{"id":90794,"date":"2018-03-11T10:09:23","date_gmt":"2018-03-11T10:09:23","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/new-insights-into-boar-sperm-functional-and-survival-from-integrated-laboratory-and-field-studies\/"},"modified":"2018-03-11T10:09:23","modified_gmt":"2018-03-11T10:09:23","slug":"new-insights-into-boar-sperm-functional-and-survival-from-integrated-laboratory-and-field-studies","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/biologia-celular\/new-insights-into-boar-sperm-functional-and-survival-from-integrated-laboratory-and-field-studies\/","title":{"rendered":"New insights into boar sperm functional and survival from integrated laboratory and field studies"},"content":{"rendered":"

Tesis doctoral de Marc Yeste Oliveras <\/strong><\/h2>\n

La adici\u00f3n de distintas sustancias en las dosis seminales se ha descrito como estrategia para la mejora de la calidad esperm\u00e1tica en refrigeraci\u00f3n y en congelaci\u00f3n. La prostaglandina f2\u00c2\u00bf (pgf2\u00c2\u00bf) es una hormona que se ha utilizado para aumentar el rendimiento reproductivo en porcino. Por ello, el presente estudio ha determinado, mediante los an\u00e1lisis de viabilidad, motilidad, morfolog\u00eda y aglutinaci\u00f3n esperm\u00e1ticas, as\u00ed como de la integridad de la vaina mitocondrial y del acrosoma y de la resistencia osm\u00f3tica de los espermatozoides, que la adici\u00f3n de la pgf2\u00c2\u00bf en un rango de concentraciones de 2,5 a 10 mg\/100 ml no produce da\u00f1o alguno sobre la calidad esperm\u00e1tica del semen refrigerado a 15\u00c2\u00bac. Adem\u00e1s, parece que la adici\u00f3n de esta hormona a una concentraci\u00f3n de 5 mg\/100 ml mantiene la viabilidad esperm\u00e1tica en mejores condiciones que el resto de tratamientos. Aparte de los efectos de la pgf2\u00c2\u00bf, en el presente estudio se ha determinado que el \u00e1cido hialur\u00f3nico en concentraciones de 50 y 100 \u00c2\u00b5g\u00c2\u00bfml-1 retrasa la capacitaci\u00f3n esperm\u00e1tica en refrigeraci\u00f3n a corto plazo (hasta tres d\u00edas), sin que se vean, por ello, afectados los dem\u00e1s par\u00e1metros esperm\u00e1ticos analizados. Este retraso es m\u00e1s evidente, a\u00fan, cuando se compara con el comportamiento de los espermatozoides despu\u00e9s de la adici\u00f3n de cafe\u00edna. As\u00ed, la pgf2\u00c2\u00bf y el \u00e1cido hialur\u00f3nico pueden ser a\u00f1adidos a las dosis seminales refrigeradas y destinadas a inseminaci\u00f3n artificial en determinadas concentraciones, sin que se produzcan da\u00f1os en la calidad esperm\u00e1tica, y adem\u00e1s \u00e9ste \u00faltimo retrasa la capacitaci\u00f3n de los espermatozoides despu\u00e9s de dos d\u00edas de conservaci\u00f3n a 15\u00c2\u00bac dado que se han desarrollado un elevado n\u00famero de trabajos con el objetivo de predecir la capacidad fecundante de un eyaculado, el presente estudio ha evaluado, tambi\u00e9n, el efecto de los cambios en la osmolalidad del medio (de 100 a 4000 mosm\u00c2\u00bfkg-1) sobre los espermatozoides de verraco. En este sentido, se ha observado que dichos cambios producen graves da\u00f1os en los par\u00e1metros esperm\u00e1ticos funcionales, especialmente en las condiciones de estr\u00e9s osm\u00f3tico m\u00e1s extremas. Adem\u00e1s, la tolerancia de los espermatozoides a estos cambios ha sido utilizada tambi\u00e9n como un par\u00e1metro funcional y se ha demostrado que, en algunos casos, dicha tolerancia se halla correlacionada con las pruebas de fertilidad y prolificidad in vivo ensayadas, respectivamente, mediante la tasa de no retorno al estro dentro de la 60 d\u00edas posteriores a las primeras inseminaciones (nrr60d) y el tama\u00f1o de la camada (ls), y que puede ser aun incluida en modelos de regresi\u00f3n lineal m\u00faltiple. Con todo, la resistencia osm\u00f3tica de los espermatozoides a los cambios de osmolalidad del medio (definida como el cuociente del tratamiento y el control negativo) est\u00e1 mejor correlacionada con las nrr60d y los ls y presenta mayores coeficientes de determinaci\u00f3n (r2) en tres de los tratamientos ensayados (hipot\u00f3nico a 150 mosm\u00c2\u00bfkg-1 y sin retorno a las condiciones isot\u00f3nicas, hipot\u00f3nico a 200 mosm\u00c2\u00bfkg-1 y con retorno, e hipert\u00f3nico con citrato s\u00f3dico a 500 mosm\u00c2\u00bfkg-1 y sin retorno a la soluci\u00f3n isot\u00f3nica). las c\u00e9lulas epiteliales del oviducto (oecs) afectan a los par\u00e1metros celulares esperm\u00e1ticos como consecuencia del contacto directo entre ambos tipos celulares y de la actividad secretora de estas c\u00e9lulas