{"id":65440,"date":"2018-03-09T22:53:33","date_gmt":"2018-03-09T22:53:33","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/mecanismos-reguladores-de-la-biosa%c2%adntesis-de-isoprenoides-en-pastos-de-arabidopsis-thaliana\/"},"modified":"2018-03-09T22:53:33","modified_gmt":"2018-03-09T22:53:33","slug":"mecanismos-reguladores-de-la-biosa%c2%adntesis-de-isoprenoides-en-pastos-de-arabidopsis-thaliana","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/barcelona\/mecanismos-reguladores-de-la-biosa%c2%adntesis-de-isoprenoides-en-pastos-de-arabidopsis-thaliana\/","title":{"rendered":"Mecanismos reguladores de la bios\u00edntesis de isoprenoides en pastos de arabidopsis thaliana"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Ursula Flores Perez <\/strong><\/h2>\n<p>La tesis doctoral est\u00e1 redactada como un \u00abcompendio de publicaciones\u00bb en los idiomas espa\u00f1ol e ingl\u00e9s con cinco cap\u00edtulos de resultados que detallan un trabajo independiente de los cuales los tres primeros trabajos han sido publicados en revistas de prestigio y los dos \u00faltimos se hallan en preparaci\u00f3n para su posterior publicaci\u00f3n. Adem\u00e1s dos ap\u00e9ndices, uno refiere a un cap\u00edtulo de un libro (carotenoids) que est\u00e1 en prensa (blackwell publishing, 2008. Isbn 13: 978-1405131513) y el otro a los \u00abm\u00e9todos detallados\u00bb empleados en este trabajo. isoprenoides plast\u00eddicos como los carotenoides, las clorofilas, o las hormonas giberelinas y \u00e1cido absc\u00edsico son esenciales para el crecimiento y desarrollo de las plantas. El objetivo principal de este trabajo doctoral es el estudio de los mecanismos reguladores de la bios\u00edntesis de isoprenoides en plastos, particularmente a partir de la ruta del 4-metileritritol fosfato (mep). Para ello se emplearon dos estrategias: (1) dirigida (an\u00e1lisis de la influencia de la enzima hds en el control del flujo metab\u00f3lico de la ruta), y (2) no-dirigida (identificaci\u00f3n y caracterizaci\u00f3n de mutantes resistentes a un bloqueo de la ruta con fosmidomicina). el primer objetivo de este trabajo fue la caracterizaci\u00f3n de la contribuci\u00f3n de la enzima la enzima 1-hidroxi 2-met\u00edl 2-butenil 4-difosfato (hmbpp) sintasa (hds) que cataliza la pen\u00faltima reacci\u00f3n de la ruta del mep. Con el objetivo de estudiar la contribuci\u00f3n de la enzima hds al control del flujo metab\u00f3lico de la ruta, se analiz\u00f3 el efecto de su sobre-expresi\u00f3n en la acumulaci\u00f3n de productos finales de la ruta del mep (i.E., Carotenoides) tanto en e. Coli como en a. Thaliana. Para ello se generaron cepas de e. Coli en las que se sobreprodujo una prote\u00edna recombinante con actividad hds y l\u00edneas transg\u00e9nicas de sobre-expresi\u00f3n de hds en plantas de arabidopsis thaliana. Los resultados obtenidos para bacterias y plantas fueron similares, sin encontrar efecto de la sobre-producci\u00f3n de la enzima hds en la producci\u00f3n de pigmentos, se\u00f1alando que la enzima hds no tiene un papel limitante en la bis\u00edntesis de los precursores isoprenoides (flores-p\u00e9rez, et al. 2008 biochem biophys res commun). con el objetivo de identificar y caracterizar mecanismos moleculares que regulan la bios\u00edntesis de los precursores comunes de estos isoprenoides a trav\u00e9s de la ruta plast\u00eddica del metileritritol 4-fosfato (mep), se aislaron varias mutantes de arabidopsis thaliana capaces de resistir el bloqueo letal de la ruta por el inhibidor competitivo fosmidomicina (fsm). Entre ellas, las mutantes rif10 y rif1 (resistant to inhibition by fsm 1 y 10) y ia mutante ppi1 (plastidprotein import 1) se caracterizaban por un notable fenotipo p\u00e1lido y un retraso en el desarrollo asociado a la resistencia a fsm, a pesar de que en los tres casos el fenotipo de resistencia a fsm estaba asociado a niveles aumentados post-transcripcionalmente de las enzimas dianas del inhibidor, dxs y dxr. La mutaci\u00f3n en rif10 provoca la p\u00e9rdida de actividad de una exoribonucleasa plast\u00eddica implicada en la s\u00edntesis de prote\u00ednas en plastos (sauret-g\u00ed\u00bceto et al. 2006 plant physiology), mientras que el gen mutado en el mutante r\u00edf1, que hab\u00eda sido previamente descrito como codificante para una \u00f3xido n\u00edtrico sintasa mitocondrial, en realidad codifica para una gtpasa necesaria para el correcto ensamblaje de los ribosomas plast\u00eddicos (flores-p\u00e9rez et al. 2008 plant cell). La p\u00e9rdida de funci\u00f3n de estos genes resulta en una producci\u00f3n alterada de prote\u00ednas codificadas por el genoma plast\u00eddico (plastoma), entre las que se encuentra clpp1, una subunidad catal\u00edtica del complejo de la proteasa clf mutantes de otras subunidades del complejo codificadas por el genoma nuclear tambi\u00e9n muestran niveles aumentados de dxs y dxr (flores-p\u00e9re, et al. 2008 plant cell), lo que demuestra que la proteasa clp regula la degradaci\u00f3n de estos enzimas y, por tanto, puede influir en el flujo de la ruta mep y en la producci\u00f3n de isoprenoides plast\u00eddicos. Apoyando este modelo, hemos comprobado que los mayores niveles de dxs y dxr presentes en la mutante ppi1 no resultan de una mayor tasa de importe de estas prote\u00ednas a plastos (ya que en realidad es menor en el mutante que en las planta silvestres) sino posiblemente de un importe defectuoso de subunidades catal\u00edticas y reguladoras del complejo proteol\u00edtico clp. la \u00faltima mutante en caracterizar fue la r\u00edf18, que a diferencia de las mutantes p\u00e1lidas presenta un fenotipo verde en presencia de los inhibidores d\u00e9la ruta del mep: fsm, clomazona (clm), y tambi\u00e9n es resistente a la inhibici\u00f3n de la ruta del mevalonato por mevinolina (mev). La  p\u00e9rdida de funci\u00f3n del gen codifica para rif18, se ha descrito como un regulador pleiotr\u00f3pico de respuesta a az\u00facares (prl1). En las plantas mutantes rif18, la resistencia a los inhibidores de la ruta mep parecen responder a un flujo acelerado de la ruta por la posible mayor presencia de sustratos iniciales como consecuencia de la mayor sensibilidad a az\u00facares. El flujo acelerado de la ruta del mep no solo resulta en resistencia a inhibidores sino a un mayor importe de precursores isoprenoides desde el plasto hacia el citosol.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Mecanismos reguladores de la bios\u00edntesis de isoprenoides en pastos de arabidopsis thaliana<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Mecanismos reguladores de la bios\u00edntesis de isoprenoides en pastos de arabidopsis thaliana <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Ursula Flores Perez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 20\/06\/2008<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Manuel Rodriguez Concepcion<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: albert Ferrer prats <\/li>\n<li>r. paul Jarvis (vocal)<\/li>\n<li>m. vincent Burlat (vocal)<\/li>\n<li>jordi Garc\u00eda mas (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Ursula Flores Perez La tesis doctoral est\u00e1 redactada como un \u00abcompendio de publicaciones\u00bb en los idiomas espa\u00f1ol 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