{"id":89286,"date":"2018-03-10T00:14:24","date_gmt":"2018-03-10T00:14:24","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-de-lipi-2-una-nueva-isla-de-patogenicidad-de-listeria\/"},"modified":"2018-03-10T00:14:24","modified_gmt":"2018-03-10T00:14:24","slug":"caracterizacion-de-lipi-2-una-nueva-isla-de-patogenicidad-de-listeria","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-de-la-vida\/caracterizacion-de-lipi-2-una-nueva-isla-de-patogenicidad-de-listeria\/","title":{"rendered":"Caracterizacion de lipi-2, una nueva isla de patogenicidad de listeria"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Gustavo Dominguez Bernal <\/strong><\/h2>\n<p>El g\u00e9nero listeria contiene dos especies pat\u00f3genas, l. Monocytogenes y l. Ivanovii. A diferencia de l. Monocytogenes, l. Ivanovii presenta, junto a otras caracter\u00edsticas patog\u00e9nicas diferenciales, un marcado tropismo de hospedador hacia los rumiantes en este trabajo de tesis, partiendo de unos mutantes espont\u00e1neos de l. Ivanovii afectados en la producci\u00f3n de dos factores de virulencia (una esfingomielinasa y una internalina secretada), hemos identificado y caracterizado una nueva isla de patogenicidad (pai) de histeria. Se trata de lipi-2, una regi\u00f3n cromos\u00f3mica espec\u00edfica de l. Ivanovii, que comprende el gen de la esfingomielinasa (smch), diez miembros de la familia multig\u00e9nica de las internalinas y una orf de funci\u00f3n desconocida. Lipi-2 cumple la mayor\u00eda de los criterios que definen habitualmente a las pais: (i) gran tama\u00f1o (22 kb), (ii) presencia exclusiva en una especie que representa una patovariedad dentro del g\u00e9nero histeria, composici\u00f3n de dna significativamente distinta a la del resto del genoma, (iii) punto de inserci\u00f3n asociado con un locus trna, y (iv) inestabilidad gen\u00e9tica. Lipi-2 es la primera pai identificada en bacterias gram-positivas para la que se demuestra inestabilidad gen\u00e9tica y asociaci\u00f3n con un locus trna, una estructura normalmente utilizada como punto de inserci\u00f3n de elementos gen\u00e9ticos m\u00f3viles tales como fagos o pl\u00e1smidos integrativos. El locus donde se encuentra el gen trna afectado por lipi-2, enmarcado por los loci ysnb tydel, no alberga m\u00e1s que una orf en l. Monocytogenes egde. El an\u00e1lisis de la secuencia de dicha regi\u00f3n interg\u00e9nica en otras cepas y especies del g\u00e9nero sugiere que dicho locus constituye un \u00abpunto caliente\u00bb de variabilidad gen\u00e9tica que permite la inserci\u00f3n de distintos fragmentos de dna. La inestabilidad gen\u00e9tica de lipi-2 se manifiesta dando lugar a una deleci\u00f3n espec\u00edfica y reproducible que afecta a una porci\u00f3n de la isla as\u00ed como a un fragmento de la regi\u00f3n cromos\u00f3mica adyacente. La deleci\u00f3n va acompa\u00f1ada de una p\u00e9rdida de virulencia en el modelo murino y en el hospedador natural de l. Ivanovii, la oveja. En este animal, la deleci\u00f3n de lipi-2 est\u00e1 aparentemente asociada a un cambio en el tropismo tisular. De las diez internalinas codificadas en lipi-2, ocho son del subgrupo s-inl, caracterizado por su peque\u00f1o tama\u00f1o, su estricta dependencia expresional de prfa y su car\u00e1cter soluble. Las otras dos internalinas pertenecen al subgrupo l-inl, de mayor tama\u00f1o, con dominios de anclaje a la pared bacteriana, de expresi\u00f3n independiente de prfa (o s\u00f3lo parcialmente controlada), y abundantes en l. Monocytogenes. Estas dos internalinas constituyen los primeros representantes de esta clase identificadas en l. Ivanovii. Lipi-2 est\u00e1 presente con la misma estructura gen\u00e9tica en todas las cepas de l. Ivanovii analizadas lo que refleja sin duda la importancia de este locus cromos\u00f3mico para la biolog\u00eda de l. Ivanovii. Esta pai est\u00e1 tambi\u00e9n insertada, en el mismo locus cromos\u00f3mico, en la subespecie londoniensis, indicando que fue adquirida en un momento lejano en el tiempo, antes de la diversificaci\u00f3n de l. Ivanovii en las dos subramas evolutivas que la componen. La adquisici\u00f3n y posterior evoluci\u00f3n de lipi-2 ha jugado probablemente un importante papel en la definici\u00f3n de la especie l. Ivanovii as\u00ed como en el desarrollo de su especificidad patog\u00e9nica. junto a los mutantes espont\u00e1neos de deleci\u00f3n de lipi-2, hemos identificado en este trabajo otros tres mutantes estables de fenotipo d\u00e9bilmente hemol\u00edtico. Dos de ellos presentan defectos gen\u00e9ticos en el gen prfa, que codifica el regulador central de la virulencia de histeria (prfa). Uno de los mutantes resulta de la deleci\u00f3n en fase de un fragmento central del gen prfa, dando lugar a una prote\u00edna afuncional por p\u00e9rdida del dominio de uni\u00f3n al dna. El otro imitante presenta una mutaci\u00f3n puntual que rompe la fase de lectura, dando lugar a una prote\u00edna prfa truncada que mantiene cierta actividad residual. El an\u00e1lisis de este imitante revela la importancia del dominio c-terminal de cremalleras de leucina en la funci\u00f3n transcripcional de prfa. El tercer mutante obedece a un defecto gen\u00e9tico desconocido, presumiblemente afectando a un locus que controla la expresi\u00f3n de al menos smch y la internalina i-inle. Todas estas mutaciones fueron obtenidas sometiendo a l. Ivanovii a condiciones de estr\u00e9s asociadas con estancias prolongadas a elevada temperatura y\/o fase estacionaria, reflejando el car\u00e1cter dispensable de los genes de virulencia cuando la bacteria crece in vitro en el laboratorio.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizacion de lipi-2, una nueva isla de patogenicidad de listeria<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizacion de lipi-2, una nueva isla de patogenicidad de listeria <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Gustavo Dominguez Bernal <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 13\/03\/2001<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Jos\u00e9 Antonio Vazquez  Boland<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: guillermo Suarez fernandez <\/li>\n<li>Jos\u00e9 Berenguer Carlos (vocal)<\/li>\n<li>j\u00ed\u00bcrgen Kreft (vocal)<\/li>\n<li>ignacio Lopez go\u00f1i (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Gustavo Dominguez Bernal El g\u00e9nero listeria contiene dos especies pat\u00f3genas, l. 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