{"id":88890,"date":"2018-03-10T00:13:59","date_gmt":"2018-03-10T00:13:59","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/purificacion-y-caracterizacion-cinetica-de-oxidasas-de-aerococcus-viridans-implicadas-en-el-metabolismo-del-glicerol\/"},"modified":"2018-03-10T00:13:59","modified_gmt":"2018-03-10T00:13:59","slug":"purificacion-y-caracterizacion-cinetica-de-oxidasas-de-aerococcus-viridans-implicadas-en-el-metabolismo-del-glicerol","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/quimica\/purificacion-y-caracterizacion-cinetica-de-oxidasas-de-aerococcus-viridans-implicadas-en-el-metabolismo-del-glicerol\/","title":{"rendered":"Purificacion y caracterizacion cinetica de oxidasas de aerococcus viridans implicadas en el metabolismo del glicerol."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Ariel Streitenberger Sergio <\/strong><\/h2>\n<p>El crecimiento de un microorganismo como aerococcus viridans con glicerol como \u00fanica fuente de carbono, induce la s\u00edntesis de las enzimas glicerol fosfato oxidasa y lactato oxidasa. Cuando hay altos niveles de estas enzimas, el glicerol es r\u00e1pidamente convertido a fosfato de dihidroxiacetona. Este \u00faltimo activa la ruta de s\u00edntesis de metilglioxal y genera f\u00f3sforo inorg\u00e1nico.  el objetivo general de este trabajo es purificar las enzimas lactato oxidasa y glicerol fosfato oxidasa para proceder posteriormente a su caracterizaci\u00f3n cin\u00e9tica y estudio. Para lo cual se optimizaron las condiciones de crecimiento de microorganismo para la m\u00e1xima producci\u00f3n enzim\u00e1tica, se desarrollo un sistema de purificaci\u00f3n para ambas enzimas y se realizo la coinmobilizaci\u00f3n de laenzima glicerol fosfato oxidasa y de aerococcus viridans con catalasa para la producci\u00f3n de fosfato de dihidroxiacetona. La enzima lactato oxidasa fue purificada con una primera digesti\u00f3n con lisozima y triton x-114, una posterior clarificaci\u00f3n con ctab, una precipitaci\u00f3n con sulfato am\u00f3nico y finalmente una columna de intercambio i\u00f3nico. El grado de purificaci\u00f3n obtenido fue de 32 veces, con una recuperaci\u00f3n el 60% de la actividad enzim\u00e1tica y una actividad espec\u00edfica de 114.5 ue\/mg proteina.La enzima purificada presento un aperente peso molecular de 48000 en condiciones disociantes en un gel de policacrilamida y el peso molecular de la enzima en su forma nativa, estimado por filtraci\u00f3n en gel, de policacrilamida y el peso molecular de la enzima en su forma nativa, estimado por filtraci\u00f3n en gel, fue de 187000 encontr\u00e1ndose en forma tetram\u00e9rica. En cuanto a los inhibidores utilizados, se desarrollo un detallado estudio cin\u00e9tico de cibacron blue 3ga, que presento un tipo de inhibici\u00f3n dependiente del tiempo y ph. Luego de la obtenci\u00f3n de la apoenzima de lactato oxidasa, esta se recuper\u00f3 totalmente con la adici\u00f3n de fmn o fad, observ\u00e1ndose una afinidad 51 v<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Purificacion y caracterizacion cinetica de oxidasas de aerococcus viridans implicadas en el metabolismo del glicerol.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Purificacion y caracterizacion cinetica de oxidasas de aerococcus viridans implicadas en el metabolismo del glicerol. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Ariel Streitenberger Sergio <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Murcia<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 16\/02\/2001<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Francisco Garc\u00eda Carmona<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal:  Lopez roca Jos\u00e9 Mar\u00eda <\/li>\n<li>Jos\u00e9 \u00e1lvaro Cebri\u00e1n p\u00e9rez (vocal)<\/li>\n<li>estenio Sansinanea aldo (vocal)<\/li>\n<li>Juan a mercedes Cabanes cos (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Ariel Streitenberger Sergio El crecimiento de un microorganismo como aerococcus viridans con glicerol como \u00fanica fuente de 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