{"id":115560,"date":"2018-03-11T10:44:09","date_gmt":"2018-03-11T10:44:09","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/reconstitucion-funcional-de-elementos-del-divisoma-bacteriano-en-nanoddiscos\/"},"modified":"2018-03-11T10:44:09","modified_gmt":"2018-03-11T10:44:09","slug":"reconstitucion-funcional-de-elementos-del-divisoma-bacteriano-en-nanoddiscos","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/reconstitucion-funcional-de-elementos-del-divisoma-bacteriano-en-nanoddiscos\/","title":{"rendered":"Reconstituci\u00f3n funcional de elementos del divisoma bacteriano en nanoddiscos."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Concepci\u00f3n Garc\u00eda Monta\u00f1\u00e9s <\/strong><\/h2>\n<p>La divisi\u00f3n celular en e. Coli implica el ensamblaje de un complejo macromolecular, denominado divisoma, formado por varias prote\u00ednas, 10 de ellas esenciales. Se conoce la secuencia lineal y concertada de ensamblaje que siguen estas prote\u00ednas del divisoma y algunas de sus actividades bioqu\u00edmicas, as\u00ed como algunas interacciones prote\u00edna-prote\u00edna involucradas. Inicialmente, 3 prote\u00ednas, ftsz, zipa y ftsa ensamblan juntas formando el proto-anillo en el cual se van incorporando el resto de componentes. El anillo-z es altamente din\u00e1mico y su posici\u00f3n se regula por 2 sistemas de control negativo que inhiben la formaci\u00f3n del anillo en posiciones err\u00f3neas. El complejo inicial recluta m\u00e1s tarde el resto de prote\u00ednas de divisi\u00f3n, siendo todas ellas prote\u00ednas de membrana. En la presente tesis se ha usado un sistema de membrana in vitro, llamado nanodiscos, para estudiar 2 prote\u00ednas de divisi\u00f3n de membrana, zipa y ftsn. Zipa es una prote\u00edna de 36.4 kda con una \u00fanica h\u00e9lice transmembrana seguida de un largo dominio desestructurado flexible y un peque\u00f1o dominio c-terminal que une ftsz en el citoplasma. Ftsn, en cambio, presenta una topolog\u00eda inversa, con un peque\u00f1o n-terminal desestructurado y cargado en el citoplasma seguido de un dominio transmembrana, un dominio grande y flexible y un peque\u00f1o dominio spor en la cara peripl\u00e1smica que interacciona con peptidoglicano. Ambas prote\u00ednas se incorporaron en nanodiscos, un modelo de membrana que consiste en un parche de l\u00edpidos con forma de disco formando una bicapa rodeado por 2 copias de la prote\u00edna msp (membrane scaffold protein), an\u00e1loga de la prote\u00edna apoa-1, la cual estabiliza la membrana. Estas estructuras son solubles, monodispersas y tienen un di\u00e1metro de unos 10 nm. Los nanodiscos proporcionan un entorno topol\u00f3gicamente restringido a las prote\u00ednas de membrana mientras las mantiene en soluci\u00f3n, permitiendo el uso de un gran n\u00famero de de herramientas bioqu\u00edmicas y biof\u00edsicas para caracterizar cuantitativamente las prote\u00ednas insertadas en ellos y sus interacciones. El objetivo general de esta tesis fue poner a punto el sistema de nanodiscos como soporte para el estudio de interacciones entre prote\u00ednas del divisoma de e. Coli. Este trabajo es pionero en espa\u00f1a, tanto en el uso del sistema de nanodiscos para insertar prote\u00ednas de membrana, como en la aplicaci\u00f3n de este sistema para medir interacciones entre prote\u00ednas de forma cuantitativa.La primera parte de la tesis describe la caracterizaci\u00f3n hidrodin\u00e1mica de los nanodiscos mediante ultracentrifugaci\u00f3n anal\u00edtica (auc) y dispersi\u00f3n de luz din\u00e1mica (dls), con el objetivo de establecer una referencia para experimentos m\u00e1s complejos que incluyan prote\u00ednas de membrana en nanodiscos.La segunda parte, describe la incorporaci\u00f3n de la prote\u00edna completa zipa en nanodiscos y su caracterizaci\u00f3n biof\u00edsica mediante auc, dls y espectroscop\u00eda de correlaci\u00f3n de fluorescencia (fcs), adem\u00e1s de la caracterizaci\u00f3n mediante microscop\u00eda electr\u00f3nica de transmisi\u00f3n (tem). Adem\u00e1s, se estudi\u00f3 la interacci\u00f3n de los nanodiscos de zipa con ftsz, tanto en su forma oligom\u00e9rica gdp, como en su forma polim\u00e9rica gtp mediante auc y fcs; los complejos ftsz\/nanodiscos se visualizaron mediante tem.Finalmente, la tercera parte describe la purificaci\u00f3n, caracterizaci\u00f3n e incorporaci\u00f3n de ftsn en nanodiscos, usando las mismas t\u00e9cnicas que las descritas para zipa.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Reconstituci\u00f3n funcional de elementos del divisoma bacteriano en nanoddiscos.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Reconstituci\u00f3n funcional de elementos del divisoma bacteriano en nanoddiscos. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Concepci\u00f3n Garc\u00eda Monta\u00f1\u00e9s <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 27\/04\/2014<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>V\u00edctor Manuel Hern\u00e1ndez Rocamora<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jes\u00fas Perez gil <\/li>\n<li>Manuel Prieto (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda dolores P\u00e9rez-sala gozalo (vocal)<\/li>\n<li>Jes\u00fas Mingorance cruz (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Concepci\u00f3n Garc\u00eda Monta\u00f1\u00e9s La divisi\u00f3n celular en e. Coli implica el ensamblaje de un complejo macromolecular, denominado [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[160,986],"tags":[228540,85696,25839,19546,206530,191368],"class_list":["post-115560","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-bioquimica","category-complutense-de-madrid","tag-concepcion-garcia-montanes","tag-jesus-mingorance-cruz","tag-jesus-perez-gil","tag-manuel-prieto","tag-maria-dolores-perez-sala-gozalo","tag-victor-manuel-hernandez-rocamora"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/115560","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=115560"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/115560\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=115560"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=115560"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=115560"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}