{"id":65886,"date":"2008-03-07T00:00:00","date_gmt":"2008-03-07T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/modelo-teorico-de-toxicidad-de-helicobacter-pylori-sobre-celulas-de-mucosa-gastrica\/"},"modified":"2008-03-07T00:00:00","modified_gmt":"2008-03-07T00:00:00","slug":"modelo-teorico-de-toxicidad-de-helicobacter-pylori-sobre-celulas-de-mucosa-gastrica","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/patologia\/modelo-teorico-de-toxicidad-de-helicobacter-pylori-sobre-celulas-de-mucosa-gastrica\/","title":{"rendered":"Modelo teorico de toxicidad de helicobacter pylori sobre celulas de mucosa gastrica"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Miryam Calvino Fernandez <\/strong><\/h2>\n<p>Introducci\u00f3n: la toxicidad por helicobacter pylori (hp) es la causa principal de gastritis y est\u00e1 fuertemente asociada con atrofia, ulceraci\u00f3n, malt y adenocarcinoma g\u00e1strico. La inducci\u00f3n de muerte celular programada juega un importante papel en la evoluci\u00f3n de estas patolog\u00edas, pero no est\u00e1 del  todo descrito el mecanismo por el que se desencadena. objetivos: establecer una hip\u00f3tesis fisiopatol\u00f3gica por la que hp da\u00f1a la mucosa g\u00e1strica. materiales y m\u00e9todos: se realizaron cocultivos de la l\u00ednea epitelial g\u00e1strica ags (atcc r crl-1739) con 3 cepas gen\u00e9ticamente diferentes de hp [atcc r 51932: caga-; vaca (s2\/m2); atcc r 700824: caga+; vaca (s1b\/m1); atcc r 51110: urease-; vaca (s1a\/m1)] los experimentos se llevaron a cabo durante 12, 24 y 48h con diferentes densidades bacterianas (desde 104 a 2x108ufc\/ml). Se suplemento con el antioxidante vite (10-4m) y se estudiaron: 1. Par\u00e1metros celulares y mitocondriales relacionados con estr\u00e9s oxidativo defensa antioxidante:  \tcontenido en glutation (marcaje con mbrb) \tcontenido en nadph (autofluorescencia celular en uv) radicales libres: \tan\u00e1lisis del burst oxidativo (marcaje con la sonda dcfh-da) \tcontenido mitocondrial en ani\u00f3n super\u00f3xido (sonda mitosox red) oxidaci\u00f3n de l\u00edpidos mitocondriales (marcaje con nao)  2. Par\u00e1metros estructurales y funcionales de mitocondrias \tpotencial de membrana mitocondrial (alpha m) (detecci\u00f3n con jc-1 y mitotrackers) \tpermeabilidad de transici\u00f3n mitocondrial por an\u00e1lisis de la apertura de los poros de transici\u00f3n (ptm) (experimentos        con calce\u00edna-am y cocl2) \tan\u00e1lisis de citocromo c (cit c) en fracciones subcelulares (citos\u00f3licas y mitocondriales) \tan\u00e1lisis del fenotipo de la red mitocondrial (visualizado con nao) \tcuantificaci\u00f3n del balance fisi\u00f3n\/fusi\u00f3n por an\u00e1lisis de expresi\u00f3n g\u00e9nica de dinaminas (drp-1) y mitofusinas (mfn-2)  3. Par\u00e1metros celulares y mitocondriales relacionados con apoptosis   \tan\u00e1lisis de la morfolog\u00eda nuclear (marcaje con ao y patr\u00f3n \u00abdna ladder\u00bb) \tevaluaci\u00f3n de la cascada de caspasas por an\u00e1lisis de la prote\u00edna caspasa-6, la expresi\u00f3n g\u00e9nica de caspasa-3 y la actividad de caspasa-2 \tcuantificaci\u00f3n de la expresi\u00f3n g\u00e9nica de genes pro- (bax, bid) y anti-apopt\u00f3ticos (bcl-2)  los an\u00e1lisis se llevaron a cabo por citometr\u00eda de flujo, microscop\u00eda confocal, western blot, pcr a tiempo real y elisa. resultados: se observ\u00f3 aumento de radicales libres y disminuci\u00f3n simult\u00e1nea de las defensas antioxidantes tanto a nivel celular como mitocondrial. Se cuantificaron niveles elevados de oxidaci\u00f3n de cardiolipina y se observ\u00f3 reestructuraci\u00f3n de la red mitocondrial desde un fenotipo tubular a un fenotipo fragmentado de mitocondrias aisladas y redondeadas, distribuidas principalmente en la zona perinuclear, con un balance fisi\u00f3n\/fusi\u00f3n incrementado. Las mitocondrias experimentaron adem\u00e1s p\u00e9rdida de m y apertura de los ptm. Los niveles de cit c se encontraron elevados en el citosol. Los niveles de caspasas y de genes proapopt\u00f3ticos estaban aumentados, pero disminu\u00eddo el de bcl-2; un porcentaje incrementado de c\u00e9lulas mostraron condensaci\u00f3n celular y cuerpos apopt\u00f3ticos. Todos los resultados fueron significativamente diferentes a los obtenidos en controles y en los experimentos con vite.  conclusiones: el estr\u00e9s oxidativo inducido por hp es el inicio de una cascada de alteraciones que conduce a las c\u00e9lulas g\u00e1stricas a una muerte apopt\u00f3tica v\u00eda mitocondrial. Las alteraciones son dependientes de la densidad y del tiempo de infecci\u00f3n, pero independientes de las prote\u00ednas ureasa y caga.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Modelo teorico de toxicidad de helicobacter pylori sobre celulas de mucosa gastrica<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Modelo teorico de toxicidad de helicobacter pylori sobre celulas de mucosa gastrica <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Miryam Calvino Fernandez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Alcal\u00e1<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 03\/07\/2008<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Trinidad Parra Cid<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal:  Pajares Garc\u00eda Jos\u00e9 Mar\u00eda <\/li>\n<li>gabriel de Arriba de la fuente (vocal)<\/li>\n<li>Luis Fernando Carballo alvarez (vocal)<\/li>\n<li>Francisco Javier Perez gisbert (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Miryam Calvino Fernandez Introducci\u00f3n: la toxicidad por helicobacter pylori (hp) es la causa principal de gastritis y 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