{"id":57958,"date":"2018-03-09T22:45:46","date_gmt":"2018-03-09T22:45:46","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudios-de-seguridad-en-la-utilizacion-de-celulas-madre-limbocorneales-autologas-cultivadas-in-vitro-en-el-tratamiento-de-la-insuficiencia-limbica\/"},"modified":"2018-03-09T22:45:46","modified_gmt":"2018-03-09T22:45:46","slug":"estudios-de-seguridad-en-la-utilizacion-de-celulas-madre-limbocorneales-autologas-cultivadas-in-vitro-en-el-tratamiento-de-la-insuficiencia-limbica","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/oftalmologia\/estudios-de-seguridad-en-la-utilizacion-de-celulas-madre-limbocorneales-autologas-cultivadas-in-vitro-en-el-tratamiento-de-la-insuficiencia-limbica\/","title":{"rendered":"Estudios de seguridad en la utilizacion de celulas madre limbocorneales autologas cultivadas in vitro en el tratamiento de la insuficiencia limbica"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Ana Mar\u00eda Fernandez  Hortelano <\/strong><\/h2>\n<p>#titulo: estudio de seguridad en la utilizaci\u00f3n de c\u00e9lulas madre limbocorneales autologas cultivadas in vitro en el tratamiento de la insuficiencia limbica #resumen: nuestro trabajo se ha basado en dos partes: un estudio de experimentaci\u00f3n animal, llevado a cabo con conejos de raza new zealand, y un estudio de cultivo celular, basado en el cultivo de anillos limbocorneales. L. Cultivo celular puesto que la finalidad \u00faltima del proyecto es desarrollar una estrategia terap\u00e9utica con c\u00e9lulas madre que permita tratar enfermos con insuficiencia l\u00edmbica, es fundamental desarrollar y optimizar la t\u00e9cnica de cultivo, expansi\u00f3n y caracterizaci\u00f3n de c\u00e9lulas madre obtenidos del epitelio limbocorneal humano. El cultivo celular lo hemos llevado a cabo con diez anillos limbocorneales de donante humano y seis anillos limbocorneales de conejo. Hemos comparado tres m\u00e9todos de cultivo diferentes: sobre membrana amni\u00f3tica, sobre placa y un cultivo combinado (una primera parte de cultivo sobre placa y una segunda parte de cultivo sobre membrana amni\u00f3tica). La comparaci\u00f3n de los tres m\u00e9todos de cultivo la hemos hecho bas\u00e1ndonos en el an\u00e1lisis de marcadores inmunohistoquimicos.   Los marcadores analizados han sido las cito queratinas 3\/12 y 14, la prote\u00edna nuclear p63 y la conexina 43.  2. Experimentaci\u00f3n animal cuando ocurre una insuficiencia l\u00edmbica (por da\u00f1o parcial o completo de las c\u00e9lulas madre limbocorneales) el epitelio conjuntival invade la superficie corneal produciendo una conjuntivalizaci\u00f3n de la superficie corneal con neovascularizaci\u00f3n fibrosis, irregularidades corneales, etc. Con la consiguiente p\u00e9rdida de visi\u00f3n. En las situaciones de insuficiencia l\u00edmbica completa el trasplante corneal no es suficiente como tratamiento, es necesario conseguir una regeneraci\u00f3n previa del epitelio corneal. Diversos estudios han demostrado que es posible cultivar c\u00e9lulas madre limbocorneales in vitro (tanto a partir de animales como humanos) y que estos cultivos generan mediante duplicaciones sim\u00e9tricas nuevas c\u00e9lulas madre y mediante diferenciaci\u00f3n asim\u00e9trica tanto tac como epitelio corneal diferenciado. Bas\u00e1ndose en estos estudios, se han desarrollado t\u00e9cnicas de tratamiento de la insuficiencia limbica mediante el trasplante de c\u00e9lulas madre. El trasplante de c\u00e9lulas limbocorneales aut\u00f3logas se utiliza en situaciones de insuficiencia unilateral, obteniendo el fragmento limbocorneal del ojo sano contralateral. La posibilidad de cultivar c\u00e9lulas madre limbocorneales in vitro permite cultivar y expandir c\u00e9lulas a partir de una m\u00ednima biopsia limbocorneal, lo que reduce el riesgo del ojo donante. Lnicialmente hemos analizado dos modelos de causticaci\u00f3n corneal con el objetivo de inducir una insuficiencia l\u00edmbica completa. Hemos estudiado dos grupos de 10 animales a cada uno de los cuales hemos aplicado dos modelos de causticaci\u00f3n corneal diferentes. Se han seguido durante dos meses hasta el sacrificio, procediendo al an\u00e1lisis histol\u00f3gico de los ojos enucleados. El segundo grupo de animales est\u00e1 formado por tres grupos de diez conejos. Les hemos aplicado a todos los animales en modelo de causticaci\u00f3n corneal en uno de los ojos con el objetivo de inducir una insuficiencia l\u00edmbica completa. Diez animales no han recibido tratamiento y han servido como grupo control. Diez animales, dos semanas tras aplicar el modelo de causticaci\u00f3n corneal, se han tratado con trasplante de membrana amni\u00f3tica. Los diez animales restantes, dos semanas tras el modelo de causticaci\u00f3n corneal, se han tratado con trasplante de limbo. Es seguimiento ha sido de dos meses.  El tercer grupo de estudio est\u00e1 constituido por treinta animales divididos en dos grupos de quince a los cuales se les ha aplicado unilateralmente el modelo de causticaci\u00f3n corneal. Quince animales no se han tratado, sirviendo como grupo control. Los otros quince animales, dos meses despu\u00e9s del modelo de causticaci\u00f3n, se han tratado con cultivo de c\u00e9lulas limbocorneales sobre membrana amni\u00f3tica, obtenidas a partir de un fragmento limbocorneal obtenido del ojo contralateral sano. Este grupo se ha seguido durante seis meses hasta el sacrif<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estudios de seguridad en la utilizacion de celulas madre limbocorneales autologas cultivadas in vitro en el tratamiento de la insuficiencia limbica<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estudios de seguridad en la utilizacion de celulas madre limbocorneales autologas cultivadas in vitro en el tratamiento de la insuficiencia limbica <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Ana Mar\u00eda Fernandez  Hortelano <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Navarra<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 13\/04\/2007<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Javier Moreno Monta\u00f1\u00e9s<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Juan  Antonio Duran de la colina <\/li>\n<li>Javier Mendicute del barrio (vocal)<\/li>\n<li>Jos\u00e9 Manuel Ben\u00edtez del castillo (vocal)<\/li>\n<li>Miguel Jos\u00e9 Maldonado l\u00f3pez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Ana Mar\u00eda Fernandez Hortelano #titulo: estudio de seguridad en la utilizaci\u00f3n de c\u00e9lulas madre limbocorneales autologas cultivadas 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