{"id":63909,"date":"2008-11-04T00:00:00","date_gmt":"2008-11-04T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/reprogramacion-del-polen-y-obtencion-de-plantas-doble-haploides-de-capsisum-annuum-l-marcadores-celulares-y-expresion-de-moleculas-de-senalizadoras-de-estres\/"},"modified":"2008-11-04T00:00:00","modified_gmt":"2008-11-04T00:00:00","slug":"reprogramacion-del-polen-y-obtencion-de-plantas-doble-haploides-de-capsisum-annuum-l-marcadores-celulares-y-expresion-de-moleculas-de-senalizadoras-de-estres","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/biologia-celular\/reprogramacion-del-polen-y-obtencion-de-plantas-doble-haploides-de-capsisum-annuum-l-marcadores-celulares-y-expresion-de-moleculas-de-senalizadoras-de-estres\/","title":{"rendered":"Reprogramaci\u00f3n del polen y obtenci\u00f3n de plantas doble-haploides de capsisum annuum l.: marcadores celulares y expresi\u00f3n de mol\u00e9culas de se\u00f1alizadoras de estr\u00e9s."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Ivett B\u00e1r\u00e1ny <\/strong><\/h2>\n<p>El polen es capaz de cambiar su proceso de desarrollo, reprogramarse y entrar en una nueva ruta denominada embriog\u00e9nica, tras un tratamiento de estr\u00e9s. Tras su reprogramaci\u00f3n, la microspora comienza a dividirse sim\u00e9tricamente dando lugar a proembriones y embriones que posteriormente contin\u00faan su desarrollo regenerando plantas haploides o doble-haploides. en este contexto, el cultivo de anteras es, hoy en d\u00eda, uno de los m\u00e9todos m\u00e1s eficientes para la obtenci\u00f3n de plantas doble-haploides, de gran utilidad para generar nuevas l\u00edneas isog\u00e9nicas y variedades, as\u00ed como para estudios gen\u00e9ticos y de mutag\u00e9nesis. el pimiento (capsicum annuum l.) Es uno de los cultivos hort\u00edcolas m\u00e1s importantes desde el punto de vista econ\u00f3mico en espa\u00f1a, siendo \u00e9ste el pa\u00eds con mayor producci\u00f3n de la uni\u00f3n europea. en esta tesis doctoral, un primer objetivo ha sido la obtenci\u00f3n plantas doble-haploides a partir de cultivos de anteras de capsicum annuum yolo wonder var. B. Hemos optimizado los protocolos existentes (mityk\u00f3 et al., 1995), estudiando diversos factores tales como la correlaci\u00f3n entre la morfolog\u00eda de los botones florales, el tama\u00f1o y la coloraci\u00f3n de las anteras con antocianina y el estadio de desarrollo de las microsporas, as\u00ed como diversos aspectos del cultivo in vitro y el tratamiento de estr\u00f1es inductor de la embriog\u00e9nesis. Por otro lado, se ha llevado a cabo la caracterizaci\u00f3n celular de las primeras etapas de desarrollo hasta el estado de torpedo en la embriog\u00e9nesis de microsporas de capsicum annuum l. Se ha determinado el nivel de ploid\u00eda de las plantas procedentes del cultivo de microsporas, mediante citometr\u00eda de flujo. un segundop objetivo ha sido el an\u00e1lisis de distintos aspectos del proceso de reprogramaci\u00f3n del polen a embriog\u00e9nesis, concretamente la identificaci\u00f3n de marcadores en etapas clave y la expresi\u00f3n de prote\u00ednas de estr\u00e9s y se\u00f1alizadoras. existe una estrecha relaci\u00f3n entre las prote\u00ednas de choque t\u00e9rmico (hsps) y el abandono de la ruta gametof\u00edtica hacia la embriog\u00e9nesis. Hemos estudiado los cambios en la expresi\u00f3n y en la localizaci\u00f3n subcelular de dos prote\u00ednas de choque t\u00e9rmico, hsp70 y hsp90, en la ruta gametof\u00edtica y en varias etapas de la ruta embriog\u00e9nica. Tras el tratamiento inductor se observ\u00f3 un gran aumento de la expresi\u00f3n de hsp70, y una traslocaci\u00f3n al nucleolo de la misma; sugiriendo una funci\u00f3n espec\u00edficamente protectora de la maquinaria nuclear y reguladora de la expresi\u00f3n g\u00e9nica. se ha realizado una caracterizaci\u00f3n celular y ultraestructural (gametof\u00edtico y embriog\u00e9nico) secuencial