{"id":71280,"date":"2018-03-09T23:15:55","date_gmt":"2018-03-09T23:15:55","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/diseno-produccion-y-evaluacion-de-un-virus-adenoasociado-que-expresa-interferon-alfa-para-el-tratamiento-de-la-hepatitis-cronica-b\/"},"modified":"2018-03-09T23:15:55","modified_gmt":"2018-03-09T23:15:55","slug":"diseno-produccion-y-evaluacion-de-un-virus-adenoasociado-que-expresa-interferon-alfa-para-el-tratamiento-de-la-hepatitis-cronica-b","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/evaluacion-de-farmacos\/diseno-produccion-y-evaluacion-de-un-virus-adenoasociado-que-expresa-interferon-alfa-para-el-tratamiento-de-la-hepatitis-cronica-b\/","title":{"rendered":"Dise\u00f1o produccion y evaluacion de un virus adenoasociado que expresa interferon alfa para el tratamiento de la hepatitis cronica b"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Pedro Berraondo L\u00f3pez <\/strong><\/h2>\n<p>El interfer\u00f3n alfa (infalfa) es una citoquina clave en la defensa frente a infecciones virales debido a su acci\u00f3n antiviral directa y a sus propiedades inmunomoduladoras. La prote\u00edna recombinante se emplea como un f\u00e1rmaco para el tratamiento de diversas enfermedades entre las que se encuentra la infecci\u00f3n cr\u00f3nica por el virus de la hepatitis b (vhb). Mas de 400 millones de personas est\u00e1n infectados cr\u00f3nicamente por este virus, aumentando en ellas el riesgo de desarrollar cirrosis y c\u00e1ncer de h\u00edgado. La eficacia del tratamiento de esta infecci\u00f3n con infalfa es del 33% y provoca importantes efectos adversos. Para aumentar la eficacia y minimizar los efectos adversos, se ha estudiado en este trabajo la posibilidad de producir el infalfa en el propio organismo. Para ello se ha empleado un virus adenoasociado recombinante (vaa) que expresa el interfer\u00f3n alfa cinco de la marmota (minfalfas). Se ha evaluado la liberaci\u00f3n de infalfa tras la inyecci\u00f3n del vaa en el h\u00edgado y tras la inyecci\u00f3n en el m\u00fasculo. El modelo animal utilizado para evaluar la liberaci\u00f3n de interfer\u00f3n, la eficacia antiviral y la seguridad de este tratamiento ha sido la marmota infectada cr\u00f3nicamente por el virus de la hepatitis de la marmota (vhm) ya que es el modelo animal que mejor reproduce la infecci\u00f3n cr\u00f3nica del vhb en humanos. Se comenz\u00f3 clonando y caracterizando la familia de los interferones alfa de la marmota, encontr\u00e1ndose que est\u00e1 formada por m\u00e1s de 16 secuencias. De entre ellas, se escogi\u00f3 el minfalfa5 por combinar gran actividad biol\u00f3gica y por ser el m\u00e1s expresado basalmente en el h\u00edgado. A continuaci\u00f3n, se produjeron dos virus adenoasociados recombinantes: uno con el gen de la luciferasa (vaa-luc) y otro con el gen del mlnfalfa5 (vaa-inf). Las producciones se hicieron mediante transfecci\u00f3n de c\u00e9lulas 293t usando como vector no viral la polietilenimina y los virus se purificaron mediante cromatograf\u00eda de afinidad en columnas de heparina. Se compararon tres v\u00edas de administraci\u00f3n de los vaa dirigidas al h\u00edgado: la intravenosa, la intraportal y la intrahep\u00e1tica. Para ello se inyectaron grupos de ratones balb\/c con el vaa-luc y se estudi\u00f3 la expresi\u00f3n a lo largo del tiempo. Tras la inyecci\u00f3n intravenosa, se infecta el h\u00edgado de forma homog\u00e9nea pero se observan grandes diferencias seg\u00fan el sexo. La inyecci\u00f3n intrahep\u00e1tica directa permite mayor expresi\u00f3n que la inyecci\u00f3n intravenosa, encontr\u00e1ndose pocas diferencias entre sexos, sin embargo, la expresi\u00f3n se localiza fundamentalmente en el l\u00f3bulo inyectado. Por ultimo, la inyecci\u00f3n intraportal combina altos niveles, gran distribuci\u00f3n en el h\u00edgado y pocas diferencias entre sexos siendo la v\u00eda de administraci\u00f3n elegida para la liberaci\u00f3n hep\u00e1tica de infalfa mediante el vaa-inf. Tras la inyecci\u00f3n intraportal del vaa-luc a marmotas, la luciferasa se expres\u00f3 en el h\u00edgado durante al menos seis meses. No se observ\u00f3 ninguna reacci\u00f3n adversa debido a la inyecci\u00f3n del vaa-luc en marmotas infectadas con el vhm, sugiriendo que la administraci\u00f3n de los vaa en pacientes con vhb es segura. La inyecci\u00f3n intramuscular del vaa-inf en marmotas cr\u00f3nicas provoc\u00f3 una expresi\u00f3n sostenida pero fluctuante de infalfa que se asoci\u00f3 a un efecto terap\u00e9utico tard\u00edo en tres de cinco marmotas. Por el contrario, la expresi\u00f3n de infalfa mediante este virus tras inyecci\u00f3n intraportal es eliminada en la mayor\u00eda de los animales a los dos meses de la inyecci\u00f3n obteni\u00e9ndose una eficacia antiviral limitada. Los resultados obtenidos permiten dise\u00f1ar nuevos pasos para la aplicaci\u00f3n de esta estrategia en humanos. Por una parte, es necesario incluir promotores inducibles que permitan suspender o regular la producci\u00f3n de infalfa en caso de que se presenten efectos adversos graves. Por otra parte, el uso de otros serotipos de vaa permitir\u00e1 aumentar los niveles de infalfa obtenidos por la v\u00eda intramuscular o mantener niveles elevados de infalfa en el h\u00edgado mediante inyecciones sucesivas de distintos serotipos de vaa por v\u00eda intraportal.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Dise\u00f1o produccion y evaluacion de un virus adenoasociado que expresa interferon alfa para el tratamiento de la hepatitis cronica b<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Dise\u00f1o produccion y evaluacion de un virus adenoasociado que expresa interferon alfa para el tratamiento de la hepatitis cronica b <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Pedro Berraondo L\u00f3pez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Navarra<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 17\/11\/2004<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Gloria Gonzalez Aseguinolaza<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jes\u00fas m. Prieto valtue\u00f1a <\/li>\n<li>Mar\u00eda no Esteban rodriguez (vocal)<\/li>\n<li>xavier Forns bernhardt (vocal)<\/li>\n<li>Miguel Chillon rodriguez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Pedro Berraondo L\u00f3pez El interfer\u00f3n alfa (infalfa) es una citoquina clave en la defensa frente a infecciones [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[2445,4578,20868,17749,3030],"tags":[127844,15059,23995,53778,155380,155381],"class_list":["post-71280","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-evaluacion-de-farmacos","category-ingenieria-genetica","category-inmunologia-veterinaria","category-navarra","category-virologia-veterinaria","tag-gloria-gonzalez-aseguinolaza","tag-jesus-m-prieto-valtuena","tag-maria-no-esteban-rodriguez","tag-miguel-chillon-rodriguez","tag-pedro-berraondo-lopez","tag-xavier-forns-bernhardt"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/71280","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=71280"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/71280\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=71280"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=71280"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=71280"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}