{"id":114479,"date":"2013-10-07T00:00:00","date_gmt":"2013-10-07T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/regulacion-transcripcional-del-receptor-p2x7-en-celulas-neurales\/"},"modified":"2013-10-07T00:00:00","modified_gmt":"2013-10-07T00:00:00","slug":"regulacion-transcripcional-del-receptor-p2x7-en-celulas-neurales","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-veterinarias\/regulacion-transcripcional-del-receptor-p2x7-en-celulas-neurales\/","title":{"rendered":"Regulaci\u00f3n transcripcional del receptor p2x7 en c\u00e9lulas neurales"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Paula Garcia Huerta <\/strong><\/h2>\n<p>Regulaci\u00f3n transcripcional del receptor p2x7 en c\u00e9lulas neurales.Los receptores purin\u00e9rgicos p2x7 est\u00e1n implicados tanto en procesos fisiol\u00f3gicos como patol\u00f3gicos dentro del sistema nervioso central. Su activaci\u00f3n inicia diversas cascadas de se\u00f1alizaci\u00f3n en funci\u00f3n del tipo celular incluyendo neuroprotecci\u00f3n y control del crecimiento y ramificaci\u00f3n axonal. Actualmente, aunque existen multitud de hallazgos que demuestran que la expresi\u00f3n de p2x7 est\u00e1 alterada en diversas enfermedades neurodegenerativas como huntington as\u00ed como en c\u00e1ncer, se conoce muy poco sobre la regulaci\u00f3n transcripcional del gen p2rx7. En esta tesis se describe por primera vez la implicaci\u00f3n del factor de transcripci\u00f3n sp1 en la regulaci\u00f3n de la expresi\u00f3n del receptor p2x7. Se ha delimitado una regi\u00f3n m\u00ednima en el promotor del gen p2rx7 de rat\u00f3n que contiene cuatro sitios sp1, dos de ellos conservados en mam\u00edferos. La funcionalidad de estos sitios se confirm\u00f3 por mutag\u00e9nesis dirigida y sobreexpresi\u00f3n e interferencia de sp1 en c\u00e9lulas de neuroblastoma de rat\u00f3n n2a. Adem\u00e1s, el tratamiento farmacol\u00f3gico con mitramicina a, un antibi\u00f3tico capaz de inhibir selectivamente la uni\u00f3n de sp1 a sus sitios de uni\u00f3n en el adn, redujo los niveles de expresi\u00f3n en cultivos primarios de neuronas y astrocitos de corteza de rat\u00f3n. El uso del rat\u00f3n transg\u00e9nico p2xr7-egfp que expresa la prote\u00edna verde fluorescente bajo el promotor de p2xr7 nos permiti\u00f3 observar una elevada correlaci\u00f3n entre c\u00e9lulas que expresaban sp1 y gfp en el cerebro, demostrando que sp1 es un elemento clave en la regulaci\u00f3n transcripcional del receptor p2x7 en el sistema nervioso. Una vez identificado sp1 como el principal factor de transcripci\u00f3n implicado en la regulaci\u00f3n de la expresi\u00f3n basal del gen p2rx7, quisimos determinar qu\u00e9 cascadas de se\u00f1alizaci\u00f3n intracelular pod\u00edan regular la expresi\u00f3n del receptor p2x7 a nivel transcripcional y si lo hac\u00edan modulando la actividad del factor sp1 o mediante otros mecanismos. Trabajos previos indicaban que la ausencia de suero facilitaba el acceso del factor de transcripci\u00f3n a sus sitios sp1 en el adn. En ausencia de suero, las c\u00e9lulas de neuroblastoma n2a aumentaba la expresi\u00f3n del receptor p2x7. Sin embargo, otros estudios indican que la ausencia de suero puede activar el receptor del factor de crecimiento epid\u00e9rmico (egf) al alterarse la estructura de la bicapa lip\u00eddica. El tratamiento farmacol\u00f3gico con un inhibidor del egfr nos permiti\u00f3 identificar su implicaci\u00f3n en la regulaci\u00f3n de la transcripci\u00f3n del receptor p2x7. Adem\u00e1s, la activaci\u00f3n del egfr inicia una cascada de se\u00f1alizaci\u00f3n a trav\u00e9s de pi3k y akt capaz de potenciar la actividad de sp1, facilitando su entrada a n\u00facleo y favoreciendo la transcripci\u00f3n de p2rx7. Por otra parte, la retirada de suero provoca la activaci\u00f3n de pkc\u00c2\u00bf, una pkc at\u00edpica que parece estar regulando negativamente la expresi\u00f3n de p2x7. A modo de resumen, y bas\u00e1ndonos en los resultados obtenidos en esta tesis doctoral, podemos concluir que en condiciones \u00f3ptimas de cultivo, donde el medio extracelular es rico en factores tr\u00f3ficos y componentes lipoproteicos que mantienen la estabilidad de la membrana, existe una expresi\u00f3n basal de p2x7 dependiente de sp1 que mantiene a las c\u00e9lulas de neuroblastoma en un estado proliferativo. Cuando se retira el suero del medio de cultivo, se produce una activaci\u00f3n del egfr independiente de ligando y se activa la v\u00eda de pi3k\/akt que en \u00faltima instancia es la responsable de fosforilar y activar sp1. Paralelamente, la privaci\u00f3n de suero induce la activaci\u00f3n de pkc\u00c2\u00bf (ya sea de forma dependiente de pi3k\/pdk-1 o dependiente de ceramidas), que regula negativamente la expresi\u00f3n del receptor p2x7 (ya sea fosforilando sp1 o secuestrando akt). El resultado neto de la privaci\u00f3n de suero es un aumento en la expresi\u00f3n del receptor p2x7 dependiente de sp1.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Regulaci\u00f3n transcripcional del receptor p2x7 en c\u00e9lulas neurales<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Regulaci\u00f3n transcripcional del receptor p2x7 en c\u00e9lulas neurales <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Paula Garcia Huerta <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 10\/07\/2013<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda  Rosa Gomez Villafuertes<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Antonio Rodr\u00edguez artalejo <\/li>\n<li>mairena Martin lopez (vocal)<\/li>\n<li>carmen Arag\u00f3n rueda (vocal)<\/li>\n<li>Jos\u00e9 Manuel Cuezva marcos (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Paula Garcia Huerta Regulaci\u00f3n transcripcional del receptor p2x7 en c\u00e9lulas neurales.Los receptores purin\u00e9rgicos p2x7 est\u00e1n implicados tanto 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