ae2 in mice predisposes to liver injury associated with reduced levels of glutathione, increased apoptosis and development of ama<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Deficiency of ae2 in mice predisposes to liver injury associated with reduced levels of glutathione, increased apoptosis and development of ama <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Alejandro Ferrer Galindo <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Navarra<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 17\/12\/2011<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan  Francisco Medina Cabrera<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jes\u00fas m. Prieto valtue\u00f1a <\/li>\n<li>i\u00f1igo Lasa uzcudun (vocal)<\/li>\n<li>irene Crespo g\u00f3mez (vocal)<\/li>\n<li>jean Rosenbaum (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Alejandro Ferrer Galindo La cirrosis biliar primaria (pbc) es una enfermedad colest\u00e1sica cr\u00f3nica que afecta sobretodo a [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[491,17749],"tags":[223138,55916,213607,223139,15059,50683],"class_list":["post-112085","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-gastroenterologia","category-navarra","tag-alejandro-ferrer-galindo","tag-inigo-lasa-uzcudun","tag-irene-crespo-gomez","tag-jean-rosenbaum","tag-jesus-m-prieto-valtuena","tag-juan-francisco-medina-cabrera"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/112085","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=112085"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/112085\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=112085"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=112085"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=112085"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}