{"id":65578,"date":"2018-03-09T22:53:41","date_gmt":"2018-03-09T22:53:41","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/evaluacion-de-la-calidad-embrionaria-de-ovocitos-criopreservados\/"},"modified":"2018-03-09T22:53:41","modified_gmt":"2018-03-09T22:53:41","slug":"evaluacion-de-la-calidad-embrionaria-de-ovocitos-criopreservados","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-medicas\/evaluacion-de-la-calidad-embrionaria-de-ovocitos-criopreservados\/","title":{"rendered":"Evaluacion de la calidad embrionaria de ovocitos criopreservados"},"content":{"rendered":"

Tesis doctoral de Ana Cristina Cobo Cabal <\/strong><\/h2>\n

Introducci\u00f3n la criopreservaci\u00f3n de ovocitos es una opci\u00f3n de gran utilidad para la preservaci\u00f3n de la fertilidad, as\u00ed como para solucionar diferentes situaciones cl\u00ednicas observadas en reproducci\u00f3n asistida, y para la creaci\u00f3n de bancos de ovocitos para donaci\u00f3n. La t\u00e9cnica de criopreservaci\u00f3n de ovocitos m\u00e1s com\u00fanmente empleada durante casi 25 a\u00f1os de investigaciones ha sido la congelaci\u00f3n lenta. Desafortunadamente, la utilizaci\u00f3n de esta t\u00e9cnica a\u00fan no est\u00e1 muy difundida, ya que los resultados obtenidos hasta la fecha han sido claramente insuficientes y de escas\u00edsima reproducibilidad. Por este motivo, la congelaci\u00f3n lenta ha experimentado diferentes modificaciones, con el fin de mejorar los resultados. Una de ellas ha sido el incremento en la concentraci\u00f3n del crioprotector no permeable (sacarosa) y otra la congelaci\u00f3n de los ovocitos rodeados de las c\u00e9lulas del c\u00famulo o totalmente decumulados. El objetivo principal de esta tesis ha sido evaluar el potencial de desarrollo de ovocitos congelados utilizando 0,2m vs. 0,3m de sacarosa, teniendo en cuenta la presencia o ausencia de las c\u00e9lulas del c\u00famulo. materiales y m\u00e9todos se han utilizado un total de 755 ovocitos humanos en metafase ii (mll), los que fueron subdivididos en grupo control (n=235) y grupo de estudio que reuni\u00f3 a los ovocitos que fuero congelados. En este grupo los ovocitos fueron distribuidos de acuerdo a la concentraci\u00f3n de sacarosa y las c\u00e9lulas del c\u00famulo as\u00ed: grupo 0,2m c+ (n=166) y grupo 0,2m c- (n=38) para los ovocitos congelados con 0,2m de sacarosa y en presencia (c+) o ausencia (c-) de las c\u00e9lulas del c\u00famulo. Los ovocitos congelados con 0,3m de sacarosa se subdividieron en 0,3m c+ (n=153) y 0,3m c- (n=150) siguiendo el mismo criterio anterior. Los ovocitos se congelaron en un congelador programable planer kryo 10 serie iii (sundbury on times, england), utilizando protocolo lento con proh 1,5m como crioprotector permeable y sacarosa 0,2m vs. 0,3m. Tres horas tras la evaluaci\u00f3n de la supervivencia, se realiz\u00f3 la icsi (microinyecci\u00f3n intracitoplasm\u00e1tica de espermatozoides). A las 16-18 horas se evalu\u00f3 la fecundaci\u00f3n y el desarrollo embrionario en d\u00eda dos, tres y en estadio de blastocisto. El an\u00e1lisis cromos\u00f3mico embrionario (dgp) se realiz\u00f3 mediante fish efectuada tras la biopsia de blast\u00f3meras en d\u00eda tres. La evaluaci\u00f3n morfol\u00f3gica se realiz\u00f3 mediante la medici\u00f3n del di\u00e1metro de los ovocitos al microscopio \u00f3ptico (mo) y mediante estudio de ultraestructura mediante microscop\u00eda electr\u00f3nica de transmisi\u00f3n (met). Para el estudio de marcadores de ret\u00edculo endopl\u00e1smico liso (rel) se utiliz\u00f3 t\u00e9cnica de inmunocitoqu\u00edmica indirecta de dos capas. Los marcadores estudiados fueron las prote\u00ednas chaperonas: protein disulfuro isomerasa (pdi) y calnexina. resultados la tasa de supervivencia observada fue 66,2%, 68,4%, 62,0% y 84,6% para los grupos 0,2m c+; 0,2m c-; 0,3m c+ y 0.3mc- respectivamente, siendo significativamente superior para este \u00faltimo (p<0,05). No se observaron diferencias significativas en cuanto a la tasa de fecundaci\u00f3n (76,7%; 70,0%; 71,4% y 72,3% respectivamente) con respecto al control (78,2%). La tasa de divisi\u00f3n