{"id":115232,"date":"2014-07-02T00:00:00","date_gmt":"2014-07-02T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/nuevos-aspectos-del-control-del-metabolismo-en-pseudomonas-putida-kt2440-metabolismo-del-acido-fenilacetico-y-papel-del-gen-apah\/"},"modified":"2014-07-02T00:00:00","modified_gmt":"2014-07-02T00:00:00","slug":"nuevos-aspectos-del-control-del-metabolismo-en-pseudomonas-putida-kt2440-metabolismo-del-acido-fenilacetico-y-papel-del-gen-apah","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/nuevos-aspectos-del-control-del-metabolismo-en-pseudomonas-putida-kt2440-metabolismo-del-acido-fenilacetico-y-papel-del-gen-apah\/","title":{"rendered":"Nuevos aspectos del control del metabolismo en pseudomonas putida kt2440: metabolismo del \u00e1cido fenilac\u00e9tico y papel del gen apah."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Loreine Joselyn Agullo Carvajal <\/strong><\/h2>\n<p>Las v\u00edas metab\u00f3licas para la degradaci\u00f3n microbiana de compuestos   arom\u00e1ticos (ca) y los circuitos reguladores que controlan su expresi\u00f3n han sido   extensamente estudiadas. Por otra parte, el control que ejercen algunos compuestos   arom\u00e1ticos sobre el catabolismo de otros que utilizan rutas perif\u00e9ricas distintas es un   tema poco estudiado en bacterias, y en ning\u00fan caso se ha abordado la posible regulaci\u00f3n   cruzada entre una ruta aer\u00f3bica h\u00edbrida, como la ruta del \u00e1cido fenilac\u00e9tico (afa), y   una ruta aer\u00f3bica cl\u00e1sica que involucra intermediarios catec\u00f3licos. El metabolismo de   los ca supone cambios en los programas celulares b\u00e1sicos como el metab\u00f3lico,   morfol\u00f3gico y de estr\u00e9s. C\u00f3mo se remodelan e integran estos programas celulares   cuando se alteran los niveles de la alarmona ap4a en la c\u00e9lula y la compleja red de   regulaci\u00f3n asociada se ha estudiado en esta tesis. Se utiliz\u00f3 la bacteria p. Putida   kt2440, ya que es un modelo de versatilidad y robusteza metab\u00f3lica, en lo que hace   referencia a los ca, y se dispone de amplios conocimientos de su fisiolog\u00eda,   bioqu\u00edmica, y gen\u00e9tica, como de un modelo metab\u00f3lico a escala gen\u00f3mica (ijn1411).   los objetivos espec\u00edficos son: i) estudiar la regulaci\u00f3n cruzada entre la ruta aer\u00f3bica   h\u00edbrida del afa y las rutas aer\u00f3bicas cl\u00e1sicas del 4-hidroxibenzoato (4hba) y galato   en p. Putida, ii) estudiar los efectos fisiol\u00f3gicos asociados a la inactivaci\u00f3n del gen   apah en p. Putida, iii) determinar las bases moleculares del remodelado de los   programas morfol\u00f3gico, metab\u00f3lico y de estr\u00e9s y caracterizar el sistema de se\u00f1alizaci\u00f3n\/  regulaci\u00f3n que responde a la inactivaci\u00f3n del gen apah en p. Putida.  los resultados demostraron que el afa ralentiza el consumo de 4hba. El   an\u00e1lisis de la expresi\u00f3n de los genes de la ruta del 4hba permiti\u00f3 determinar que el   efecto represor se ejerce a nivel transcripcional sobre los operones pcagh, pcarkf y   poba. Se determin\u00f3 tambi\u00e9n, que el efecto represor es debido al metabolismo del afa   y que \u00e9ste reprime la actividad de los promotores pt y pb que controlan los genes de la   ruta del galato.  mediante mutag\u00e9nesis al azar obtuvimos una cepa mutante en el gen apah   (codifica la principal hidrolasa de la alarmona ap4a en bacterias) que no presenta   represi\u00f3n del afa sobre el promotor pt,   estar\u00edan involucrados en fen\u00f3menos de represi\u00f3n catab\u00f3lica. La inactivaci\u00f3n de este gen   en p. Putida, provoca efectos pleiotr\u00f3picos, ocasionando una reducci\u00f3n de la movilidad   celular, de la producci\u00f3n de pioverdina y de la resistencia al estr\u00e9s oxidativo, y por   otro lado, un incremento de la formaci\u00f3n de biofilm y resistencia al estr\u00e9s osm\u00f3tico,   as\u00ed como una caracter\u00edstica fase de latencia extendida de los cultivos cuando se utilizan   diferentes fuentes de carbono.  de transcripci\u00f3n cuantitativa y de distribuci\u00f3n de flujo utilizando el modelo metab\u00f3lico,   se confirm\u00f3 a nivel molecular que la inactivaci\u00f3n del gen apah afecta tanto a los   programas de estr\u00e9s y morfol\u00f3gico como al programa metab\u00f3lico. Una consecuencia   principal de la inactivaci\u00f3n del gen apah en p. Putida es el remodelado del   metabolismo central y la inducci\u00f3n de isoenzimas poco habituales en la c\u00e9lula, lo que   provoca un estado energ\u00e9tico sub\u00f3ptimo que podr\u00eda explicar la fase de latencia   extendida as\u00ed como otros fenotipos relacionados con los programas de estr\u00e9s y   morfol\u00f3gico. Se determin\u00f3, que el gen rpos, que codifica el factor sigma alternativo   rpos de respuesta a estr\u00e9s, parece desempe\u00f1ar un papel central en la cascada de   regulaci\u00f3n que responde a la inactivaci\u00f3n del gen apah, y que implica tambi\u00e9n a los   rsm srna y el sistema regulador global gacs\/gaca en p. Putida. Esta tesis abre   campos de investigaci\u00f3n futura sobre el papel de ap4a como mol\u00e9cula se\u00f1al central y   como un elemento importante para el dise\u00f1o de microorganismos con aplicaciones   biotecnol\u00f3gicas.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Nuevos aspectos del control del metabolismo en pseudomonas putida kt2440: metabolismo del \u00e1cido fenilac\u00e9tico y papel del gen apah.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Nuevos aspectos del control del metabolismo en pseudomonas putida kt2440: metabolismo del \u00e1cido fenilac\u00e9tico y papel del gen apah. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Loreine Joselyn Agullo Carvajal <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 07\/02\/2014<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan Nogales Enrique<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: julian Perera gonzalez <\/li>\n<li>Jos\u00e9 Luis Garcia lopez (vocal)<\/li>\n<li>Fernando Rojo de castro (vocal)<\/li>\n<li>abraham Esteve nu\u00f1ez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Loreine Joselyn Agullo Carvajal Las v\u00edas metab\u00f3licas para la degradaci\u00f3n microbiana de compuestos arom\u00e1ticos (ca) y los 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