{"id":61976,"date":"2018-03-09T22:49:51","date_gmt":"2018-03-09T22:49:51","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/replicacion-cromosomica-en-presencia-de-una-nucleosido-difosfato-reductasa-codificada-por-el-alelo-nrda101-de-escherichia-coli\/"},"modified":"2018-03-09T22:49:51","modified_gmt":"2018-03-09T22:49:51","slug":"replicacion-cromosomica-en-presencia-de-una-nucleosido-difosfato-reductasa-codificada-por-el-alelo-nrda101-de-escherichia-coli","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/extremadura\/replicacion-cromosomica-en-presencia-de-una-nucleosido-difosfato-reductasa-codificada-por-el-alelo-nrda101-de-escherichia-coli\/","title":{"rendered":"Replicaci\u00f3n cromos\u00f3mica en presencia de una nucle\u00f3sido-difosfato reductasa codificada por el alelo nrda101 de escherichia coli"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Israel Salguero Corbacho <\/strong><\/h2>\n<p>Resumen:  en escherichia coli, la reducci\u00f3n de los ribonucle\u00f3tidos utilizados en la s\u00edntesis de dna a sus desoxiribonucle\u00f3tidos (dntps) correspondientes se lleva a cabo por la ribonucle\u00f3tido difosfato reductasa (ndpreductasa) que es esencial para la replicaci\u00f3n del cromosoma. La mutaci\u00f3n nrda101 da lugar a una ndp reductasa termosensible. La incubaci\u00f3n a 42\u00c2\u00bac de extractos crudos o preparaciones puras de la enzima mutante destruye su actividad en dos minutos; sin embargo, al incubar a 42\u00c2\u00bac una bacteria mutante termosensible nrda101, no se detiene la replicaci\u00f3n hasta transcurridos 40-50 minutos despu\u00e9s del cambio de temperatura. Adem\u00e1s, sorprendentemente, si el cambio de temperatura se lleva a cabo en presencia de rifampicina, la replicaci\u00f3n contin\u00faa durante 150 minutos hasta producir cromosomas completos. Esto sugiere que la ndp reductasa mutada podr\u00eda estar protegida de la inactivaci\u00f3n t\u00e9rmica por alguna hiperestructura, ya que el fenotipo de esta estirpe no es el caracter\u00edstico de un mutante de elongaci\u00f3n. en este trabajo se ha analizado la implicaci\u00f3n de las enzimas de recombinaci\u00f3n en la replicaci\u00f3n de este mutante a temperatura restrictiva en presencia de rifampicina, observ\u00e1ndose que en estas condiciones la replicaci\u00f3n cromos\u00f3mica es totalmente dependiente de reca y, en concreto, de su actividad estabilizadora de las horquillas de replicaci\u00f3n paradas. Esto indica que la mutaci\u00f3n nrda101 induce cambios en las horquillas de replicaci\u00f3n que las hacen mas susceptibles a ser degradadas en ausencia de la protecci\u00f3n de reca. por otra parte, en este estudio se han encontrado y caracterizado dos condiciones que posibilitan un aumento de la termorresistencia de la replicaci\u00f3n en una estirpe nrda101: la inhibici\u00f3n de la s\u00edntesis de prote\u00ednas y la sobrexpresi\u00f3n de los genes nrdab. Se determin\u00f3 que la prote\u00edna codificada por nrda101 es degradada a 42\u00c2\u00bac de manera dependiente de la s\u00edntesis de prote\u00ednas y se observ\u00f3 que esta degradaci\u00f3n es compensada por la sobrexpresi\u00f3n de nrdab. Estos resultados indican que la ndp reductasa es degradada a 42\u00c2\u00bac en un mutante nrda101 por una proteasa sintetizada tras el cambio de temperatura y que la condici\u00f3n que permite un aumento de la replicaci\u00f3n a temperatura restrictiva es el mantenimiento de los niveles de ndp reductasa. El hecho de que esta enzima permanezca activa a 42\u00c2\u00bac durante mucho m\u00e1s tiempo del que se cre\u00eda, a\u00fan siendo termol\u00e1bil, y que su inactivaci\u00f3n est\u00e9 causada principalmente por su degradaci\u00f3n, implica que debe estar protegida de su alteraci\u00f3n t\u00e9rmica por alguna estructura. en este trabajo por tanto, se aportan pruebas que apoyan la hip\u00f3tesis de que la ndp reductasa estar\u00eda incluida en la hiperestructura de replicaci\u00f3n, lo que evitar\u00eda su inactivaci\u00f3n a 42\u00c2\u00bac en el caso del mutante nrda101, reflejando una conexi\u00f3n f\u00edsica entre el complejo de bios\u00edntesis de nucle\u00f3tidos y el de replicaci\u00f3n.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Replicaci\u00f3n cromos\u00f3mica en presencia de una nucle\u00f3sido-difosfato reductasa codificada por el alelo nrda101 de escherichia coli<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Replicaci\u00f3n cromos\u00f3mica en presencia de una nucle\u00f3sido-difosfato reductasa codificada por el alelo nrda101 de escherichia coli <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Israel Salguero Corbacho <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Extremadura<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 14\/12\/2007<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda Elena Guzm\u00e1n Caba\u00f1as<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 emilio Rebollo feria <\/li>\n<li>Jaime tom\u00e1s Correa bordes (vocal)<\/li>\n<li>enrique Viguera m\u00ednguez (vocal)<\/li>\n<li>Fernando Henao d\u00e1vila (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Israel Salguero Corbacho Resumen: en escherichia coli, la reducci\u00f3n de los ribonucle\u00f3tidos utilizados en la s\u00edntesis de 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