{"id":64796,"date":"2018-03-09T22:52:51","date_gmt":"2018-03-09T22:52:51","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-de-los-sistemas-renales-de-raton-yi-humano-pct3-i-hk-2-mecanismos-moleculares-implicados-en-la-nefrotoxicidad-producida-por-la-csa-en-el-tubulo-proximal-renal\/"},"modified":"2018-03-09T22:52:51","modified_gmt":"2018-03-09T22:52:51","slug":"caracterizacion-de-los-sistemas-renales-de-raton-yi-humano-pct3-i-hk-2-mecanismos-moleculares-implicados-en-la-nefrotoxicidad-producida-por-la-csa-en-el-tubulo-proximal-renal","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/caracterizacion-de-los-sistemas-renales-de-raton-yi-humano-pct3-i-hk-2-mecanismos-moleculares-implicados-en-la-nefrotoxicidad-producida-por-la-csa-en-el-tubulo-proximal-renal\/","title":{"rendered":"Caracterizaci\u00f3n de los sistemas renales de rat\u00f3n yi humano (pct3 i hk-2). mecanismos moleculares implicados en la nefrotoxicidad producida por la csa en el t\u00fabulo proximal renal"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Marta Puigmul\u00e9 Raurich <\/strong><\/h2>\n<p>La csa es un potente inmunosupressor ampliamente utilizado en el trasplante de \u00f3rganos s\u00f3lidos que como principal efecto secundario muestra una elevada toxicidad renal que puede conducir a la p\u00e9rdida de la funci\u00f3n renal. Los mecanismos moleculares a trav\u00e9s de los cuales la csa ejerce su efecto inmunosupresor son bien conocidos. Aunque es sabido que el da\u00f1o renal presenta dos formas de nefrotoxicidad claramente diferenciadas la nefrotoxicidad cr\u00f3nica y la aguda se conoce muy poco sobre los mecanismos de acci\u00f3n a nivel molecular implicados en el da\u00f1o renal causado por el f\u00e1rmaco inmunosupresor csa. Estudios en nuestro laboratorio, mediante t\u00e9cnicas de doble h\u00edbrido en levadura, demuestran que la prote\u00edna kap (prote\u00edna espec\u00edfica de t\u00fabulo proximal) interacciona con el receptor intracelular de la csa, la ciclofilina b. La prote\u00edna kap disminuye en ratones tratados con csa y su expresi\u00f3n controlada en un sistema celular de t\u00fabulo proximal renal, las c\u00e9lulas pct3, reduce de forma significativamente la toxicidad producida por la csa. Por todos estos motivos, se abre un nuevo proyecto basado en determinar y estudiar los mecanismos moleculares implicados en la toxicidad celular causada por la csa en el t\u00fabulo proximal renal. los resultados obtenidos durante este trabajo experimental nos muestran c\u00f3mo en las l\u00edneas celulares pct3 y hk-2, despu\u00e9s de 24h de tratamiento con la dosis 10 \u00c2\u00bfm csa se produce una reducci\u00f3n significativa de la viabilidad celular. Dosis inferiores de csa causan una disminuci\u00f3n de la actividad deshidrogenasa mitocondrial al poco tiempo de haber iniciado el tratamiento, recuper\u00e1ndola poco despu\u00e9s en todos los casos estudiados. A esta dosis y tiempo de tratamiento la disminuci\u00f3n de la viabilidad coincide con la aparici\u00f3n de la muerte celular por apoptosis, una disminuci\u00f3n del porcentaje de c\u00e9lulas en fase s y una disminuci\u00f3n del consumo de ox\u00edgeno. a continuaci\u00f3n se realiza una an\u00e1lisis prote\u00f3mico diferencial de mapas proteicos obtenidos de c\u00e9lulas pct3 tratadas con dosis crecientes de csa durante 24h. La variaci\u00f3n de la expresi\u00f3n de la mayor\u00eda de las prote\u00ednas analizadas tiene lugar a partir de la dosis 10 \u00c2\u00bfm de csa. Es por este motivo que a continuaci\u00f3n se realiza un an\u00e1lisis prote\u00f3mico diferencial de c\u00e9lulas pct3 control con c\u00e9lulas pct3 tratadas durante 24h con 10 \u00c2\u00bfm de csa. Este an\u00e1lisis detecta 72 prote\u00ednas diferenciales de las cuales se identifican 38. Estas prote\u00ednas se clasifican en 6 categor\u00edas diferentes: metabolismo de prote\u00ednas, metabolismo energ\u00e9tico, ciclo celular, organizaci\u00f3n celular y citoesqueleto, da\u00f1o celular y metabolismo de \u00e1cidos