{"id":62120,"date":"2018-03-09T22:49:59","date_gmt":"2018-03-09T22:49:59","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/ta%c2%adtulo-de-la-tesis-caracterizacion-de-nuevas-xilanasas-bacterianas-ingenieria-de-enzimas-con-la-xilanasa-b-de-paenibacillus-barcinonensis\/"},"modified":"2018-03-09T22:49:59","modified_gmt":"2018-03-09T22:49:59","slug":"ta%c2%adtulo-de-la-tesis-caracterizacion-de-nuevas-xilanasas-bacterianas-ingenieria-de-enzimas-con-la-xilanasa-b-de-paenibacillus-barcinonensis","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/microbiologia\/ta%c2%adtulo-de-la-tesis-caracterizacion-de-nuevas-xilanasas-bacterianas-ingenieria-de-enzimas-con-la-xilanasa-b-de-paenibacillus-barcinonensis\/","title":{"rendered":"T\u00edtulo de la tesis: caracterizaci\u00f3n de nuevas xilanasas bacterianas. ingenier\u00eda de enzimas con la xilanasa b de paenibacillus barcinonensis"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Oscar Gallardo Roman <\/strong><\/h2>\n<p>A partir de la cepa xilanol\u00edtica bacillus sp. Bp-7, previamente aislada y caracterizada en el grupo de investigaci\u00f3n, se han clonado e identificado 3 enzimas degradadoras de xilano: xyna, ynff y xynd. La xilanasa xyna presenta m\u00e1xima actividad sobre xilano de madera de haya y es hom\u00f3loga a las xilanasas del subgrupo de pl alcalino y bajo peso molecular de la familia 11. Los resultados del an\u00e1lisis de uso de cod\u00f3n en xyna sugieren que la enzima, altamente conservada en especies del g\u00e9nero bacillus, posiblemente ha sido adquirida por transferencia horizontal de genes entre especies relacionadas de dicho g\u00e9nero. Adicionalmente, se ha conseguido dise\u00f1ar un sistema basado en la prote\u00edna pir4 de saccharomyces cerevisiae para la expresi\u00f3n y direccionamiento de la xilanasa xyna a la pared celular de levaduras o al medio de extracelular, como primer paso hacia su posible utilizaci\u00f3n biotecnol\u00f3gica en la industria alimentaria. la xilanasa ynff de bacillus sp. Bp-7 es una de las pocas xilanasas descritas hasta el momento en la familia 5 de glicosil hidrolasas. Ynff presenta actividad sobre xilanos con ramificaciones de \u00e1cido metil glucur\u00f3nico pero es inactiva sobre xilanos con ramificaciones de arabinosa. La enzima xynd, por su parte, presenta alta homolog\u00eda con enzimas con actividad xilanasa y arabinofuranosidasa que se encuentran clasificadas en la familia 43 de glicosil hidrolasas. los estudios de aplicaci\u00f3n en el blanqueo de pastas de papel de las xilanasas ynff y xyna demuestran que estas permiten obtener mejoras notables en la blancura del papel. la enzima xynb de paenibacillus barcinonensis es una xilanasa de la familia 10 con elevada actividad sobre xilanos y sobre aril-xil\u00f3sidos. Dicha enzima se ha clonado y expresado en cepas de bacillus subtilis. La m\u00e1xima producci\u00f3n se ha obtenido con la cepa recombinante b. Subtilis mw15\/prbspo2x20, que contiene el gen xynb bajo el control del promotor sp02. Los estudios de localizaci\u00f3n celular indican que xynb es un xilanasa intracelular. Su detecci\u00f3n en sobrenadantes de cultivos viejos es debida a lisis celular y no a aut\u00e9ntica secreci\u00f3n. Asimismo, xynb de paenibacillus barcinonensis junto con otras 6 xilanasas altamente hom\u00f3logas de la familia 10 forman un nuevo subgrupo de xilanasas dentro de dicha familia. Las caracter\u00edsticas comunes de estas xilanasas son la ausencia de p\u00e9ptido se\u00f1al, y la presencia de 2 secuencias conservadas exclusivas, regiones a y b. tambi\u00e9n se ha determinado la estructura tridimensional de la xilanasa b mediante cristalograf\u00eda, observ\u00e1ndose que su conformaci\u00f3n es de un barril (\u00c2\u00bf\/\u00edY)8. La hendidura catal\u00edtica muestra 4 subsitios de uni\u00f3n al sustrato claramente definidos, resaltando la presencia de una cavidad a nivel del subsitio +2, que permitir\u00eda acomodar sustituyentes laterales como \u00e1cido metil glucur\u00f3nico. Tambi\u00e9n es de gran importancia el bucle l7, que contiene la regi\u00f3n conservada b, para determinar la conformaci\u00f3n del centro activo de la xilanasa. Mediante evoluci\u00f3n dirigida se han obtenido 4 mutantes termoestables de xynb, cada una de ellas con una de las siguientes sustituciones: e137d, d323n, s15l y m93v. Las variantes con las mutaciones s15l y m93v presentan una vida media claramente superior a la xilanasa salvaje. La combinaci\u00f3n de las 2 mutaciones m\u00e1s efectivas (s15l y m93v) en un doble mutante s15l\/m93v origina una xilanasa con una vida media a 50\u00c2\u00b0 c incrementada m\u00e1s de 20 veces respecto a la enzima salvaje; hacho que se deberla a un efecto sin\u00e9rgico de las mutaciones introducidas.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>T\u00edtulo de la tesis: caracterizaci\u00f3n de nuevas xilanasas bacterianas. ingenier\u00eda de enzimas con la xilanasa b de paenibacillus barcinonensis<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 T\u00edtulo de la tesis: caracterizaci\u00f3n de nuevas xilanasas bacterianas. ingenier\u00eda de enzimas con la xilanasa b de paenibacillus barcinonensis <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Oscar Gallardo Roman <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 18\/12\/2007<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Francisco Ignacio Javier Pastor Blasco<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Antonio Juarez jimenez <\/li>\n<li>angel tomas Martinez ferrer (vocal)<\/li>\n<li>juliana Sanz aparicio (vocal)<\/li>\n<li>julio Polaina molina (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Oscar Gallardo Roman A partir de la cepa xilanol\u00edtica bacillus sp. 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