{"id":117612,"date":"2018-03-11T10:47:13","date_gmt":"2018-03-11T10:47:13","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudio-de-las-beta-glucosidasas-del-complejo-celulola%c2%adtico-de-talaromyces-amestolkiaecaracterizacion-y-aplicaciones-biotecnologicas\/"},"modified":"2018-03-11T10:47:13","modified_gmt":"2018-03-11T10:47:13","slug":"estudio-de-las-beta-glucosidasas-del-complejo-celulola%c2%adtico-de-talaromyces-amestolkiaecaracterizacion-y-aplicaciones-biotecnologicas","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/complutense-de-madrid\/estudio-de-las-beta-glucosidasas-del-complejo-celulola%c2%adtico-de-talaromyces-amestolkiaecaracterizacion-y-aplicaciones-biotecnologicas\/","title":{"rendered":"Estudio de las beta-glucosidasas del complejo celulol\u00edtico de talaromyces amestolkiae:caracterizaci\u00f3n y aplicaciones biotecnol\u00f3gicas."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Jes\u00fas Gil Mu\u00f1oz <\/strong><\/h2>\n<p>La celulosa es la fuente de energ\u00eda m\u00e1s abundante que hay en la tierra. Su transformaci\u00f3n en glucosa se considera la etapa m\u00e1s importante en la producci\u00f3n de biocombustibles a partir de biomasa lignocelul\u00f3sica. Para esta transformaci\u00f3n es necesaria la acci\u00f3n sin\u00e9rgica de tres tipos de enzimas que hidrolizan los enlaces \u00edY-1,4 de la celulosa: (i) las endoglucanasas, que act\u00faan al azar sobre enlaces internos, (ii) las celobiohidrolasas, que operan progresivamente por los extremos reductores y no reductores de la cadena, y (iii) las \u00edY-glucosidasas (bgl), que hidrolizan celobiosa y los celooligosac\u00e1ridos m\u00e1s peque\u00f1os hasta glucosa.  los hongos filamentosos son la principal fuente de celulasas, siendo los crudos del g\u00e9nero trichoderma los m\u00e1s estudiados y comercializados hist\u00f3ricamente. Sin embargo, estos hongos secretan niveles insuficientes de bgl para una conversi\u00f3n efectiva de la celulosa, por lo que con frecuencia requieren ser suplementados con preparaciones ricas en esta enzima procedentes de otros hongos. Recientemente, se han descrito cepas de penicillium con gran capacidad para secretar altos niveles de bgl al medio extracelular. Adem\u00e1s de su papel en la hidr\u00f3lisis de la celulosa las bgl tambi\u00e9n pueden emplearse para sintetizar compuestos de inter\u00e9s industrial mediante reacciones de transglicosilaci\u00f3n.  en este trabajo se ha estudiado una nueva cepa f\u00fangica productora de celulasas, identificada como talaromyces amestolkiae, en base a un an\u00e1lisis molecular y morfol\u00f3gico. Se han purificado a homogeneidad electrofor\u00e9tica tres bgl (bgl-1, bgl-2 y bgl-3) secretadas por el hongo y se han caracterizado bioqu\u00edmicamente. Bgl-1 y bgl-2 son prote\u00ednas monom\u00e9ricas, mientras que bgl-3 es un d\u00edmero funcional. Los valores de actividad m\u00e1xima de estas enzimas se obtuvieron a ph 4,0 y entre 50-60 \u00c2\u00bac, siendo estables en un rango de ph de 4-7 y a 50 \u00c2\u00bac. Las tres mostraron distinto comportamiento en funci\u00f3n del sustrato (pnpg o celobiosa), ensay\u00e1ndose tambi\u00e9n el efecto de determinados compuestos qu\u00edmicos e inhibidores en su actividad. Las tres pueden hidrolizar celooligosac\u00e1ridos de diferente longitud, disminuyendo la eficacia de hidr\u00f3lisis con el aumento de la polimerizaci\u00f3n, y no son activas frente a polisac\u00e1ridos. Adem\u00e1s, mostraron actividad de transglicosilaci\u00f3n, formando alquilglic\u00f3sidos y celooligosac\u00e1ridos de mayor longitud que los usados como sustratos.  las tres bgl se identificaron mediante huella pept\u00eddica y en base la alta homolog\u00eda con otras bgl f\u00fangicas relacionadas filogen\u00e9ticamente, se dise\u00f1aron cebadores espec\u00edficos que permitieron la secuenciaci\u00f3n de los genes que codifican cada una de ellas. El an\u00e1lisis de las secuencias aminoac\u00eddicas mostr\u00f3 que bgl-1 es miembro de la familia 1 de las glicosil hidrolasas, mientras que bgl-2 y bgl-3 pertenecen a la familia 3. Teniendo en cuenta que existen pocas bgl f\u00fangicas cristalizadas, se construyeron modelos moleculares de estas \u00faltimas en base a las estructuras con las que presentaron mayor identidad.  el crudo enzim\u00e1tico de t. Amestolkiae, rico en bgl, se us\u00f3 de forma individual y como suplemento de otros c\u00f3cteles comerciales en experimentos de sacarificaci\u00f3n a partir de slurry \u00e1cido de paja de trigo. Los resultados obtenidos indican que el hongo secreta, adem\u00e1s de celulasas, otras enzimas complementarias que potencian la liberaci\u00f3n de az\u00facares fermentables.  se analiz\u00f3 el secretoma de t. Amestolkiae usando avicel o slurry \u00e1cido de paja de trigo como fuente de carbono. Las celulasas fueron las enzimas m\u00e1s abundantes en ambas condiciones, sin embargo, en el crudo obtenido a partir de los cultivos en slurry aument\u00f3 la proporci\u00f3n de bgl y otras enzimas distintas a las celulasas, indicando que para la degradaci\u00f3n de un sustrato complejo es necesaria mayor diversidad enzim\u00e1tica. Los resultados obtenidos en este trabajo abren nuevas v\u00edas para la formulaci\u00f3n de c\u00f3cteles enzim\u00e1ticos eficaces en el contexto de la degradaci\u00f3n de la biomasa lignocelul\u00f3sica.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estudio de las beta-glucosidasas del complejo celulol\u00edtico de talaromyces amestolkiae:caracterizaci\u00f3n y aplicaciones biotecnol\u00f3gicas.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estudio de las beta-glucosidasas del complejo celulol\u00edtico de talaromyces amestolkiae:caracterizaci\u00f3n y aplicaciones biotecnol\u00f3gicas. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Jes\u00fas Gil Mu\u00f1oz <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 14\/06\/2015<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda  Jes\u00fas Martinez Hernandez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: carmen Acebal sarabia <\/li>\n<li>Francisco Guill\u00e9n carretero (vocal)<\/li>\n<li>david Ibarra trejo (vocal)<\/li>\n<li>thelmo Lu chao (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Jes\u00fas Gil Mu\u00f1oz La celulosa es la fuente de energ\u00eda m\u00e1s abundante que hay en la tierra. 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