nucleicos. Para corroborar el an\u00e1lisis prote\u00f3mico el comportamiento de algunas de estas prote\u00ednas fue comprobado mediante western blot de geles precedientes de electroforesis uni y bidimensionales. Este an\u00e1lisis nos ha permitido encontrar marcadores putativos de da\u00f1o renal causado por la csa en el t\u00fabulo proxial renal. En este estudio prote\u00f3mico tambi\u00e9n se ha estudiado c\u00f3mo son de parecidos los proteomas de rat\u00f3n y humano. finalmente, se han silenciado la expresi\u00f3n de la ciclofilinas a y b, receptores del f\u00e1rmaco csa, mediante rnai en las c\u00e9lulas pct3. A continuaci\u00f3n se ha estudiado la sensibilidad de estas c\u00e9lulas a la csa y las prote\u00ednas y\/o mecanismos moleculares implicados en el silenciamiento de las ciclofilina a y b. Los resultados nos muestran c\u00f3mo las c\u00e9lulas con la expresi\u00f3n de la cypa o b disminuida son menos sensibles a la toxicidad celular causada por la csa, ya que \u00e9sta empieza a manifestarse a la dosis de 20 \u00c2\u00bfm de csa. La apoptosis sin embargo aparece a las mismas concentraciones que lo hace en las c\u00e9lulas pct3 sin interferir. Sin embargo los niveles de apoptosis detectados en las c\u00e9lulas con la expresi\u00f3n de la cypa o cypb disminuida es inferior que la apoptosis encontrada en las c\u00e9lulas control. Este hecho es m\u00e1s evidente cuando se silencia la cypa. A continuaci\u00f3n se realiza un an\u00e1lisis prote\u00f3mico diferencial entre c\u00e9lulas pct3 control y pct3 interferidas con una u otra ciclofilina. Para la cypa se encuentran 49 prote\u00ednas diferencialmente expresadas de las cuales se han identificado 25. Para la cypb se detectan 68 prote\u00ednas diferencialmente expresadas 21 de las cuales ha sido identificadas. De todas estas prote\u00ednas identificada hasta el momento las podemos clasificar en 3 grupos: i) prote\u00ednas que son comunes al interferir las cilofilinas y al tratamiento con csa 10 \u00c2\u00bfm, ii) prote\u00ednas comunes al interferir una u otra cilofilina y iii) prote\u00ednas exclusivas de una u otra interferencia.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizaci\u00f3n de los sistemas renales de rat\u00f3n yi humano (pct3 i hk-2). mecanismos moleculares implicados en la nefrotoxicidad producida por la csa en el t\u00fabulo proximal renal<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizaci\u00f3n de los sistemas renales de rat\u00f3n yi humano (pct3 i hk-2). mecanismos moleculares implicados en la nefrotoxicidad producida por la csa en el t\u00fabulo proximal renal <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Marta Puigmul\u00e9 Raurich <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 29\/05\/2008<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Anna Messeguer Navarro<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: emili Itarte fresquet <\/li>\n<li>carles j. Ciudad (vocal)<\/li>\n<li>francesc Canals sur\u00eds (vocal)<\/li>\n<li>Alberto Tejedor Jorge (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Marta Puigmul\u00e9 Raurich La csa es un potente inmunosupressor ampliamente utilizado en el trasplante de \u00f3rganos s\u00f3lidos [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[951,160],"tags":[15545,34233,142959,13701,124038,142958],"class_list":["post-64796","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-barcelona","category-bioquimica","tag-alberto-tejedor-jorge","tag-anna-messeguer-navarro","tag-carles-j-ciudad","tag-emili-itarte-fresquet","tag-francesc-canals-suris","tag-marta-puigmule-raurich"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/64796","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=64796"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/64796\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=64796"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=64796"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=64796"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}