{"id":56268,"date":"2018-03-09T22:43:59","date_gmt":"2018-03-09T22:43:59","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/diseno-de-nuevos-materiales-de-afinidad-universal-aplicacion-en-sensores\/"},"modified":"2018-03-09T22:43:59","modified_gmt":"2018-03-09T22:43:59","slug":"diseno-de-nuevos-materiales-de-afinidad-universal-aplicacion-en-sensores","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica-molecular\/diseno-de-nuevos-materiales-de-afinidad-universal-aplicacion-en-sensores\/","title":{"rendered":"Dise\u00f1o de nuevos materiales de afinidad universal. aplicaci\u00f3n en sensores"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Emanuela Zacco Aprile <\/strong><\/h2>\n<p>La creciente demanda de metodolog\u00edas anal\u00edticas simples, selectivas y de bajo coste para el an\u00e1lisis cuantitativo o semicuantitativo de analitos de variada naturaleza en muestras complejas ha favorecido el desarrollo de alternativas anal\u00edticas a los m\u00e9todos cl\u00e1sicos de an\u00e1lisis. En este contexto, en la presente tesis se ha planteado como objetivo la construcci\u00f3n de biosensores robustos y econ\u00f3micos y cuya utilizaci\u00f3n no requiera supervisi\u00f3n profesional, para la detecci\u00f3n descentralizada y fiable de compuestos de inter\u00e9s en la seguridad alimentaria y en el control medioambiental. debido a la experiencia de nuestro grupo de trabajo y a las demostradas ventajas del material grafito-epoxi (gec) como transductor electroqu\u00edmico, se dirigieron los esfuerzos hacia la construcci\u00f3n de nuevos tranductores basados en comp\u00f3sitos r\u00edgidos grafito-epoxi. As\u00ed, se abordaron dos l\u00edneas distintas de investigaci\u00f3n: la primera, dirigida hacia la construcci\u00f3n de transductores biocomp\u00f3sitos grafito-epoxi (geb) modificados en vol\u00famen con biomol\u00e9culas de afinidad universal, para la inmovilizaci\u00f3n de enzimas, anticuerpos, u oligonucle\u00f3tidos y, la segunda, en el desarrollo de nuevos protocolos para la detecci\u00f3n electroqu\u00edmica de biomol\u00e9culas inmovilizadas en part\u00edculas magn\u00e9ticas, mediante el dise\u00f1o de un sensor con propiedades magn\u00e9ticas, m-gec. abordando el primer eje de esta tesis, se estudiaron diferentes mol\u00e9culas de afinidad universal para la preparaci\u00f3n de biocomp\u00f3sitos, tales como la prote\u00edna a y la prote\u00edna h (para lainmovilizaci\u00f3n de anticuerpos de diferentes especificidades a trav\u00e9s del fc) y la estrept(avidina), para la inmovilizaci\u00f3n de pr\u00e1cticamente cualquier analito biotinilado, sea este enzimas, oligonucle\u00f3tidos o anticuerpos. As\u00ed, se construyeron exitosamente biocomp\u00f3sitos de avidina (av-geb) capaces de inmovilizar con una excelente orientaci\u00f3n, oligonucle\u00f3tidos, enzimas y anticuerpos. Del mismo modo se dise\u00f1aron y construyeron plataformas universales para la inmovilizaci\u00f3n de anticuerpos basados en biocomp\u00f3sitos grafito-epoxi de prote\u00edna a (prota-geb). Usando esta plataforma se consiguieron inmovilizar anticuerpos de las m\u00e1s variada naturaleza a trav\u00e9s de su fracci\u00f3n constante para la detecci\u00f3n de diferentes analitos como, por ejemplo, atrazina de zumo de naranja o en aguas embotelladas, elcanzando l\u00edmites de detecci\u00f3n por debajo del l\u00edmite de 0.1 g l-1 fijado por la legislaci\u00f3n europea. Adem\u00e1s de estas plataformas eletroqu\u00edmicas de afinidad universal, se construyeron con \u00e9xito inmunocomp\u00f3sitos grafito-epoxi de afinidad espec\u00edfica (ab-geb), en concreto inmunocomp\u00f3sitos anti-atrazina para la determinaci\u00f3n de este analito en muestras reales con una alta sensibilidad. resultados muy prometedores se han obtenido tambi\u00e9n con el segundo eje de la presente tesis, mediante ensayos llevados a cabo con un nuevo sensor magn\u00e9tico basado en comp\u00f3sito grafito-epoxi (m-geb) y esferas magn\u00e9ticas modificadas con bioespecies. Las part\u00edculas magn\u00e9ticas representan una nueva estrategia para bioan\u00e1lisis que aportan numerosas ventajas adicionales. Despu\u00e9s de un estudio exhaustivo de la inmovilizaci\u00f3n de biomol\u00e9culas sobre diferentes tipolog\u00edas de esferas magn\u00e9ticas funcionalizadas por diferentes grupos qu\u00edmicos (tosil y carboxilo) o mol\u00e9culas biol\u00f3gicas (prote\u00edna a), se consigui\u00f3 inmovilizar con \u00e9xito anticuerpos para la determinaci\u00f3n de una familia de antibi\u00f3ticos (sulfonamidas) en muestras alimentarias y de anticuerpos para la determinaci\u00f3n de atrazina en muestras alimentarias y medioambientales. Con esta estrategia se consigui\u00f3 detectar atrazina en muestras tales como agua de consumo y zumo de naranja, y sulfonamidas en leche fresca o uht entera, desnatada y semidesnatada. En este \u00faltimo caso, se ha conseguido rebajar en un factor de 100 los l\u00edmites de detecci\u00f3n fijados por la legislaci\u00f3n europea. Por \u00faltimo, y para concluir, con el objetivo final de desarrollar en un futuro un sistema de detecci\u00f3n de dna de e. Coli pat\u00f3genas basado m-gec y detecci\u00f3n electroqu\u00edmica, para la aplicaci\u00f3n en seguridad alimentaria en cuanto a bacterias pat\u00f3genas, se ha desarrollado un sistema de primers espec\u00edficos basados en experimentos de rt-pcr.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Dise\u00f1o de nuevos materiales de afinidad universal. aplicaci\u00f3n en sensores<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Dise\u00f1o de nuevos materiales de afinidad universal. aplicaci\u00f3n en sensores <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Emanuela Zacco Aprile <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 18\/12\/2006<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Salvador Alegret Sanroma<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 manuel Pingarr\u00f3n carraz\u00f3n <\/li>\n<li>saverio Mannino (vocal)<\/li>\n<li>agustin Costa garcia (vocal)<\/li>\n<li>jordi Barb\u00e9 Garc\u00eda (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Emanuela Zacco Aprile La creciente demanda de metodolog\u00edas anal\u00edticas simples, selectivas y de bajo coste para el 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