{"id":116118,"date":"2018-03-11T10:44:58","date_gmt":"2018-03-11T10:44:58","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-fa%c2%adsico-qua%c2%admica-y-biologica-de-filmes-de-quitosano-como-transportadores-de-la-rhbmp-2-en-la-regeneracion-de-tejido-oseo\/"},"modified":"2018-03-11T10:44:58","modified_gmt":"2018-03-11T10:44:58","slug":"caracterizacion-fa%c2%adsico-qua%c2%admica-y-biologica-de-filmes-de-quitosano-como-transportadores-de-la-rhbmp-2-en-la-regeneracion-de-tejido-oseo","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/caracterizacion-fa%c2%adsico-qua%c2%admica-y-biologica-de-filmes-de-quitosano-como-transportadores-de-la-rhbmp-2-en-la-regeneracion-de-tejido-oseo\/","title":{"rendered":"Caracterizaci\u00f3n f\u00edsico-qu\u00edmica y biol\u00f3gica de filmes de quitosano como transportadores de la rhbmp-2 en la regeneraci\u00f3n de tejido \u00f3seo"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Ana Fatima Civantos Fernandez <\/strong><\/h2>\n<p>Gracias a las caracter\u00edsticas de inocuidad, biodegradabilidad y biocompatibilidad el quitosano se ha convertido en un pol\u00edmero natural de gran inter\u00e9s en el campo de la ingenier\u00eda de tejidos. No obstante la ausencia de normas y m\u00e9todos de obtenci\u00f3n estandarizados dificultan su comercializaci\u00f3n como sistema de liberaci\u00f3n controlada de f\u00e1rmacos. En la actualidad es necesaria la realizaci\u00f3n de una caracterizaci\u00f3n f\u00edsico-qu\u00edmica exhaustiva que permita evaluar los par\u00e1metros m\u00e1s influyentes en las propiedades biol\u00f3gicas del mismo.En este trabajo se han desarrollado pel\u00edculas (filmes) de quitosanos como transportadores de la prote\u00edna recombinante humana morfogen\u00e9tica \u00f3sea 2 (rhbmp2) para la regeneraci\u00f3n de tejido \u00f3seo. Para ello se han caracterizado los principales par\u00e1metros f\u00edsico-qu\u00edmicos de 12 quitosanos diferentes (en peso molecular, grado de desacetilaci\u00f3n e \u00edndice de cristalinidad) que van a influir en sus propiedades biol\u00f3gicas, as\u00ed como tambi\u00e9n otras caracter\u00edsticas que nos permiten trabajar de forma homog\u00e9nea (como el contenido de humedad, cenizas e insolubles) y el contenido de metales pesados, indispensable para aplicaciones en biomedicina.Los filmes obtenidos por la t\u00e9cnica de evaporaci\u00f3n de solvente fueron homog\u00e9neos transparentes y lisos, cuyos par\u00e1metros superficiales (topograf\u00eda superficial, rugosidad, espesor y \u00e1ngulo de contacto) revelaron ser superficies polim\u00e9ricas adecuadas para las interacciones necesarias en los procesos celulares. Se observ\u00f3 una r\u00e1pida cin\u00e9tica de hinchamiento a diferentes phs, estando relacionado con la liberaci\u00f3n de factores bioactivos. Los ensayos de degradaci\u00f3n in vitro simulando las condiciones in vivo (con y sin enzima lisozima a ph \u00e1cido y neutro presentes en la reparaci\u00f3n de una herida) mostraron cin\u00e9ticas m\u00e1s r\u00e1pidas en presencia de enzima y medio \u00e1cido. En cambio sin enzima y en ese medio se observaron diferentes comportamientos en funci\u00f3n del peso molecular. En medio ph neutro (con y sin enzima) los filmes presentaron una degradaci\u00f3n muy lenta, revelando la gran estabilidad de los mismos en estas condiciones. Los filmes permitieron la adhesi\u00f3n y proliferaci\u00f3n de la l\u00ednea celular c2c12 mostrando como superficies \u00f3ptimas para la proliferaci\u00f3n celular los quitosanos de bajo peso molecular, alto grado de desacetilaci\u00f3n y baja concentraci\u00f3n de pol\u00edmero. En cambio se obtuvieron mejores niveles de adhesi\u00f3n celular sobre filmes de mayor concentraci\u00f3n y mayor peso molecular relacionado con una rugosidad m\u00e1s adecuada para las interacciones iniciales celulares. Los filmes cargados con prote\u00edna permitieron la liberaci\u00f3n de la misma de forma activa produciendo la diferenciaci\u00f3n de las c\u00e9lulas c2c12, mediante la detecci\u00f3n de la actividad fosfatasa alcalina. Los ensayos de liberaci\u00f3n in vitro se realizaron cuantificando la actividad fosfatasa alcalina de las c2c12 cultivadas con medios (dmem completo) que estuvieron en contacto con los filmes a determinados tiempos. Se obtuvo un comportamiento exponencial de una sola constante de tiempo y s\u00f3lo a dosis bajas se observ\u00f3 un proceso lineal. En todos los casos se detect\u00f3 un efecto explosi\u00f3n (burst) en las primeras 24 horas. La liberaci\u00f3n desde diferentes filmes tambi\u00e9n mostr\u00f3 ese comportamiento exponencial de una sola constante de tiempo excepto quitosanos de elevado peso molecular cuya liberaci\u00f3n es muy r\u00e1pida. Los dem\u00e1s quitosanos mostraron cin\u00e9ticas similares entre ellos con una misma constante de velocidad y misma semivida. A trav\u00e9s de los ensayos in vivo se comprob\u00f3 la liberaci\u00f3n de la prote\u00edna activa mediante tinciones histol\u00f3gicas y estudios de microtomograf\u00eda computarizada, observando la formaci\u00f3n de hueso ect\u00f3pico en m\u00fasculo de rata. El marcaje de la prote\u00edna con yodo 125 permiti\u00f3 localizar los sitios de retenci\u00f3n de la misma en el organismo demostrando la capacidad de retenci\u00f3n de la prote\u00edna en el filme hasta los diez d\u00edas de ensayo y su excreci\u00f3n en las primeras 24 horas por v\u00eda renal.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizaci\u00f3n f\u00edsico-qu\u00edmica y biol\u00f3gica de filmes de quitosano como transportadores de la rhbmp-2 en la regeneraci\u00f3n de tejido \u00f3seo<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizaci\u00f3n f\u00edsico-qu\u00edmica y biol\u00f3gica de filmes de quitosano como transportadores de la rhbmp-2 en la regeneraci\u00f3n de tejido \u00f3seo <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Ana Fatima Civantos Fernandez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 15\/07\/2014<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Viviana Ramos Lino<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 vicente Sanz casado <\/li>\n<li>Alberto Gallardo ruiz (vocal)<\/li>\n<li>Miguel angel Morcillo alonso (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda de los angeles Mart\u00edn luengo (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Ana Fatima Civantos Fernandez Gracias a las caracter\u00edsticas de inocuidad, biodegradabilidad y biocompatibilidad el quitosano se ha [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center 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