{"id":62284,"date":"2018-03-09T22:50:10","date_gmt":"2018-03-09T22:50:10","guid":{"rendered":""},"modified":"2018-03-09T22:50:10","modified_gmt":"2018-03-09T22:50:10","slug":"fenilalanina-amonio-liasa-y-polifenol-oxidasa-de-olivoolea-europaea-l-cv-picual-y-su-relacion-con-la-concentracion-de-fenoles-durante-la-maduracion-del-fruto-en-diferentes-variedades-y-en-respuesta","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/fenilalanina-amonio-liasa-y-polifenol-oxidasa-de-olivoolea-europaea-l-cv-picual-y-su-relacion-con-la-concentracion-de-fenoles-durante-la-maduracion-del-fruto-en-diferentes-variedades-y-en-respuesta\/","title":{"rendered":"Fenilalanina amonio-liasa y polifenol oxidasa de olivo(olea europaea l.) cv picual y su relacion con la concentracion de fenoles durante la maduracion del fruto en diferentes variedades y en respuesta al estres por frio"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Francisca Ortega Garcia <\/strong><\/h2>\n<p>Se ha determinado el comportamiento cin\u00e9tico, niveles de expresi\u00f3n proteica y localizaci\u00f3n tisular de la fenilalanina amonio-liasa (pal) y polifenol oxidasa (ppo) y su relaci\u00f3n con la concentraci\u00f3n de fenoles totales, oleurope\u00edna, hidroxitirosol y tirosol en olivos (olea europaea l.) De cultivares de la variedad picual. Se han llevado a cabo t\u00e9cnicas de extracci\u00f3n y purificaci\u00f3n, t\u00e9cnicas espectrofotom\u00e9tricas, electroforesis en gel de poliacrilamida, en condiciones parcialmente o totalmente desnaturalizantes, \u00abwestern-blot\u00bb, inmunohistoqu\u00edmica a microscop\u00eda \u00f3ptica y hplc-uv\/vis y hplc-ms-ms. Pal de hoja y fruto muestra una cin\u00e9tica hiperb\u00f3lica, con una km de 0,2 mm y una masa molecular aparente de 75 kda. Se ha localizado en c\u00e9lulas de la epidermis y del par\u00e9nquima y puede estar asociada, en hojas, a procesos de defensa y, en fruto, a la s\u00edntesis de antocianinas y otros fenoles. Ppo est\u00e1 presente tambi\u00e9n en hoja y en fruto, aunque su actividad y niveles son significativamente mayores en fruto. Presenta una cin\u00e9tica hiperb\u00f3lica con una km frente al catecol de 8 mm. Se ha determinado el grado de especificidad de ppo por otros substratos y se ha observado diferencias significativas en el comportamiento cin\u00e9tico en hoja y en fruto. Esto, junto con el patr\u00f3n diferencial de bandas encontrado mediante page en condiciones particialmente desnaturalizantes, a lo largo de la maduraci\u00f3n, hace suponer que se trate de isoenzimas diferentes los que se expresan en ambos \u00f3rganos. En el fruto, ppo es una prote\u00edna que presenta una masa molecular aparente de 55 kda en condiciones parcialmente desnaturalizantes y 28 kda en condiciones totalmente desnaturalizantes. En fruto se ha localizado en la epidermis y, en hoja, adem\u00e1s de en la epidermis, en el par\u00e9nquima y en las c\u00e9lulas acompa\u00f1antes del fluoema. En epidermis y par\u00e9nquima parece que se encuentra asociada a los plastos. La oleurope\u00edna es el compuesto fen\u00f3lico que muestra una mayor concentraci\u00f3n en extractos de fruto y hoja. En un segundo experimento se ha determinado el comportamiento cin\u00e9tico y niveles de expresi\u00f3n de pal y ppo durante la maduraci\u00f3n del fruto. En fruto y en hoja, pal cambia como en dos ciclos, uno antes y otro despu\u00e9s del envero indicando que la s\u00edntesis de fenoles puede darse en dos fases, asociada en el fruto, a la s\u00edntesis de antocianinas que producen la pigmentaci\u00f3n de la aceituna. Ppo incrementa a medida que transcurre la maduraci\u00f3n apareciendo una nueva banda de 36 kda en las \u00faltimas etapas que puede servir de marcador de que el proceso se est\u00e1 completando. Al mismo tiempo se produce un significativo descenso en la concentraci\u00f3n de fenoles totales, oleurope\u00edna, tirosol e hidroxitirosol que parece que no est\u00e1 asociado al aumento en la actividad ppo. En un tercer experimento realizado en las variedades picual, verdial, arbequina y frantoio a lo largo de la maduraci\u00f3n del fruto se ha observado que existe una respuesta gradual y coordinada entre pal y ppo que puede determinar la concentraci\u00f3n final de fenoles totales en estas variedades. Frantoio es la variedad que muestra unos niveles de fenoles totales m\u00e1s altos y la que presenta unos valores m\u00e1s altos de actividad pal y los m\u00e1s bajos de actividad ppo. Verdial es la que muestra unos niveles de fenoles totales m\u00e1s bajos, menor activdad pal y mayor actividad ppo. Picual y arbequina muestran valores intermedios de actividad pal y ppo coincidiendo con una concentraci\u00f3n de fenoles totales intermedia. Los perfiles cromatogr\u00e1ficos de la fracci\u00f3n fen\u00f3lica de los frutos de las cuatro variedades as\u00ed como su evoluci\u00f3n a lo largo de la maduraci\u00f3n pueden servir para la caracterizaci\u00f3n y diferenciaci\u00f3n bioqu\u00edmica de cada variedad. En un cuarto experimento se ha observado que en hoja de olivos de la variedad picual sometidos a diferentes niveles de afectaci\u00f3n por fr\u00edo y heladas, se producen la estimulaci\u00f3n diferencial de la actividad pal y ppo as\u00ed como un fuerte incremento en la concentraci\u00f3n de oleurope\u00edna. Estos resultados desmuestran que pal, ppo y oleurope\u00edna son tres elementos implicados en la respuesta del olivo ante el estr\u00e9s por fr\u00edo y que podr\u00edan formar parte de un mecanismo de resistencia ante esta situaci\u00f3n.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Fenilalanina amonio-liasa y polifenol oxidasa de olivo(olea europaea l.) cv picual y su relacion con la concentracion de fenoles durante la maduracion del fruto en diferentes variedades y en respuesta al estres por frio<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Fenilalanina amonio-liasa y polifenol oxidasa de olivo(olea europaea l.) cv picual y su relacion con la concentracion de fenoles durante la maduracion del fruto en diferentes variedades y en respuesta al estres por frio <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Francisca Ortega Garcia <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Ja\u00e9n<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 21\/12\/2007<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan Peragon Sanchez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 Antonio Lupia\u00f1ez cara <\/li>\n<li>Mar\u00eda victoria G\u00f3mez rodr\u00edguez (vocal)<\/li>\n<li>M\u00aa angeles Peinado herreros (vocal)<\/li>\n<li>gabriel Beltran maza (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Francisca Ortega Garcia Se ha determinado el comportamiento cin\u00e9tico, niveles de expresi\u00f3n proteica y localizaci\u00f3n tisular de [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center 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