{"id":60508,"date":"2018-03-09T22:48:22","date_gmt":"2018-03-09T22:48:22","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/clonacion-y-evolucion-dirigida-de-enzimas-implicadas-en-la-modificacion-de-la-cefalosporina-y-sus-derivados\/"},"modified":"2018-03-09T22:48:22","modified_gmt":"2018-03-09T22:48:22","slug":"clonacion-y-evolucion-dirigida-de-enzimas-implicadas-en-la-modificacion-de-la-cefalosporina-y-sus-derivados","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica-molecular\/clonacion-y-evolucion-dirigida-de-enzimas-implicadas-en-la-modificacion-de-la-cefalosporina-y-sus-derivados\/","title":{"rendered":"Clonaci\u00f3n y evoluci\u00f3n dirigida de enzimas implicadas en la modificaci\u00f3n de la cefalosporina y sus derivados"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Irene Mart\u00ednez Mart\u00ednez <\/strong><\/h2>\n<p>Para llevar a cabo la desacetilaci\u00f3n de la cefalosporina y sus derivados, la primera ramnogalacturonan acetil esterasa  (yest) bacteriana, procedente de bacillus subtilis, fue clonada y caracterizada. Yest fue capaz de actuar sobre sustratos cefalospor\u00e1nicos y sobre el xilano, presentando un efecto sin\u00e9rgico cuando actuaba en combinaci\u00f3n con  -xilanasa. El alineamiento de su secuencia primaria con otras prote\u00ednas revel\u00f3 que yest es un nuevo miembro de la familia de las sgnh hidrolasas. Presenta un plegamiento     s\u00e1ndwich. El diagrama topol\u00f3gico de yest puso de manifiesto la divergencia de todos los miembros de la familia sgnh hidrolasa desde un ancestro com\u00fan. Esta divergencia parece haber ocurrido en dos l\u00edneas topol\u00f3gicas diferentes, en una de las cuales sus miembros presentan hojas   adicionales a la hoja central. adem\u00e1s, una acetil xilan esterasa procedente de bacillus pumilus fue clonada y caracterizada sobre sustratos cefalospor\u00e1nicos. Por otro lado, se desarroll\u00f3 un m\u00e9todo colorim\u00e9trico, basado en un indicador de ph, para evaluar las actividades acetil xilan esterasa y cefalosporin deacetilasa utilizando como sustratos 7-aca, cpc y xilano. El m\u00e9todo ha sido validado para su aplicaci\u00f3n en high-troughput screening, permitiendo evaluar librer\u00edas procedentes de experimentos de evoluci\u00f3n dirigida o metagen\u00f3mica. para modificar la posici\u00f3n 7 de la cefalosporina, una glicina oxidasa procedente de bacillus subtilis (goxb) fue clonada y caracterizada. Goxb no fue capaz de actuar sobre la cefalosporina, por ello se generaron los mutante m261y y m261h, poniendo de manifiesto la implicaci\u00f3n de este residuo en la modulaci\u00f3n de la especificidad de sustrato. Ambos mutantes presentaron una disminuci\u00f3n en el valor de la km sobre todos los sustratos analizados, pero no fueron activos sobre la cefalosporina. El mutante m261y presentaba un valor de km sobre el sustrato n-etil-glicina tan bajo que aventura una funci\u00f3n similar a la descrita para la enz<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Clonaci\u00f3n y evoluci\u00f3n dirigida de enzimas implicadas en la modificaci\u00f3n de la cefalosporina y sus derivados<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Clonaci\u00f3n y evoluci\u00f3n dirigida de enzimas implicadas en la modificaci\u00f3n de la cefalosporina y sus derivados <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Irene Mart\u00ednez Mart\u00ednez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Murcia<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 20\/09\/2007<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Alvaro Sanchez Ferrer<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: mercedes Jim\u00e9nez ati\u00e9nzar <\/li>\n<li>n. Golyshin peter (vocal)<\/li>\n<li>Juan a mercedes Cabanes cos (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda  de la estrella Nu\u00f1ez delicado (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Irene Mart\u00ednez Mart\u00ednez Para llevar a cabo la desacetilaci\u00f3n de la cefalosporina y sus derivados, la primera [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[36606,115,955,8235],"tags":[55479,133619,93828,93780,91302,133620],"class_list":["post-60508","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-biologia-molecular-de-microorganismos","category-bioquimica-molecular","category-enzimologia","category-murcia","tag-alvaro-sanchez-ferrer","tag-irene-Martinez-Martinez","tag-juan-a-mercedes-cabanes-cos","tag-maria-de-la-estrella-nunez-delicado","tag-mercedes-jimenez-atienzar","tag-n-golyshin-peter"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/60508","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=60508"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/60508\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=60508"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=60508"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=60508"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}