de todas las etapas de los procesos de desarrollo, mediante el empleo de t\u00e9cnicas histoqu\u00edmicas e inmunocitoqu\u00edmicas espec\u00edficas, para elegir las fases fundamentales de estudio donde aparecen las caracter\u00edsticas celulares y funcionales diferentes. Ha sido objeto de especial atenci\u00f3n la definici\u00f3n de marcadores celulares que caracterizan y diferencian los do programas de desarrollo del polen, el gametof\u00edtico y el embriog\u00e9nico, y que indican los principales cambios de actividad metab\u00f3lica que est\u00e1n asociados a la reprogramaci\u00f3n del polen. Entre estos marcadores se han identificado los cambios en el tama\u00f1o y forma celular y nuclear, el patr\u00f3n de condensaci\u00f3n cromat\u00ednica, la organizaci\u00f3n funcional de la regi\u00f3n intercromat\u00ednica y la arquitectura nucleolar, la poblaci\u00f3n ribos\u00f3mica y la densidad citopl\u00e1smica, la presencia y tama\u00f1o de gr\u00e1nulos de almid\u00f3n y por \u00faltimo, la estructura y composici\u00f3n de las paredes celulares. se ha analizado la expresi\u00f3n in situ de mol\u00e9culas se\u00f1alizadoras como las erks, p-mapks y lox, encontr\u00e1ndose diferencias en su expresi\u00f3n y localizaci\u00f3n subcelular entre las microsporas que se reprograman hacia proliferaci\u00f3n (ruta embriog\u00e9nica) frente a las que siguen su proceso normal de diferenciaci\u00f3n (ruta gametof\u00edtica). Asimismo se han detectado cambios en la composici\u00f3n de las paredes celulares en relaci\u00f3n a los procesos de proliferaci\u00f3n y diferenciaci\u00f3n. muchos de los anticuerpos empleados han resultado ser buenos marcadores que nos permiten identificar de forma temprana en el cultivo las microsporas que se reprograman e inician la proliferaci\u00f3n (ruta embriog\u00e9nica): mayor proporci\u00f3n de erk y mapk en n\u00facleo, aumento de cuerpos de cajal nucleares, expresi\u00c2\u00bf\u00c2\u00bfon de pcna asociado a replicaci\u00f3n y mayor proporci\u00f3n de pectinas esterificadas (marcadas por jim7) en las paredes celulares; frente a las que siguen su proceso normal de diferenciaci\u00f3n (ruta gametof\u00edtica): acumulaci\u00f3n de almid\u00f3n, mayor proporci\u00f3n de erk y pmapk en citoplasma, y de pectinas no esterificadas (marcadas por jim5), xiloglucanos (xg) y ramnogalacturonano ii (rgii) en las paredes celulares. los resultados obtenidos aportan nueva informaci\u00f3n muy valiosa sobre los mecanismos que controlan el proceso de reprogramaci\u00f3n del polen a embriog\u00e9nesis en capsicum annuum l, una especie de gran inter\u00e9s econ\u00f3mico; informaci\u00f3n que puede ayudar a su explotaci\u00f3n de forma m\u00e1s eficiente y a dirigir futuras estrategias en la mejora de este cultivo.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Reprogramaci\u00f3n del polen y obtenci\u00f3n de plantas doble-haploides de capsisum annuum l.: marcadores celulares y expresi\u00f3n de mol\u00e9culas de se\u00f1alizadoras de estr\u00e9s.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Reprogramaci\u00f3n del polen y obtenci\u00f3n de plantas doble-haploides de capsisum annuum l.: marcadores celulares y expresi\u00f3n de mol\u00e9culas de se\u00f1alizadoras de estr\u00e9s. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Ivett B\u00e1r\u00e1ny <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 11\/04\/2008<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda  Del Carmen Risue\u00f1o Almeida<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: benjam\u00edn Fern\u00e1ndez ruiz <\/li>\n<li>Mar\u00eda  \u00e1ngeles Bueno perez (vocal)<\/li>\n<li>oscar Vicente meana (vocal)<\/li>\n<li>Jos\u00e9 Mar\u00eda Segu\u00ed simarro (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Ivett B\u00e1r\u00e1ny El polen es capaz de cambiar su proceso de desarrollo, reprogramarse y entrar en una 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