{"id":68110,"date":"2018-03-09T22:56:33","date_gmt":"2018-03-09T22:56:33","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/desarrollo-de-cepas-va%c2%adnicas-de-saccharomyces-cerevisiae-superproductoras-de-manoprotea%c2%adnas-mediante-tecnicas-de-dna-recombinante-y-su-aplicacion-en-enologa%c2%ada\/"},"modified":"2018-03-09T22:56:33","modified_gmt":"2018-03-09T22:56:33","slug":"desarrollo-de-cepas-va%c2%adnicas-de-saccharomyces-cerevisiae-superproductoras-de-manoprotea%c2%adnas-mediante-tecnicas-de-dna-recombinante-y-su-aplicacion-en-enologa%c2%ada","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/quimica-fisica\/desarrollo-de-cepas-va%c2%adnicas-de-saccharomyces-cerevisiae-superproductoras-de-manoprotea%c2%adnas-mediante-tecnicas-de-dna-recombinante-y-su-aplicacion-en-enologa%c2%ada\/","title":{"rendered":"Desarrollo de cepas v\u00ednicas de saccharomyces cerevisiae superproductoras de manoprote\u00ednas mediante t\u00e9cnicas de dna recombinante, y su aplicaci\u00f3n en enolog\u00eda."},"content":{"rendered":"