som\u00e1ticas, tal y como se ha observado en este estudio. En realidad, en el cuarto cap\u00edtulo se han investigado los efectos del cocultivo hom\u00f3logo con c\u00e9lulas oviductales sobre los par\u00e1metros funcionales de los espermatozoides, las diferencias en la expresi\u00f3n de algunos genes entre las fases folicular y luteal de dichas c\u00e9lulas, los efectos de la presencia de espermatozoides sobre la expresi\u00f3n de estos mismos genes en las c\u00e9lulas oviductales despu\u00e9s de cocultivo in vitro, y los efectos que produce sobre la viabilidad esperm\u00e1tica el silenciamiento del gen que codifica para la prote\u00edna de choque t\u00e9rmico alfa a.1 de 90 kda (hsp90aa1). como se ha demostrado, el cocultivo con c\u00e9lulas epiteliales del oviducto mantiene la motilidad y la viabilidad esperm\u00e1ticas, especialmente en aquellas poblaciones de espermatozoides que se hallan unidas a estas c\u00e9lulas epiteliales, e induce la capacitaci\u00f3n esperm\u00e1tica. Los efectos de estas c\u00e9lulas oviductales se observan tambi\u00e9n despu\u00e9s de incubar los espermatozoides con el medio condicionado por dichas c\u00e9lulas, aunque no en la misma medida que el cocultivo. Ello sugiere, en fin, que el contacto directo de los espermatozoides con las c\u00e9lulas epiteliales del oviducto es necesario para la prolongaci\u00f3n de la viabilidad esperm\u00e1tica en porcino, de acuerdo con la formaci\u00f3n del reservorio seminal in vivo. por otra parte, no se observan diferencias significativas entre la fase folicular y la fase luteal de las c\u00e9lulas epiteliales del oviducto cuando se analiza la expresi\u00f3n de cuatro genes relevantes (clusterina, hsp90aa1, hspa8 y hspa5), los productos proteicos de los cu\u00e1les fueron previamente identificados en una fracci\u00f3n soluble de 70 kda, preparada a partir de las membranas plasm\u00e1tica apicales de dichas c\u00e9lulas. Adem\u00e1s, la presencia de espermatozoides sobreexpresa los genes hsp90aa1, hspa8 y hspa5, todos ellos pertenecientes al grupo de genes que codifican para las prote\u00ednas de choque t\u00e9rmico, sin afectar la expresi\u00f3n del gen que codifica para la clusterina, de modo que ello sugiere que dichas prote\u00ednas juegan alg\u00fan papel en los procesos reproductivos que tienen lugar al oviducto. finalmente, de entre estas prote\u00ednas, se han estudiado los efectos del silenciamento del gen hsp90aa1 en el mantenimiento de la viabilidad esperm\u00e1tica mediante las t\u00e9cnicas de la interferencia del rna y del cocultivo in vitro. Despu\u00e9s de transferir las mol\u00e9culas cortas y de cadena doble de rna (sirna) necesarias para inducir este mecanismo, mediante la electroporaci\u00f3n in vitro (puesto que la transfecci\u00f3n no es efectiva en el cultivo primario de c\u00e9lulas oviductales), no se han observado cambios en la viabilidad esperm\u00e1tica comparando las c\u00e9lulas que tienen el gen hsp90aa1 silenciado de las que no lo tienen. Este resultado permite concluir que la hsp90aa1 no prolonga la viabilidad esperm\u00e1tica. A pesar de ello, otros trabajos han sugerido que esta prote\u00edna juega alg\u00fan papel en la capacitaci\u00f3n esperm\u00e1tica, de modo que en estudios futuros se podr\u00eda tener en cuenta dicho aspecto y ensayar los efectos del silenciamiento sobre este par\u00e1metro funcional.<\/p>\n

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Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00abNew insights into boar sperm functional and survival from integrated laboratory and field studies<\/strong>\u00ab<\/h3>\n
    \n
  • T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 New insights into boar sperm functional and survival from integrated laboratory and field studies <\/li>\n
  • Autor:<\/strong>\u00a0 Marc Yeste Oliveras <\/li>\n
  • Universidad:<\/strong>\u00a0 Girona<\/li>\n
  • Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 17\/12\/2008<\/li>\n<\/ul>\n

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    Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n
      \n
    • Director de la tesis<\/strong>\n
        \n
      • Sergi Bonet Marull<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n
      • Tribunal<\/strong>\n
          \n
        • Presidente del tribunal: merce Durfort coll <\/li>\n
        • fulvio Gandolfi (vocal)<\/li>\n
        • paul f Watson (vocal)<\/li>\n
        • roberto Gualtieri (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n

           <\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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