{"id":65415,"date":"2018-03-09T22:53:29","date_gmt":"2018-03-09T22:53:29","guid":{"rendered":""},"modified":"2018-03-09T22:53:29","modified_gmt":"2018-03-09T22:53:29","slug":"desarrollo-de-un-sistema-de-purificacion-de-isopenicilina-n-caracterizacion-del-transporte-de-este-y-otros-intermediarios-de-la-ruta-biosintetica-de-beta-lactamas-en-los-hongos-productores-acremonium","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/leon\/desarrollo-de-un-sistema-de-purificacion-de-isopenicilina-n-caracterizacion-del-transporte-de-este-y-otros-intermediarios-de-la-ruta-biosintetica-de-beta-lactamas-en-los-hongos-productores-acremonium\/","title":{"rendered":"Desarrollo de un sistema de purificaci\u00f3n de isopenicilina n. caracterizaci\u00f3n del transporte de \u00e9ste y otros intermediarios de la ruta biosint\u00e9tica de beta-lactamas en los hongos productores acremonium chrysogenum y penicillium chrysogenum."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Inmaculada Vaca Cerezo <\/strong><\/h2>\n<p>Las rutas biosint\u00e9ticas de penicilinas y cefalosporinas han sido ampliamente estudiadas y est\u00e1n caracterizadas a nivel g\u00e9nico en su totalidad. El inter\u00e9s por estos antibi\u00f3ticos beta-lact\u00e1micos sigue siendo enorme a nivel industrial, por lo que se contin\u00faa su investigaci\u00f3n, centr\u00e1ndose esta ahora en los procesos de transporte y regulaci\u00f3n. en esta tesis doctoral se han abordado varios aspectos a\u00fan no aclarados sobre la isopenicilina n, intermediario clave en el estudio de las rutas biosint\u00e9ticas de penicilinas y cefalosporinas. La isopenicilina n es el primer compuesto bioactivo que se forma en estas rutas, que hasta esta etapa son id\u00e9nticas. Es a partir de isopenicilina n que las rutas se diferencian para la formaci\u00f3n de penicilinas en penicillium chrysogenum, y hacia cefalosporina en acremonium chrysogenum. el primer objetivo que se abord\u00f3 fue la obtenci\u00f3n de un m\u00e9todo de purificaci\u00f3n r\u00e1pido y eficiente a partir de caldos de cultivo de cepas de los hongos productores. El m\u00e9todo que se desarroll\u00f3 consta de cinco pasos: desproteinizaci\u00f3n, tres cromatograf\u00edas cl\u00e1sicas de columna y purificaci\u00f3n a homogeneidad con hplc semipreparativo. La pureza de la isopenicilina n obtenida es de aproximadamente 95% y el rendimiento total de la purificaci\u00f3n es de 20-25%.  La obtenci\u00f3n de gran cantidad de isopenicilina n permiti\u00f3 completar su caracterizaci\u00f3n espectrosc\u00f3pica con la realizaci\u00f3n de un 13c-rmn,  realizar estudios de cin\u00e9tica de degradaci\u00f3n a distintas condiciones de ph y temperatura, as\u00ed como estudios que permitieron determinar las condiciones \u00f3ptimas de almacenamiento de este compuesto.   con objeto de estudiar el tipo de transporte por el cual los intermediarios de la ruta biosint\u00e9tica de penicilina, acv, 6-apa e ipn, son secretados al medio de cultivo, se realizaron estudios \u00c2\u00bfin vivo\u00c2\u00bf de dicho transporte desarrollando para ello las cepas adecuadas en cada caso de penicillium chrysogenum. La principales conclusiones de este estudio fueron que el 6-apa difunde a trav\u00e9s de la membrana plasm\u00e1tica y peroxisomal de forma dependiente del tiempo y de la concentraci\u00f3n, que el acv no difunde, por lo que requiere de un sistema de transporte activo para su exportaci\u00f3n al exterior celular, y por \u00faltimo, que la isopenicilina n tambi\u00e9n requiere de un sistema de transporte que la incorpore al interior peroxisomal y otro que la secrete al medio.  finalmente, se ha empleado un sistema heter\u00f3logo para purificar la prote\u00edna codificada por el gen cefd1 con el fin de estudiar su actividad enzim\u00e1tica. Cuando se describi\u00f3 este gen por primera vez se le asign\u00f3 la funci\u00f3n de activar la ipn a su derivado acil-coa en el sistema de epimerizacion de ipn a pn en acremonium chrysogenum, los resultados obtenidos en este trabajo conducen a proponer que la enzima cefd1 activa la ipn a su derivado isopenicilinil-coa para que se pueda ser transportada hacia el interior peroxisomal.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Desarrollo de un sistema de purificaci\u00f3n de isopenicilina n. caracterizaci\u00f3n del transporte de \u00e9ste y otros intermediarios de la ruta biosint\u00e9tica de beta-lactamas en los hongos productores acremonium chrysogenum y penicillium chrysogenum.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Desarrollo de un sistema de purificaci\u00f3n de isopenicilina n. caracterizaci\u00f3n del transporte de \u00e9ste y otros intermediarios de la ruta biosint\u00e9tica de beta-lactamas en los hongos productores acremonium chrysogenum y penicillium chrysogenum. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Inmaculada Vaca Cerezo <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Le\u00f3n<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 20\/06\/2008<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Carlos Garc\u00eda Estrada<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: paloma Liras pad\u00edn <\/li>\n<li>Manuel Ferrer Martinez (vocal)<\/li>\n<li>\u00e1ngel Rumbero s\u00e1nchez (vocal)<\/li>\n<li>m\u00f3nica Lamas maceiras (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Inmaculada Vaca Cerezo Las rutas biosint\u00e9ticas de penicilinas y cefalosporinas han sido ampliamente estudiadas y est\u00e1n caracterizadas 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