{"id":112305,"date":"2012-02-02T00:00:00","date_gmt":"2012-02-02T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-molecular-de-n-acetil-d-glucosamina-2-epimerasa-de-bacteroides-ovatus-una-enzima-relevante-en-la-sa%c2%adntesis-de-acido-sialico\/"},"modified":"2012-02-02T00:00:00","modified_gmt":"2012-02-02T00:00:00","slug":"caracterizacion-molecular-de-n-acetil-d-glucosamina-2-epimerasa-de-bacteroides-ovatus-una-enzima-relevante-en-la-sa%c2%adntesis-de-acido-sialico","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/caracterizacion-molecular-de-n-acetil-d-glucosamina-2-epimerasa-de-bacteroides-ovatus-una-enzima-relevante-en-la-sa%c2%adntesis-de-acido-sialico\/","title":{"rendered":"Caracterizaci\u00f3n molecular de n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa de bacteroides ovatus: una enzima relevante en la s\u00edntesis de \u00e1cido si\u00e1lico."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Agustin Sola Carvajal <\/strong><\/h2>\n<p>El \u00e1cido si\u00e1lico es un compuesto de origen gluc\u00eddico que se encuentra en algunas especies de bacterias y animales como componente de los polisac\u00e1ridos y glucoconjugados de la superficie celular. Se sintentiza a partir de un un az\u00facar de 4 a 6 carbonos y el fosfoenolpiruvato mediante condensaci\u00f3n ald\u00f3lica. Entre sus principales funciones biol\u00f3gicas destaca su implicaci\u00f3n en la determinaci\u00f3n de la estructura de diversas macromol\u00e9culas y su participaci\u00f3n en la transferencia de informaci\u00f3n entre c\u00e9lulas y en el reconocimiento celular. Su inter\u00e9s biotecnol\u00f3gico ha ido en aumento en los \u00faltimos a\u00f1os debido a que puede ser utilizado como precursor en la s\u00edntesis de ciertos antivirales contra la gripe (zanamivir) y como suplemento alimenticio en leches maternas de origen sint\u00e9tico. El principal problema para su producci\u00f3n industrial es el elevado precio de su s\u00edntesis, por lo que se ha buscado una alternativa a la s\u00edntesis tradicional utilizando un proceso enzim\u00e1tico, en donde a partir de n-acetil-d-glucosamina se consigue la s\u00edntesis del \u00e1cido sial\u00edco utilizando dos enzimas: n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa (que cataliza la epimerizaci\u00f3n reversible entre n-acetil glucosamina y n-acetil manosamina) y n-acetilneuraminato liasa (que cataliza la condensaci\u00f3n ald\u00f3lica entre n-acetil manosamina y piruvato para dar \u00e1cido si\u00e1lico). De estas dos enzimas, n-acetilneuraminato liasa ha sido ampliamente estudiada y se han realizado experimentos de evoluci\u00f3n dirigida para mejorar su eficiencia y selectividad. Sin embargo, estos experimentos no han podido ser realizado con n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa debido a la ausencia de un m\u00e9todo continuo de medida que permita un screening eficaz.  el objetivo de esta tesis es la puesta a punto de un m\u00e9todo de medida continuo para n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa que permita la realizaci\u00f3n de un screening de variantes generadas por evoluci\u00f3n dirigida y, de esta forma, encontrar un mutante de \u00e9sta enzima con mejoradas caracter\u00edsticas que permita un proceso de producci\u00f3n de \u00e1cido si\u00e1lico mas eficiente y econ\u00f3mico. Para ello se ha llevado a cabo la clonaci\u00f3n y el analisis estructural, de la secuencia y filogen\u00e9tico de posibles deshidrogenasas capaces de actuar sobre la n-acetil manosamina producida por n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa, dando lugar asi, a un ensayo acoplado que se puede seguir f\u00e1cilmente en un espectrofot\u00f3metro a 340 nm. Adem\u00e1s se ha clonado y caracterizado una nueva n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa del pat\u00f3geno bacteroides ovatus y se ha puesto a punto un nuevo m\u00e9todo continuo para su medida y screening, obteniendo dos mutantes mediante evoluci\u00f3n dirigida, uno con mayor actividad espec\u00edfica que la enzima nativa y otro con menor requerimiento de atp.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizaci\u00f3n molecular de n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa de bacteroides ovatus: una enzima relevante en la s\u00edntesis de \u00e1cido si\u00e1lico.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizaci\u00f3n molecular de n-acetil-d-glucosamina 2-epimerasa de bacteroides ovatus: una enzima relevante en la s\u00edntesis de \u00e1cido si\u00e1lico. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Agustin Sola Carvajal <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Murcia<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 02\/02\/2012<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Francisco Garc\u00eda Carmona<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Mar\u00eda teresa Mu\u00ed\u00f1o blanco <\/li>\n<li>Jos\u00e9 \u00e1lvaro Cebri\u00e1n p\u00e9rez (vocal)<\/li>\n<li>estrella N\u00fa\u00f1ez delicado (vocal)<\/li>\n<li>josefa Escribano cebri\u00e1n (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Agustin Sola Carvajal El \u00e1cido si\u00e1lico es un compuesto de origen gluc\u00eddico que se encuentra en algunas 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