{"id":116345,"date":"2018-03-11T10:45:24","date_gmt":"2018-03-11T10:45:24","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/phb-despolimerasas-de-streptomyces-exfoliatus-y-streptomyces-ascomycinicus-caracterizacion-de-enzimas-con-potencial-aplicacion-biotecnologica\/"},"modified":"2018-03-11T10:45:24","modified_gmt":"2018-03-11T10:45:24","slug":"phb-despolimerasas-de-streptomyces-exfoliatus-y-streptomyces-ascomycinicus-caracterizacion-de-enzimas-con-potencial-aplicacion-biotecnologica","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/phb-despolimerasas-de-streptomyces-exfoliatus-y-streptomyces-ascomycinicus-caracterizacion-de-enzimas-con-potencial-aplicacion-biotecnologica\/","title":{"rendered":"Phb despolimerasas de streptomyces exfoliatus y streptomyces  ascomycinicus. caracterizaci\u00f3n de enzimas con potencial aplicaci\u00f3n biotecnol\u00f3gica."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Javier Garc\u00eda Hidalgo <\/strong><\/h2>\n<p>Los polihidroxialcanoatos (phas), son una clase de polioxo\u00e9steres lineales hidrof\u00f3bicos,sintetizados y acumulados por una amplia variedad de bacterias y arqueas, para servir de reservorio de carbono y energ\u00eda cuando hay un desequilibrio en las condiciones del medio, porun exceso de fuente de carbono y falta de alg\u00fan nutriente esencial.Los phas poseen propiedades similares a los termopl\u00e1sticos; adem\u00e1s son los \u00fanicos biopl\u00e1sticos producidos enteramente por microorganismos, son totalmente biodegradables y se producen a partir de fuentes renovables. El pha m\u00e1s abundante y mejor conocido es el polihidroxibutirato (phb), que es un pha de cadena corta, en contraste con los phas de cadena media, que tienen cadenas laterales de 3 o m\u00e1s carbonos.Los phas son producidos intracelularmente como gr\u00e1nulos citopl\u00e1smicos con una capa superficial de prote\u00ednas y l\u00edpidos. En estos gr\u00e1nulos o carbonosomas, los phas se encuentran en un estado amorfo y fluido, pero cuando la capa proteica se da\u00f1a, o el pha queda expuesto al medio extracelular, el pol\u00edmero adopta una estructura parcialmente cristalina, llamada pha desnaturalizado o dpha.La degradaci\u00f3n enzim\u00e1tica de phas puede implicar dos procesos diferentes: la degradaci\u00f3n intracelular de pha es el proceso por el cual la c\u00e9lula acumuladora de pha moviliza su reserva para crecer cuando las condiciones ambientales vuelven a ser favorables tras un proceso de desequilibrio. Es realizada por pha despolimerasas intracelulares, enzimas hidrol\u00edticas asociadas a la superficie del gr\u00e1nulo de pha.En cambio, la degradaci\u00f3n extracelular de pha es un proceso por el cual un microorganismo, (no necesariamente productor de pha) secreta pha despolimerasas solubles para hidrolizar dpha, presente en el medio como resultado de la lisis celular de bacterias productoras de pha, usando los productos resultantes como fuente de carbono alternativa en ausencia de sustratosm\u00e1s adecuados.La degradaci\u00f3n de phas es un proceso interesante, no s\u00f3lo con el objetivo de paliar la acumulaci\u00f3n de residuos pl\u00e1sticos en el medio ambiente, sino tambi\u00e9n por la posibilidad de usar los productos de reacci\u00f3n como compuestos quirales de alto valor a\u00f1adido para la s\u00edntesis de pol\u00edmeros con propiedades a medida y de gran variedad de f\u00e1rmacos quirales enantiom\u00e9ricamente puros.Tras examinar la actividad pha despolimerasa extracelular de varias cepas de streptomyces seprocedi\u00f3 a clonar los genes codificantes de las phb despolimerasas de s. Exfoliatus (phazsex) y s. Ascomycinicus (phazsa), respectivamente, para expresarlos en rhodococcus sp. T104. As\u00ed seconsigui\u00f3 producir ambas enzimas en forma activa y extracelular. Estas despolimerasas fueron purificadas mediante cromatograf\u00eda de interacci\u00f3n hidrof\u00f3bica, y posteriormente se sometieron a una exhaustiva caracterizaci\u00f3n funcional, que incluy\u00f3 identificaci\u00f3n de losp\u00e9ptidos se\u00f1al, espectrometr\u00eda de masas, an\u00e1lisis de especificidad de sustrato, identificaci\u00f3n de los productos de reacci\u00f3n y an\u00e1lisis de los efectos de ph, temperatura, fuerza i\u00f3nica y presencia de m\u00faltiples reactivos sobre la actividad y estabilidad de las enzimas. Tambi\u00e9n se realiz\u00f3 un estudio cin\u00e9tico de la degradaci\u00f3n de phb por phazsex y phazsa, y se emplearon para degradar pel\u00edculas de phb y copol\u00edmeros con 3-hidroxivalerato o almid\u00f3n.Asimismo, se analizaron las estructuras secundarias y terciarias de ambas enzimas por dicro\u00edsmo circular, modificaci\u00f3n de amino\u00e1cidos y mutag\u00e9nesis dirigida.Finalmente, se inmovilizaron ambas enzimas mediante diferentes m\u00e9todos con el fin dedesarrollar biocatalizadores para la degradaci\u00f3n de phb, y se emple\u00f3 phazsex liofilizada para catalizar reacciones de s\u00edntesis org\u00e1nica en medios no acuosos.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Phb despolimerasas de streptomyces exfoliatus y streptomyces  ascomycinicus. caracterizaci\u00f3n de enzimas con potencial aplicaci\u00f3n biotecnol\u00f3gica.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Phb despolimerasas de streptomyces exfoliatus y streptomyces  ascomycinicus. caracterizaci\u00f3n de enzimas con potencial aplicaci\u00f3n biotecnol\u00f3gica. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Javier Garc\u00eda Hidalgo <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 21\/09\/2014<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Miguel Arroyo S\u00e1nchez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: carmen Acebal sarabia <\/li>\n<li>marco Terreni (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda  auxiliadora Prieto jimenez (vocal)<\/li>\n<li>Juan  Luis Serra ferrer (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Javier Garc\u00eda Hidalgo Los polihidroxialcanoatos (phas), son una clase de polioxo\u00e9steres lineales 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