{"id":12037,"date":"2001-06-07T00:00:00","date_gmt":"2001-06-07T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/puesta-a-punto-de-tecnicas-de-pcr-en-heces-y-de-elisa-para-el-diagnostico-de-la-paratuberculosis-estudio-de-prevalencia-en-ganado-bovino\/"},"modified":"2001-06-07T00:00:00","modified_gmt":"2001-06-07T00:00:00","slug":"puesta-a-punto-de-tecnicas-de-pcr-en-heces-y-de-elisa-para-el-diagnostico-de-la-paratuberculosis-estudio-de-prevalencia-en-ganado-bovino","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-agrarias\/puesta-a-punto-de-tecnicas-de-pcr-en-heces-y-de-elisa-para-el-diagnostico-de-la-paratuberculosis-estudio-de-prevalencia-en-ganado-bovino\/","title":{"rendered":"Puesta a punto de t\u00e9cnicas de pcr en heces y de elisa para el diagn\u00f3stico de la paratuberculosis. estudio de preValencia en ganado bovino"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Joseba Mirena Garrido Urkullu <\/strong><\/h2>\n<p>Los dos objetivos que inicialmente se plantearon en este trabajo de tesis fueron la mejora de las t\u00e9cnicas de diagn\u00f3stico de la paratuberculosis en ovino y bovino y su aplicaci\u00f3n en un estudio de preValencia en matadero en ganado bovino. Para ello el grueso del trabajo fue dividido en tres apartados. El primero trat\u00f3 de mejorar el rendimiento de elisa y de la pcr. Para la mejora de la primera t\u00e9cnica se parti\u00f3 de tres sueros-control positivos de diferente intensidad y uno negativo en la especie ovina, y de uno positivo y otro negativo en la especie bovina. Al mismo tiempo se utilizaron diferentes conjugados marcados con peroxidasa o fosfatasa alcalina forma directa o mediante enlaces intermedios. El objetivo fue encontrar la m\u00e1xima diferencia entre la respuesta de los sueros control positivo y los de los negativos, lo que se denomin\u00f3 relaci\u00f3n respuesta\/ruido, de forma que las reacciones inespec\u00edficas fuesen m\u00ednimas. Para ello se enfrentaron diluciones seriadas de los sueros control con diluciones de los diferentes conjugados, con lo que se determin\u00f3 que la mejor relaci\u00f3n respuesta\/ruido en ganado ovino se obten\u00eda con la diluci\u00f3n de suero 1\/600 y el conjugado prote\u00edna g peroxidasa a una concentraci\u00f3n de 0,025 ug\/ml. El ganado vacuno la mayor diferencia entre el positivo y el negativo se obtuvo con la diluci\u00f3n de suero 1\/200 y la prote\u00edna g peroxidasa a una concentraci\u00f3n de 0,05 ug\/ml.  la mejora del rendimiento de la pcr en heces se abord\u00f3 mediante la comparaci\u00f3n de variantes en el m\u00e9todo de concentraci\u00f3n de las micobacterias y en la extracci\u00f3n del dna. Para ello se probaron dos productos dispersantes, el dodecil sulfato s\u00f3dico (sds) y el cloruro de hexadecill piridinio (chp), a concentraciones entre 1,25% y 20%. Posteriormente, el producto de esta concentraci\u00f3n se trat\u00f3 mediante ocho protocolos experimentales para la lisis de la pared micobacteriana de tipo qu\u00edmico, enzim\u00e1tico, f\u00edsico o en combinaciones. Como<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Puesta a punto de t\u00e9cnicas de pcr en heces y de elisa para el diagn\u00f3stico de la paratuberculosis. estudio de preValencia en ganado bovino<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Puesta a punto de t\u00e9cnicas de pcr en heces y de elisa para el diagn\u00f3stico de la paratuberculosis. estudio de preValencia en ganado bovino <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Joseba Mirena Garrido Urkullu <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Zaragoza<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 06\/07\/2001<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li> Juste Jordan Ramon Antonio<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Juan  jose Badiola diez <\/li>\n<li>valentin Perez perez (vocal)<\/li>\n<li> Garrido jimenez M\u00aa rosario de f\u00e1tima (vocal)<\/li>\n<li> Vidal i roig dolors (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Joseba Mirena Garrido Urkullu Los dos objetivos que inicialmente se plantearon en este trabajo de tesis fueron 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