{"id":112521,"date":"2018-03-11T10:39:31","date_gmt":"2018-03-11T10:39:31","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/obtencion-de-ciruelos-transgenicos-resistentes-a-sharka-y-eliminacion-de-los-genes-marcadores-en-plantas-de-tabaco-y-arabidopsis-combinando-el-sistema-cre-loxp-y-el-gen-dao1\/"},"modified":"2018-03-11T10:39:31","modified_gmt":"2018-03-11T10:39:31","slug":"obtencion-de-ciruelos-transgenicos-resistentes-a-sharka-y-eliminacion-de-los-genes-marcadores-en-plantas-de-tabaco-y-arabidopsis-combinando-el-sistema-cre-loxp-y-el-gen-dao1","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/cultivo-de-tejidos\/obtencion-de-ciruelos-transgenicos-resistentes-a-sharka-y-eliminacion-de-los-genes-marcadores-en-plantas-de-tabaco-y-arabidopsis-combinando-el-sistema-cre-loxp-y-el-gen-dao1\/","title":{"rendered":"Obtenci\u00f3n de ciruelos transg\u00e9nicos resistentes a sharka y eliminaci\u00f3n de los genes marcadores en plantas de tabaco y arabidopsis combinando el sistema  cre-loxp y el gen dao1"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Carlos Garcia Almodovar <\/strong><\/h2>\n<p>La sharka es la enfermedad viral m\u00e1s perjudicial en los frutales del g\u00e9nero prunus, causando enormes p\u00e9rdidas econ\u00f3micas en los cultivos de ciruelo, albaricoquero y melocotonero. El agente etiol\u00f3gico de la sharka es el plum pox virus (ppv) que pertenece al g\u00e9nero potyvirus. Las dos cepas m\u00e1s importantes en t\u00e9rminos de impacto econ\u00f3mico y hortofrut\u00edcola en el continente europeo son la ppv m (\u00c2\u00bfmarcus\u00c2\u00bf) y la d (\u00c2\u00bfdideron\u00c2\u00bf). una posible estrategia para la obtenci\u00f3n de resistencia a ppv en prunus es mediante biotecnolog\u00eda. El problema en estas especies es la baja eficiencia en los procesos de regeneraci\u00f3n y transformaci\u00f3n, protocolos que adem\u00e1s se limitan a unos pocos genotipos. En la mayor\u00eda de los m\u00e9todos de transformaci\u00f3n desarrollados en especies de prunus se utilizan explantos procedentes de semillas. Entre ellos cabe destacar un protocolo altamente eficiente desarrollado para ciruelo europeo en el que se utilizan secciones de hipocotilo como explanto. en este trabajo se ha utilizado la construcci\u00f3n pbin-h-utr\/p1, que confiere una resistencia a sharka en plantas de tabaco, para obtener, mediante la infecci\u00f3n de hipocotilos con agrobacterium tumefaciens, plantas de ciruelo transg\u00e9nicas resistentes a sharka. Las plantas transg\u00e9nicas se injertaron in vitro sobre plantas de semilla de melocotonero \u00c2\u00bfgf305\u00c2\u00bf infectadas con ppv para evaluar su resistencia frente a la infecci\u00f3n viral. en las l\u00edneas evaluadas no se detect\u00f3 la presencia del virus en ninguno de los injertos o las se\u00f1ales fueron muy d\u00e9biles, desapareciendo la se\u00f1al a las 32 semanas, lo que podr\u00eda indicar que un mecanismo de silenciamiento g\u00e9nico postranscripcional de genes del virus est\u00e1 activado. otro inconveniente en los protocolos de transformaci\u00f3n es la utilizaci\u00f3n de genes marcadores. Estos genes producen un rechazo social e incluso existe una directiva europea (2001\/18\/ce) que regula las plantas transformadas con genes de resistencia a antibi\u00f3ticos, los genes marcadores m\u00e1s com\u00fanmente aplicados en biotecnolog\u00eda vegetal. en nuestro grupo de investigaci\u00f3n llevamos tiempo estudiando la utilizaci\u00f3n de genes alternativos a los que confieren resistencia a antibi\u00f3ticos, que confieran ventajas metab\u00f3licas a las c\u00e9lulas transformadas, permiti\u00e9ndoles crecer en determinados sustratos (por ejemplo los genes pmi, ipt). Tambi\u00e9n se ha trabajado con construcciones que permiten, una vez obtenidas plantas transformadas, eliminar los genes marcadores (como por ejemplo construcciones cre-loxp o los sistemas mat). en la presente tesis doctoral se ha dise\u00f1ado una novedosa construcci\u00f3n que permite la eliminaci\u00f3n de los genes marcadores, combinando el sistema cre-loxp y el gen marcador de selecci\u00f3n bifuncional dao1. Este gen (dao1) permite a las c\u00e9lulas que lo contengan metabolizar d-amino\u00e1cidos que en condiciones normales resultar\u00edan t\u00f3xicos (d-serina, d-alanina) pero, por otro lado, convierte en t\u00f3xicos otros d-amino\u00e1cidos que en condiciones normales no lo son (d-isoleucina y d-valina). El inter\u00e9s de esta construcci\u00f3n est\u00e1 fundamentado en el doble car\u00e1cter selectivo de este gen en el sistema cre-loxp. en la construcci\u00f3n cre-loxp utilizada en este trabajo, la eliminaci\u00f3n mediante recombinaci\u00f3n in situ por medio de la recombinasa cre, que reconoce las secuencias lox, est\u00e1 inducida qu\u00edmicamente por \u00edY-estradiol. Esta nueva estrategia permiti\u00f3 la obtenci\u00f3n de plantas transg\u00e9nicas sin genes marcadores de selecci\u00f3n. La eficiencia de eliminaci\u00f3n, tras la adici\u00f3n de \u00edY-estradiol, de los genes marcadores en plantas transg\u00e9nicas de tabaco fue del 9,4%. Sin embargo, en arabidopsis solo se consigui\u00f3 la eliminaci\u00f3n parcial de estos. la selecci\u00f3n negativa con d-valina en tabaco result\u00f3 muy efectiva, permitiendo solamente el desarrollo de plantas transg\u00e9nicas donde el gen dao1 hab\u00eda sido completamente eliminado.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Obtenci\u00f3n de ciruelos transg\u00e9nicos resistentes a sharka y eliminaci\u00f3n de los genes marcadores en plantas de tabaco y arabidopsis combinando el sistema  cre-loxp y el gen dao1<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Obtenci\u00f3n de ciruelos transg\u00e9nicos resistentes a sharka y eliminaci\u00f3n de los genes marcadores en plantas de tabaco y arabidopsis combinando el sistema  cre-loxp y el gen dao1 <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Carlos Garcia Almodovar <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Murcia<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 16\/03\/2012<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>C\u00e9sar Petri Serrano<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Mar\u00eda del carmen Bolar\u00edn jim\u00e9nez <\/li>\n<li>Mar\u00eda  angeles Pedre\u00f1o garcia (vocal)<\/li>\n<li>nuria Alburquerque ferrando (vocal)<\/li>\n<li>Fernando Pliego alfaro (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Carlos Garcia Almodovar La sharka es la enfermedad viral m\u00e1s perjudicial en los frutales del g\u00e9nero prunus, [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center 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