{"id":91355,"date":"2018-03-11T10:10:02","date_gmt":"2018-03-11T10:10:02","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/inmovilizacion-covalente-y-orientada-de-enzima-lacasa-para-su-uso-como-biocatodo-en-pilas-de-combustible\/"},"modified":"2018-03-11T10:10:02","modified_gmt":"2018-03-11T10:10:02","slug":"inmovilizacion-covalente-y-orientada-de-enzima-lacasa-para-su-uso-como-biocatodo-en-pilas-de-combustible","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/quimica\/inmovilizacion-covalente-y-orientada-de-enzima-lacasa-para-su-uso-como-biocatodo-en-pilas-de-combustible\/","title":{"rendered":"Inmovilizaci\u00f3n covalente y orientada de enzima lacasa para su uso como bioc\u00e1todo en pilas de combustible"},"content":{"rendered":"

Tesis doctoral de Cristina Vaz Dominguez <\/strong><\/h2>\n

\u00edndice 1-. Introducci\u00f3n 1 1.1. Biopilas de combustible 3 1.2. Inmovilizaci\u00f3n de enzimas en superficies 6 1.3. Funcionalizaci\u00f3n de superficies 9 1.3.1. Superficies met\u00e1licas 9 1.3.2. Superficies de carb\u00f3n 11 1.4. Lacasas 13 1.4.1. Caracter\u00edsticas generales 14 1.4.2. Estructura 14 1.4.3. Centros de cobre 16 1.4.4. Potencial redox del centro t1 17 1.4.5. Propiedades catal\u00edticas 18 1.4.6. Sustratos 20 1.4.7. Inhibidores 21 1.4.8. Transferencia electr\u00f3nica lacasa-electrodo 22 1.4.9. Abts como mediador 23 1.4.10. Trametes hirsuta 24 1.5. Cin\u00e9tica enzim\u00e1tica 25 – i – 2-. Objetivos 29 3-. Materiales y m\u00e9todos 33 3.1. Materiales 35 3.1.1. Enzima lacasa 35 3.1.2. Reactivos 35 3.1.3. Disoluciones 36 3.1.4. Instrumentaci\u00f3n anal\u00edtica 37 3.1.5. Material electroqu\u00edmico 38 3.1.5.1. Electrodos 38 3.1.5.1. Celdas electroqu\u00edmicas 39 3.1.6. Otros aparatos 39 3.2. M\u00e9todos 39 3.2.1. Caracterizaci\u00f3n de las enzimas 39 3.2.1.1. Medida de la concentraci\u00f3n de enzima 39 3.2.1.2. Medida de la actividad enzim\u00e1tica 40 3.2.1.3. C\u00e1lculo de las constantes cin\u00e9ticas 41 3.2.2. Pretratamiento de los electrodos 42 3.2.3. Caracterizaci\u00f3n electroqu\u00edmica de los electrodos base 42 3.2.3.1. \u00e1rea electroqu\u00edmica 43 3.2.3.2. \u00e1rea microsc\u00f3pica 43 – ii – 3.2.4. Distribuci\u00f3n del tama\u00f1o de poro 45 3.2.5. Funcionalizaci\u00f3n de los electrodos de oro 46 3.2.6. Funcionalizaci\u00f3n de los electrodos de carbono 47 3.2.6.1. Monocapa aminofenilos 47 3.2.6.2. Monocapa aminofenoles 47 3.2.7. Inmovilizaci\u00f3n de enzima lacasa en el electrodo 48 3.2.7.1. Adsorci\u00f3n f\u00edsica 48 3.2.7.2. Inmovilizaci\u00f3n covalente 48 3.2.8. Medidas electroqu\u00edmicas 49 3.2.8.1. Electrodos funcionalizados con lacasa 49 3.2.8.2. Biopila de combustible 50 3.2.9. Detecci\u00f3n de agua oxigenada 51 4-. Resultados y discusi\u00f3n 53 4.1. Caracterizaci\u00f3n de la lacasa trametes hirsuta 55 4.1.1. C\u00e1lculo de la concentraci\u00f3n de enzima 55 4.1.2. C\u00e1lculo de la actividad enzim\u00e1tica 56 4.1.3. C\u00e1lculo de las constantes cin\u00e9ticas respecto al o2 57 4.2. Electrodos de carbono 62 4.2.1. Caracterizaci\u00f3n de los electrodos base 62 – iii – 4.2.1.1. Caracterizaci\u00f3n electroqu\u00edmica 62 4.2.1.2. Distribuci\u00f3n porosa 63 4.2.2. Funcionalizaci\u00f3n de los electrodos de carbono 66 4.2.2.1. Recubrimiento de las superficies con una monocapa de 4-aminofenilos 66 4.2.2.1.1. Formaci\u00f3n de la monocapa 66 4.2.2.1.2. Caracter\u00edsticas de la monocapa de aminofenilos covalentemente unida a las distintas superficies de carbono 68 4.2.2.2. Recubrimiento de las superficies con una monocapa de orto-aminofenoles 69 4.2.2.2.1. Formaci\u00f3n de la monocapa 69 4.2.2.2.2. Optimizaci\u00f3n de la formaci\u00f3n 72 4.2.2.2.3. Caracter\u00edsticas de la monocapa de aminofenoles covalentemente unida a las distintas superficies de carbono 76 4.2.3. Medida de la actividad electrocatal\u00edtica del enzima trametes hirsuta 79 4.2.3.1. Efecto del ph 79 4.2.3.2. Efecto de la temperatura 82 4.2.3.3. Efecto del potencial redox 83 – iv – 4.2.4. Optimizaci\u00f3n de las condiciones de inmovilizaci\u00f3n de la lacasa mediante enlace amida sobre electrodos de carbono funcionalizados 84 4.2.4.1. Uni\u00f3n covalente a electrodos modificados con una monocapa de aminofenilos\/hidroxilaminos 85 4.2.4.1.1. Efecto de la fuerza i\u00f3nica 85 4.2.4.1.2. Efecto de la cantidad de enzima 86 4.2.4.1.3. Efecto del ph 87 4.2.4.1.4. Estudio simult\u00e1neo de la influencia del ph y la cantidad de enzima durante la inmovilizaci\u00f3n mediante metodolog\u00eda del dise\u00f1o de experimentos 89 4.2.4.2. Uni\u00f3n covalente a electrodos modificados con una monocapa de aminofenoles 93 4.2.4.2.1. Estudio simult\u00e1neo de la influencia del ph y la cantidad de enzima durante la inmovilizaci\u00f3n mediante metodolog\u00eda del dise\u00f1o de experimentos 93 4.2.5. Propiedades electrocatal\u00edticas de la lacasa de trametes hirsuta inmovilizada covalentemente en electrodos de carbono mediante enlace amida 96 4.2.5.1. Experimentos control 96 4.2.5.2. Reducci\u00f3n electroenzim\u00e1tica de o2 con diferentes superficies electr\u00f3dicas 97 4.2.5.3. Orientaci\u00f3n de la lacasa en el electrodo 100 4.2.5.4. Sensibilidad 103 – v – 4.2.5.5. Estabilidad 104 4.2.5.6. Inhibici\u00f3n por haluros 106 4.2.5.6.1. Fluoruros 106 4.2.5.6.2. Cloruros 107 4.2.5.7. Efecto de la velocidad de rotaci\u00f3n del electrodo 110 4.2.6. Inmovilizaci\u00f3n de la lacasa trametes hirsuta a trav\u00e9s de sus residuos az\u00facares superficiales (formaci\u00f3n de bases de schiff) 114 4.2.6.1. Efecto en la actividad enzim\u00e1tica en disoluci\u00f3n 114 4.2.6.2. Respuesta electrocatal\u00edtica 115 4.2.6.3. Orientaci\u00f3n de la lacasa 115 4.2.6.4. Efecto de la rotaci\u00f3n 117 4.2.6.5. Inhibici\u00f3n por haluros 120 4.2.6.6. Estabilidad de la se\u00f1al 120 4.3. Electrodos de oro 123 4.3.1. Electrodos tridimensionales 124 4.3.1.1. Caracterizaci\u00f3n de los electrodos 124 4.3.1.2. Respuesta electrocatal\u00edtica 127 4.3.1.3. Estabilidad 129 4.3.2. Electrodos de disco de oro 130 4.3.3. Nanopart\u00edculas de oro 132 – vi – 4.4. Dise\u00f1o de una biopila de combustible enzim\u00e1tica basada en la transferencia electr\u00f3nica directa entre enzima y electrodo 136 4.4.1. Bio\u00e1nodo enzim\u00e1tico 136 4.4.2. Bioc\u00e1todo enzim\u00e1tico 138 4.4.3. Biopila de combustible 139 5-. Conclusiones 143 5.1. Caracterizaci\u00f3n de la enzima 145 5.2. Electrodos de carbono 145 5.3. Electrodos de oro 148 5.4. Biopila de combustible 148 6-. Bibliograf\u00eda 151<\/p>\n

