{"id":85111,"date":"2018-03-10T00:09:33","date_gmt":"2018-03-10T00:09:33","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/clonacion-de-genes-de-citocromo-p4501a1-y-metalotioneina-de-peces-y-su-uso-como-biomarcadores-de-contaminacion-ambiental\/"},"modified":"2018-03-10T00:09:33","modified_gmt":"2018-03-10T00:09:33","slug":"clonacion-de-genes-de-citocromo-p4501a1-y-metalotioneina-de-peces-y-su-uso-como-biomarcadores-de-contaminacion-ambiental","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-medicas\/clonacion-de-genes-de-citocromo-p4501a1-y-metalotioneina-de-peces-y-su-uso-como-biomarcadores-de-contaminacion-ambiental\/","title":{"rendered":"Clonacion de genes de citocromo p4501a1 y metalotioneina de peces y su uso  como biomarcadores de contaminacion ambiental"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Mercedes Cousinou Rodriguez <\/strong><\/h2>\n<p>La biotransformaci\u00f3n de diversos xenobi\u00f3ticos presentes en los ecosistemas marinos est\u00e1 catalizada por enzimas inducibles. Esta respuesta permite su uso como biomarcadores tempranos  de contaminaci\u00f3n ambiental. Este estudio se ha centrado en el citocromo p4501a ( cyp1a) como respuesta de fase i frente a xenobi\u00f3ticos org\u00e1nicos y en la metalotione\u00edna (mt) que refleja la contaminaci\u00f3n por metales pesados. La alta homolog\u00eda existente entre las secuencias de ambos genes en diferentes  especies de peces, permiti\u00f3 dise\u00f1ar oligos degenerados para amplificar por pcr secuencias de cfna de cyp1a y mt en dos especies de peces; sparus  aurata ( dorada) y linza aurata (lisa). La obtenci\u00f3n de fragmentos de cfna espec\u00edficos de ambos genes por rt-pcr y susecuenciaci\u00f3n, permiti\u00f3 el dise\u00f1o de oligo espec\u00edficos para conseguir  por race-pcr cdnas completos que han sido clonados y secuenciados.  a partir de estas secuencias  se dise\u00f1aron nuevos oligos espec\u00edficos que permitieron amplificar fragmentos de 149pb y 163 pb respectivamente en mt y cyp1a.Los  niveles de los correspondientes mrnas se han medido por transcripci\u00f3n inversa acoplada a pcr (rt-pcr), seguida de separaci\u00f3n por tama\u00f1o de los amplicones en un secuenciador de dna y su cuantificaci\u00f3n con el software \u00abgenescan\u00bb. Se han construido patrones internos, con 6pb m\u00e1s en los cdnas correspondientes, que permiten su cuantificaci\u00f3n por pcr competitiva. Esta metodolog\u00eda se ha validado por exposici\u00f3n a contaminaci\u00f3n modelo, b-naftflavona y cdc12. Como referencia, se ha utilizado la actividad erod,elisa y \u00abwestern\u00bb, activaci\u00f3n de 2-aa o determinaci\u00f3n de metalotione\u00ednna.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Clonacion de genes de citocromo p4501a1 y metalotioneina de peces y su uso  como biomarcadores de contaminacion ambiental<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Clonacion de genes de citocromo p4501a1 y metalotioneina de peces y su uso  como biomarcadores de contaminacion ambiental <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Mercedes Cousinou Rodriguez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 C\u00f3rdoba<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 19\/06\/2000<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan Lopez Barea<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: manuel Tena aldave <\/li>\n<li>Mar\u00eda  del carmen Sarasquete reiriz (vocal)<\/li>\n<li>Antonio Rodero franganillo (vocal)<\/li>\n<li>Juli\u00e1n Blasco moreno (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Mercedes Cousinou Rodriguez La biotransformaci\u00f3n de diversos xenobi\u00f3ticos presentes en los ecosistemas marinos est\u00e1 catalizada por enzimas 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