{"id":58927,"date":"2007-11-06T00:00:00","date_gmt":"2007-11-06T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/inhibicion-de-la-protea%c2%adna-quinasa-c-beta-mediante-rna-antisentido-y-estudio-de-su-funcion-en-la-activacion-de-celulas-jurkat\/"},"modified":"2007-11-06T00:00:00","modified_gmt":"2007-11-06T00:00:00","slug":"inhibicion-de-la-protea%c2%adna-quinasa-c-beta-mediante-rna-antisentido-y-estudio-de-su-funcion-en-la-activacion-de-celulas-jurkat","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-de-la-vida\/inhibicion-de-la-protea%c2%adna-quinasa-c-beta-mediante-rna-antisentido-y-estudio-de-su-funcion-en-la-activacion-de-celulas-jurkat\/","title":{"rendered":"Inhibici\u00f3n de la prote\u00edna quinasa c-beta mediante rna antisentido y estudio de su funci\u00f3n en la activaci\u00f3n de c\u00e9lulas jurkat"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong>  Cervi\u00f1o G\u00f3mez M\u00aa Del Carmen <\/strong><\/h2>\n<p>La prote\u00edna quinasa c (pkc) es una familia de serina-treonina quinasas que participa, entre otros procesos, en la transducci\u00f3n de se\u00f1ales de activaci\u00f3n en los linfocitos t. Esta familia consta de, al menos, diez isoformas, con expresi\u00f3n variable seg\u00fan el tipo celular. Con el objetivo de analizar la funci\u00f3n espec\u00edfica de la pkc beta en el proceso de activaci\u00f3n de linfocitos t, se inhibi\u00f3 su expresi\u00f3n mediante la tecnolog\u00eda antisentido, utilizando como modelo de estudio las c\u00e9lulas jurkat (una l\u00ednea leuc\u00e9mica de c\u00e9lulas t humanas). Utilizando esta t\u00e9cnica, consistente en la introducci\u00f3n en la c\u00e9lula de una secuencia de rna complementaria a la del rna mensajero que codifica la prote\u00edna objeto de estudio, inhibimos la expresi\u00f3n de esta enzima. Para obtener una inhibici\u00f3n permanente, se introdujo en las c\u00e9lulas jurkat, mediante electroporaci\u00f3n, un vector episomal (el pl\u00e1smido prep3), con un inserto correspondiente a un fragmento del gen que codifica la pkc beta en orientaci\u00f3n antisentido. De forma paralela, en las c\u00e9lulas jurkat se introdujo el vector prep3 sin inserto, con el objetivo de obtener poblaciones que pudieran utilizarse como control. Con la finalidad de obtener poblaciones homog\u00e9neas en cuanto a su expresi\u00f3n de esta isoforma de pkc, las c\u00e9lulas se clonaron mediante diluci\u00f3n l\u00edmite, seleccion\u00e1ndose a continuaci\u00f3n aqu\u00e9llas con menor expresi\u00f3n de pkc beta con respecto a los controles analizados. En estas c\u00e9lulas pudo demostrarse una inhibici\u00f3n selectiva de pkc beta entre el 40% y el 60% y la disminuci\u00f3n en los niveles  del rna mensajero que la codifica. la reducci\u00f3n en la expresi\u00f3n de pkc beta se relacion\u00f3 en las c\u00e9lulas jurkat con una alteraci\u00f3n en la formaci\u00f3n de agregados, m\u00e1s numerosos y formados por un mayor n\u00famero de c\u00e9lulas con respecto a los controles, sin que se observaran diferencias con respecto a la viabilidad o proliferaci\u00f3n celular en ausencia de est\u00edmulo. tras el est\u00edmulo de las c\u00e9lulas con un<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Inhibici\u00f3n de la prote\u00edna quinasa c-beta mediante rna antisentido y estudio de su funci\u00f3n en la activaci\u00f3n de c\u00e9lulas jurkat<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Inhibici\u00f3n de la prote\u00edna quinasa c-beta mediante rna antisentido y estudio de su funci\u00f3n en la activaci\u00f3n de c\u00e9lulas jurkat <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0  Cervi\u00f1o G\u00f3mez M\u00aa Del Carmen <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Santiago de compostela<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 11\/06\/2007<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Primitivo Barja Francisco<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: manuel Freire rama <\/li>\n<li>m isabel Rodriguez moldes rey (vocal)<\/li>\n<li>Javier Briones meijide (vocal)<\/li>\n<li>josefa predestinaci\u00f3n Garc\u00eda ruiz (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Cervi\u00f1o G\u00f3mez M\u00aa Del Carmen La prote\u00edna quinasa c (pkc) es una familia de serina-treonina quinasas que 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