 <\/p>\n

Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00abInmovilizaci\u00f3n covalente y orientada de enzima lacasa para su uso como bioc\u00e1todo en pilas de combustible<\/strong>\u00ab<\/h3>\n
    \n
  • T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Inmovilizaci\u00f3n covalente y orientada de enzima lacasa para su uso como bioc\u00e1todo en pilas de combustible <\/li>\n
  • Autor:<\/strong>\u00a0 Cristina Vaz Dominguez <\/li>\n
  • Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de Madrid<\/li>\n
  • Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 23\/01\/2009<\/li>\n<\/ul>\n

     <\/p>\n

    Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n
      \n
    • Director de la tesis<\/strong>\n
        \n
      • Victor Manuel Fernandez Lopez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n
      • Tribunal<\/strong>\n
          \n
        • Presidente del tribunal: Mar\u00eda encarnacion Lorenzo abad <\/li>\n
        • asuncion Alonso lomillo (vocal)<\/li>\n
        • Jos\u00e9 Manuel Pingarr\u00f3n carraz\u00f3n (vocal)<\/li>\n
        • Elena Dominguez ca\u00f1as (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n

           <\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

          Tesis doctoral de Cristina Vaz Dominguez \u00edndice 1-. Introducci\u00f3n 1 1.1. Biopilas de combustible 3 1.2. Inmovilizaci\u00f3n de enzimas en […]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[17],"tags":[58109,189293,29938,5764,25316,16506],"class_list":["post-91355","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-quimica","tag-asuncion-alonso-lomillo","tag-cristina-vaz-dominguez","tag-elena-dominguez-canas","tag-jose-manuel-pingarron-carrazon","tag-maria-encarnacion-lorenzo-abad","tag-victor-manuel-fernandez-lopez"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/91355","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=91355"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/91355\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=91355"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=91355"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=91355"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}