en d\u00eda dos observada fue 84,8%; 78,6%; 83,3%; 47,2% para los congelados (0,2m c+; 0,2m c-; 0,3m c+ y 0,3mc- respectivamente) y 96,2% para los controles, siendo \u00e9sta \u00faltima significativamente superior a la observada en los congelados (p<0,05). Por otra parte la tasa de divisi\u00f3n m\u00e1s baja se observ\u00f3 en el grupo 0,3m c- (47,2%; p<0,05). En ninguno de los casos en los que se congel\u00f3 en ausencia de las c\u00e9lulas del c\u00famulo (0,2m y 0,3m c-) se alcanz\u00f3 el estadio de blastocisto. Los valores para los grupos 0,2m c+; 0,3m c+ y controles fueron 52,2%; 25%. La tasa de blastocisto fue significativamente superior para el grupo control (60,7%; p<0,05). No se observaron diferencias estad\u00edsticamente significativas en el porcentaje de embriones con anomal\u00edas cromos\u00f3micas entre los grupos 0,2m; 0,3m y control (25%; 40%; y 37,9% respectivamente). Al analizar las anomal\u00edas presentes seg\u00fan cromosoma estudiado, el grupo 0,3m present\u00f3 una mayor incidencia de anomal\u00edas alcanzando valores estad\u00edsticamente significativos en el caso de los cromosomas n\u00famero 13,18 y 22. De la misma manera al analizar las anomal\u00edas concernientes a 4 o m\u00e1s copias de cada cromosoma, este mismo grupo present\u00f3 una mayor incidencia de dicha anomal\u00eda, siendo significativo en el caso del cromosoma 13. El menor di\u00e1metro medio de los ovocitos tras la congelaci\u00f3n se observ\u00f3 en le grupo 0,3m 111 \u00c2\u00b12,1\u00c2\u00b5m (p<0,05). Este valor fue de 123,3\u00c2\u00b12,1\u00c2\u00b5m para 0,2m y 132,4\u00c2\u00b14,7\u00c2\u00b5m para el control. El recuento de gr\u00e1nulos corticales por um lineal de oolema fue 0,26 \u00c2\u00b1 0,02; 0,45 \u00c2\u00b1 0,01 para los grupos 0,2m y 0,3m; siendo significativamente superior en el caso de los controles (0,80 \u00c2\u00b1 0,08; p<0,05). No se observaron alteraciones morfol\u00f3gicas en el estudio de ultraestructura de la zp, oolema, mitocondrias, rel y dem\u00e1s organelas. los marcadores de rel (pdi y calnexina) presentaron un patr\u00f3n de distribuci\u00f3n irregular en el espacio perivitelino, que no se observ\u00f3 en ning\u00fan caso en los controles. No se observaron diferencias significativas en la distribuci\u00f3n de los complejos huso mei\u00f3tico\/placa metaf\u00e1sica de morfolog\u00eda normal: 85,5%; 71,4%; 85,7%; 55,6% y 96,2% 0,2m c+; 0,2m c-; 0,3m c+ y 0, 3mc- y control respectivamente). conclusiones la deshidrataci\u00f3n m\u00e1s severa que ocurre con la congelaci\u00f3n lenta de ovocitos utilizando 0,3m de sacarosa se ve potenciada por la ausencia de las c\u00e9lulas del c\u00famulo, lo que mejora las tasas de supervivencia aunque produce efectos adversos en el potencial de desarrollo de estos ovocitos. Estos efectos se ven mas marcados en los casos en los que los ovocitos se congelaron con 0,3m de sacarosa en ausencia de las c\u00e9lulas del c\u00famulo.\n\n\n\n \n\n\n

Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00abEvaluacion de la calidad embrionaria de ovocitos criopreservados<\/strong>\u00ab<\/h3>\n
    \n
  • T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Evaluacion de la calidad embrionaria de ovocitos criopreservados <\/li>\n
  • Autor:<\/strong>\u00a0 Ana Cristina Cobo Cabal <\/li>\n
  • Universidad:<\/strong>\u00a0 Universitat de val\u00e9ncia (estudi general)<\/li>\n
  • Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 25\/06\/2008<\/li>\n<\/ul>\n

     <\/p>\n

    Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n
      \n
    • Director de la tesis<\/strong>\n
        \n
      • Jose Remohi Gimenez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n
      • Tribunal<\/strong>\n
          \n
        • Presidente del tribunal: lorenzo Abad Martinez <\/li>\n
        • Antonio Pellicer Martinez (vocal)<\/li>\n
        • roberto Matorras weinig (vocal)<\/li>\n
        • alfonso Herruzo nalda (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n

           <\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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