{"id":65365,"date":"2018-03-09T22:53:29","date_gmt":"2018-03-09T22:53:29","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/development-of-allosteric-biosensors-for-the-diagnosis-of-infectious-diseases\/"},"modified":"2018-03-09T22:53:29","modified_gmt":"2018-03-09T22:53:29","slug":"development-of-allosteric-biosensors-for-the-diagnosis-of-infectious-diseases","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica\/development-of-allosteric-biosensors-for-the-diagnosis-of-infectious-diseases\/","title":{"rendered":"Development of allosteric biosensors for the diagnosis of infectious diseases"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Rosa Mar\u00eda Ferraz Colomina <\/strong><\/h2>\n<p>En los \u00faltimos a\u00f1os, los biosensores han representado un gran avance en la detecci\u00f3n de mol\u00e9culas. Est\u00e1n compuestos por un receptor biol\u00f3gico, que puede ser un \u00e1cido nucleico, prote\u00edna, c\u00e9lula, etc., Y por un transductor de la se\u00f1al, generalmente electrodos, microbalanzas, componentes \u00f3pticos o semiconductores. Entre otros tipos de biosensores, los biosensores proteicos destacan por contener receptor y transductor, puesto que la mol\u00e9cula entera se produce biol\u00f3gicamente. Adem\u00e1s, la existencia de t\u00e9cnicas de ingenier\u00eda de prote\u00ednas hace que se puedan dise\u00f1ar biosensores a la carta, aptos para detectar espec\u00edficamente mol\u00e9culas de inter\u00e9s. los biosensores alost\u00e9ricos forman parte del grupo de biosensores proteicos y se caracterizan por ser activados o inhibidos por la interacci\u00f3n con el analito. El efecto sobre su actividad es debido a peque\u00f1os cambios conformacionales dentro de la prote\u00edna derivados de esa interacci\u00f3n. En el presente trabajo se ha caracterizado un biosensor alost\u00e9rico previamente sintetizado, llamado nf795gpc, para la detecci\u00f3n de anticuerpos espec\u00edficos contra el virus de la inmunodeficiencia humana (vih) y basado en el uso del enzima beta-galactosidasa de escherichia coli. El determinante antig\u00e9nico p1 de la prote\u00edna gp41 de la envuelta del vih-1 fue insertado en posici\u00f3n 795 de la prote\u00edna, alter\u00e1ndose considerablemente la actividad espec\u00edfica del enzima. En presencia de anticuerpos espec\u00edficos contra el ep\u00edtopo insertado, el enzima es capaz de aumentar su actividad vi\u00e9ndose claramente un aumento de la cantidad de producto de la reacci\u00f3n. As\u00ed, la respuesta del sensor se mide como porcentaje de activaci\u00f3n, en el cual se compara el producto obtenido en presencia de anticuerpo con el producto obtenido en ausencia de \u00e9ste. se empez\u00f3 caracterizando la prote\u00edna nf795gpc, y optimizando las condiciones de la reacci\u00f3n para mejorar la respuesta del sistema. Esto se realiz\u00f3 mediante la obtenci\u00f3n de las concentraciones \u00f3ptimas de prote\u00edna y de substrato que daban mayores valores de activaci\u00f3n de la prote\u00edna y tambi\u00e9n mediante la selecci\u00f3n de los substratos que dieran una mayor sensibilidad al sistema, un mayor rango de respuesta y valores de activaci\u00f3n m\u00e1s elevados. la proteina nf795gpc en estado  inmovilizado manten\u00eda las propiedades alost\u00e9ricas previas y adem\u00e1s era lo suficientemente estable para poder desarrollar en el futuro un test \u00fatil a nivel de campo. tambi\u00e9n se describi\u00f3 la capacidad del sensor para discernir entre diferentes tipos de anticuerpos presentes en el suero. El an\u00e1lisis de las subpoblaciones de anticuerpos de sueros infectados por vih que reconoc\u00edan al sensor, result\u00f3 en una relaci\u00f3n directa entre la activaci\u00f3n del sensor y el nivel de inmunoglobulinas tipo igg4.An\u00e1lisis de sueros de pacientes infectados que no hab\u00edan seguido un tratamiento antirretroviral revelaron la correlaci\u00f3n del nivel de inmunoglobulinas tipo igm con la activaci\u00f3n del sensor, sugiriendo cambios funcionales en anticuerpos derivados del tratamiento antirretroviral. finalmente, la construcci\u00f3n de nievas prote\u00ednas incluyendo otros fragmentos antig\u00e9nicos del vih-1, permiti\u00f3 la mejora de la sensibilidad del sistema obtenida previamente, llegando a valores de hasta un 98% en un conjunto de 61 sueros. el desarrollo de un ensayo econ\u00f3mico, sencillo y con resultados r\u00e1pidos en la detecci\u00f3n de enfermedades infecciosas basado en enzimas, podr\u00eda ser de gran ayuda en salud p\u00fablica, sobretodo en aquellos pa\u00edses donde la falta de recursos impide un diagn\u00f3stico r\u00e1pido y eficaz de las enfermedades.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Development of allosteric biosensors for the diagnosis of infectious diseases<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Development of allosteric biosensors for the diagnosis of infectious diseases <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Rosa Mar\u00eda Ferraz Colomina <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 19\/06\/2008<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Antonio Villaverde Corrales<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Juan  Carlos S\u00e1iz calahorra <\/li>\n<li>jordi xavier Feliu gil (vocal)<\/li>\n<li>grzegorz Wegrzyn (vocal)<\/li>\n<li>carles Morte marti (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Rosa Mar\u00eda Ferraz Colomina En los \u00faltimos a\u00f1os, los biosensores han representado un gran avance en la 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