Tesis doctoral de Daniel Gonz\u00e1lez Ramos <\/strong><\/h2>\n

\u00edndice de contenidos i \u00edndice de figuras vii \u00edndice de tablas xiii abreviaturas xv \u00edndice de contenidos introducci\u00f3n 1. Caracter\u00edsticas generales de las levaduras 3 2. La pared celular de las levaduras 4 2.1. Estructura y s\u00edntesis de la pared celular. 5 2.1.1. P-1,3-glucano 6 2.1.2. Quitina 8 2.1.3. P-1,6-glucano 10 2.1.4. Manoprote\u00ednas 12 2.2. Regulaci\u00f3n de la composici\u00f3n y estructura de la pared celular 18 2.2.1. Factores ambientales y del crecimiento 18 2.2.2. Condiciones de estr\u00e9s 19 2.3. Mutantes de deleci\u00f3n en genes implicados en la s\u00edntesis o remodelaci\u00f3n de la pared 23 2.3.1. Genes implicados en la s\u00edntesis del p-l,3-glucano 24 2.3.2. Genes implicados en la regulaci\u00f3n de la s\u00edntesis de la pared 25 2.3.3. Genes implicados en la s\u00edntesis del anclaje gpi 26 2.3.4. Otros genes 27 3. Elaboraci\u00f3n del vino 28 4. Propiedades enol\u00f3gicas de las manoprote\u00ednas 30 4.1. Protecci\u00f3n frente a la quiebra proteica 31 4.2. Protecci\u00f3n frente a la precipitaci\u00f3n tart\u00e1rica 37 4.3. Otras propiedades 38 4.3.1. Adsorci\u00f3n de ocratoxina a 38 4.3.2. Retenci\u00f3n de substancias arom\u00e1ticas 38 4.3.3. Disminuci\u00f3n de la astringencia \u00c2\u00ab38 4.3.4. Estabilizaci\u00f3n del color 39 \u00edndice 4.3.5. Estimulaci\u00f3n del crecimiento de las bacterias l\u00e1cticas 39 4.3.6. Estabilizaci\u00f3n de la espuma en vinos espumosos 39 4.4. Enriquecimiento del vino en manoprote\u00ednas 40 5. Aplicaci\u00f3n de la ingenier\u00eda gen\u00e9tica a la mejora de las levaduras v\u00ednicas 41 5.1. Consideraciones generales 41 5.1.1. Sistemas de transformaci\u00f3n 42 5.1.2. Vectores para la clonaci\u00f3n de genes 43 5.1.3. Marcadores de selecci\u00f3n 44 5.2. Especificidades de las levaduras v\u00ednicas 44 5.3. Ejemplos de aplicaciones de mejora gen\u00e9tica de levaduras v\u00ednicas mediante ingenier\u00eda gen\u00e9tica 47 objetivos y plan de trabajo 51 materiales y m\u00e9todos 55 1. Cepas 57 1.1. Cepas de escherichia coli 57 1.2. Cepas de saccharomyces cerevisiae 57 1.2.1. Cepas haploides de laboratorio 57 1.2.2. Cepas diploides de laboratorio 58 1.2.3. Cepas v\u00ednicas 59 1.3. Otras cepas de levadura 59 2. Medios de cultivo 60 2.1. Medios de cultivo de levaduras 60 2.2. Medios de cultivo de bacterias 62 3. Soluciones 62 4. Cebadores 63 5. Vectores 65 6. Manipulaci\u00f3n y an\u00e1lisis de \u00e1cidos nucleicos 65 6.1. Aislamiento de dna gen\u00f3mico de s. Cerevisiae 65 6.2. Aislamiento de dna plasm\u00eddico de e. Coli 66 6.3. Electroforesis de dna en geles de agarosa 66 6.4. Digesti\u00f3n de dna 67 ii \u00edndice 6.5. Ligaci\u00f3n de fragmentos de dna 67 6.6. Amplificaci\u00f3n de fragmentos de dna mediante pcr 67 6.7. Clonaci\u00f3n de secuencias en pl\u00e1smidos mediante la t\u00e9cnica descrita por geiser et al. (2001) 68 6.8. Consfrucci\u00f3n de cassettes de deleci\u00f3n 69 7. M\u00e9todos de transformaci\u00f3n de microorganismos 75 7.1. Transformaci\u00f3n gen\u00e9tica de e. Coli por electroporaci\u00f3n 75 7.2. Transformaci\u00f3n gen\u00e9tica de 5. Cerevisiae 76 8. Deleci\u00f3n de genes en cepas v\u00ednicas de s. Cerevisiae 77 8.1. Transformaci\u00f3n 77 8.2. An\u00e1lisis de los transformantes 77 9. Medida de la liberaci\u00f3n de polisac\u00e1ridos 79 9.1. Condiciones de cultivo 79 9.2. Aislamiento de la fracci\u00f3n macromolecular presente en los sobrenadantes. …79 9.3. Cuantificaci\u00f3n de polisac\u00e1ridos totales. M\u00e9todo del fenol\/sulfi\u00edrico 80 10. Detecci\u00f3n de manoprote\u00ednas 81 10.1. Electroforesis de prote\u00ednas en sds-page 81 10.2. Electrotransferencia 81 10.3. Hibridaci\u00f3n con concanavalina-a marcada con peroxidasa 82 11. Estudios de fermentaci\u00f3n y de estabilidad proteica 82 11.1. Fermentaci\u00f3n de mostos sint\u00e9ticos y naturales 82 11.2. Determinaci\u00f3n del poder fermentativo. Cuantificaci\u00f3n de az\u00facares, etanol y glicerol en vino mediante hplc 83 11.3. Medida de la estabilidad proteica vinos sauvignon blanc 83 11.4. Determinaci\u00f3n de la concentraci\u00f3n m\u00ednima de bentonita para la estabilizaci\u00f3n proteica de vinos sauvignon blanc 83 12. Determinaci\u00f3n de resistencia a la toxina k9 84 13. Determinaci\u00f3n de fenotipo autol\u00edtico 84 resultados y discusi\u00f3n 87 1. Medida de la liberaci\u00f3n de polisac\u00e1ridos y manoprote\u00ednas en cepas de laboratorio 89 1.1. Puesta a punto del ensayo de liberaci\u00f3n de polisac\u00e1ridos y manoprote\u00ednas en condiciones de laboratorio 89 ih \u00edndice 1.2. Liberaci\u00f3n de polisac\u00e1ridos y manoprote\u00ednas por cepas haploides de laboratorio 91 1.2.1. Cepas con fondo gen\u00e9tico by4741 91 1.2.2. Cepas con fondo gen\u00e9tico fy1679-08a 93 1.2.3. Otros fondos gen\u00e9ticos 95 1.3. Liberaci\u00f3n de polisac\u00e1ridos y manoprote\u00ednas por cepas diploides de laboratorio 97 1.3.1. Cepas heterozigotas 98 1.3.2. Cepas homozigotas 99 1.4. Estudio de la estabilizaci\u00f3n proteica de las manoprote\u00ednas y polisac\u00e1ridos liberados por cepas de laboratorio 101 1.5. Discusi\u00f3n de los datos obtenidos con cepas de laboratorio 104 2. Construcci\u00f3n de cepas de levaduras v\u00ednicas delecionadas en los genes knr4, gpi7, fksl y gasl 106 2.1. Construcci\u00f3n de cepas delecionadas en knr4 107 2.2. Construcci\u00f3n de cepas delecionadas en gpi7 109 2.3. Construcci\u00f3n de cepas delecionadas en fksj 111 2.4. Construcci\u00f3n de cepas delecionadas en gasl 113 2.5. Discusi\u00f3n de la deleci\u00f3n de genes en cepas industriales 114 3. Caracterizaci\u00f3n de cepas industriales delecionadas en los genes knr4, gpi7, fksl y gasl 117 3.1. Estudio de la liberaci\u00f3n de manoprote\u00ednas y polisac\u00e1ridos en condiciones de laboratorio 117 3.2. Determinaci\u00f3n de la capacidad autol\u00edtica 119 3.3. Determinaci\u00f3n de la resistencia a la toxina k9 120 3.4. Estudio de la capacidad fermentativa de mostos naturales 122 3.4.1. Cepas delecionadas en knr4 124 3.4.2. Cepas delecionadas engpi? 127 3.4.3. Cepas delecionadas en fksl 130 3.4.4. Cepas delecionadas en gasl 131 3.4.5. Discusi\u00f3n de los resultados 134 3.5. Estabilidad proteica de los vinos naturales fermentados 136 3.5.1. Cepas delecionadas en knr4 136 iv \u00edndice 3.5.2. Cepas delecionadas en gpi7 139 3.5.3. Cepas delecionadas en fksl 141 3.5.4. Cepas delecionadas en gasl 142 3.5.5. Discusi\u00f3n de los resultados 143 3.6. Determinaci\u00f3n de la dosis m\u00ednima de bentonita necesaria para la estabilizaci\u00f3n de vinos naturales fermentados 144 3.6.1. Cepas delecionadas en knr4 144 3.6.1.L.Ekd-13 144 3.6.1.2.Tki>124 148 3.6.2. Cepas delecionadas en gpi7 151 3.6.2.1 .Egd-13 151 3.6.2.2.Tgd^13 153 3.6.3. Cepas delecionadas en fksl: efd-31 154 3.6.4. Cepas delecionadas en gasl: tgasd-13 156<\/p>\n

