{"id":116307,"date":"2018-03-11T10:45:18","date_gmt":"2018-03-11T10:45:18","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-de-las-factorias-virales-y-complejos-replicativos-ensamblados-por-virus-arn\/"},"modified":"2018-03-11T10:45:18","modified_gmt":"2018-03-11T10:45:18","slug":"caracterizacion-de-las-factorias-virales-y-complejos-replicativos-ensamblados-por-virus-arn","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/complutense-de-madrid\/caracterizacion-de-las-factorias-virales-y-complejos-replicativos-ensamblados-por-virus-arn\/","title":{"rendered":"Caracterizaci\u00f3n de las factorias virales y complejos replicativos ensamblados por virus arn"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Isabel Mar\u00eda Fernandez De Castro Mart\u00edn <\/strong><\/h2>\n<p>Los virus son pat\u00f3genos intracelulares que necesitan la maquinaria de la c\u00e9lula hu\u00e9sped para propagarse. Muchos virus arn y algunos adn realizan la replicaci\u00f3n y transcripci\u00f3n del genoma en el citoplasma de c\u00e9lulas eucariotas, generando estructuras especializadas denominadas factor\u00edas virales. La finalidad de dichos compartimentos es mejorar la eficacia de la replicaci\u00f3n y proteger al genoma viral frente al sistema inmune de la c\u00e9lula hu\u00e9sped. En el presente trabajo de tesis se estudiaron, con t\u00e9cnicas de microscop\u00eda de fluorescencia y electr\u00f3nica, las factor\u00edas y complejos replicativos (crs) ensamblados por distintos virus arn: tombusvirus , bunyavirus y reovirus.Tombusvirus induce la formaci\u00f3n de un sistema complejo de membranas donde se lleva a cabo la replicaci\u00f3n viral en estructuras limitadas por membranas o esf\u00e9rulas. Las secciones seriadas y reconstrucciones tridimensionales (3d) mostraron que el compartimiento estaba rodeado por mitocondrias y ret\u00edculo endopl\u00e1smico (re). La t\u00e9cnica mettem (metal tagging transmission electron microscopy) permiti\u00f3 visualizar las mol\u00e9culas de replicasa viral en las membranas del compartimento, as\u00ed como su incorporaci\u00f3n y activaci\u00f3n en las esf\u00e9rulas. El estudio de factores celulares implicados en la formaci\u00f3n del complejo de replicaci\u00f3n demostr\u00f3 que la prote\u00edna escrt (endosomal sorting complex required for transport) vps4 es un componente estable del cr activo, necesaria para la formaci\u00f3n y mantenimiento de las esf\u00e9rulas virales. En levaduras donde el gen pah1 ha sido delecionado, el org\u00e1nulo de replicaci\u00f3n se asocia con re formando una plataforma altamente especializada. Con mettem y tomograf\u00eda electr\u00f3nica se mostr\u00f3 que en las regiones del compartimento donde la replicasa est\u00e1 activa, las mol\u00e9culas presentan un alto grado de empaquetamiento.El virus bunyamwera (vbun) ensambla mini-factor\u00edas en c\u00e9lulas vero, formadas por fragmentos del aparato de golgi rodeados de mitocondrias y re. El modelo 3d revel\u00f3 la presencia de contactos entre mitocondrias y re con crs y virus intracelulares. Se demostr\u00f3 que la nucleoprote\u00edna n y la polimerasa l son suficientes para la formaci\u00f3n del cr funcional, reclutamiento de mitocondrias y re constituyendo la factor\u00eda, y para el ensamblaje de pseudo-part\u00edculas virales. Las mol\u00e9culas de polimerasa l se acumulan en membranas intracelulares y se concentran formando agregados densos compatibles con esf\u00e9rulas virales. Durante la infecci\u00f3n por vbun, se reclutan las prote\u00ednas mitocondriales p32 y mfn2, y la miosina-9 a la factor\u00eda viral. La presencia de mfn2 sugiere que esta prote\u00edna podr\u00eda mediar los contactos entre mitocondrias y entre mitocondrias y membranas del re. P32 siempre acompa\u00f1a a los elementos de la factor\u00eda viral, sugiriendo que podr\u00eda actuar como factor importante en replicaci\u00f3n y\/o morfog\u00e9nesis viral. Los resultados con el tratamiento de blebistatina indican un posible papel de la miosina-9 en el transporte de rnps desde los sitios de replicaci\u00f3n a los lugares de ensamblaje.Modelos 3d mostraron que las inclusiones de reovirus est\u00e1n formadas por un entramado de membranas y microt\u00fabulos, rodeado por mitocondrias y ret\u00edculo endopl\u00e1smico rugoso (rer). En el \u00e1rea de salida de virus, cerca de la membrana plasm\u00e1tica, las part\u00edculas virales contactan con membranas del re y microt\u00fabulos. Este hecho apunta a un nuevo mecanismo que podr\u00eda mediar la salida de reovirus sin lisis celular.Por lo tanto, los virus arn estudiados en este proyecto ensamblan los crs en asociaci\u00f3n con membranas y org\u00e1nulos celulares. Mediante mettem y tomograf\u00eda electr\u00f3nica se observ\u00f3 que las mol\u00e9culas de polimerasa viral dentro de los crs activos muestran un alto nivel de empaquetamiento. Adem\u00e1s, se ha demostrado que varias prote\u00ednas celulares tienen un papel en la formaci\u00f3n y mantenimiento del org\u00e1nulo de replicaci\u00f3n. Los datos obtenidos constituyen un primer paso para el estudio de las v\u00edas celulares implicadas en la biog\u00e9nesis de las factor\u00edas virales.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizaci\u00f3n de las factorias virales y complejos replicativos ensamblados por virus arn<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizaci\u00f3n de las factorias virales y complejos replicativos ensamblados por virus arn <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Isabel Mar\u00eda Fernandez De Castro Mart\u00edn <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 15\/09\/2014<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Cristina Risco Ortiz<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: esperanza Gomez-lucia duato <\/li>\n<li>Francisco Sobrino castello (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda teresa Rejas marcos (vocal)<\/li>\n<li>covadonga Alonso marti (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Isabel Mar\u00eda Fernandez De Castro Mart\u00edn Los virus son pat\u00f3genos intracelulares que necesitan la maquinaria de la 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