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Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00abDesarrollo de cepas v\u00ednicas de saccharomyces cerevisiae superproductoras de manoprote\u00ednas mediante t\u00e9cnicas de dna recombinante, y su aplicaci\u00f3n en enolog\u00eda.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n
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  • T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Desarrollo de cepas v\u00ednicas de saccharomyces cerevisiae superproductoras de manoprote\u00ednas mediante t\u00e9cnicas de dna recombinante, y su aplicaci\u00f3n en enolog\u00eda. <\/li>\n
  • Autor:<\/strong>\u00a0 Daniel Gonz\u00e1lez Ramos <\/li>\n
  • Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de Madrid<\/li>\n
  • Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 21\/11\/2008<\/li>\n<\/ul>\n

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    Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n
      \n
    • Director de la tesis<\/strong>\n
        \n
      • Ram\u00f3n Gonz\u00e1lez Garc\u00eda<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n
      • Tribunal<\/strong>\n
          \n
        • Presidente del tribunal: daniel Ram\u00f3n vidal <\/li>\n
        • ricardo Cordero otero (vocal)<\/li>\n
        • Antonio tom\u00e1s Palacios Garc\u00eda (vocal)<\/li>\n
        • amparo Querol sim\u00f3n (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n

           <\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

          Tesis doctoral de Daniel Gonz\u00e1lez Ramos \u00edndice de contenidos i \u00edndice de figuras vii \u00edndice de tablas xiii abreviaturas xv […]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[560],"tags":[40172,149670,149669,4495,11854,67899],"class_list":["post-68110","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-quimica-fisica","tag-amparo-querol-simon","tag-antonio-tomas-palacios-garcia","tag-daniel-gonzalez-ramos","tag-daniel-ramon-vidal","tag-ramon-gonzalez-garcia","tag-ricardo-cordero-otero"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/68110","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=68110"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/68110\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=68110"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=68110"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=68110"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}