{"id":91457,"date":"2018-03-11T10:10:12","date_gmt":"2018-03-11T10:10:12","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/nuevas-estrategias-analiticas-para-el-estudio-de-ferroproteinas-usadas-en-el-diagnostico-mediante-espectrometria-de-masas\/"},"modified":"2018-03-11T10:10:12","modified_gmt":"2018-03-11T10:10:12","slug":"nuevas-estrategias-analiticas-para-el-estudio-de-ferroproteinas-usadas-en-el-diagnostico-mediante-espectrometria-de-masas","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/quimica-analitica\/nuevas-estrategias-analiticas-para-el-estudio-de-ferroproteinas-usadas-en-el-diagnostico-mediante-espectrometria-de-masas\/","title":{"rendered":"Nuevas estrategias analiticas para el estudio de ferroproteinas usadas en el diagnostico mediante espectrometria de masas"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Mar\u00eda  Estela Del Castillo Busto <\/strong><\/h2>\n<p>La glicosilaci\u00f3n y la glicaci\u00f3n de prote\u00ednas son modificaciones post-trasducionales que afectan a un gran n\u00famero de prote\u00ednas extracelulares y de la superficie celular. Dichas modificaciones implican cambios o alteraciones en el nivel de oligosac\u00e1ridos asociados a la cadena de amino\u00e1cidos de las prote\u00ednas y lo m\u00e1s interesante es que pueden ser empleados como biomarcadores de ciertas patolog\u00edas cl\u00ednicas. En la presente tesis doctoral se abordar\u00e1n estas modificaciones post-trasducionales en prote\u00ednas que contienen hierro (fe) en su estructura como son la transferrina s\u00e9rica y la hemoglobina. Estas ferroprote\u00ednas est\u00e1n involucradas en numerosos procesos biol\u00f3gicos, como la s\u00edntesis de adn, la transferencia electr\u00f3nica, procesos de detoxificaci\u00f3n, etc y adem\u00e1s, sus glico-conjugados pueden ser empleados como biomarcadores como alcoholismo cr\u00f3nico \u00f3 des\u00f3rdenes cong\u00e9nitos de glicosilaci\u00f3n (cdgs) en el caso de la transferrina, y diabetes en el caso de la hemoglobina. Por tanto, dada su gran importancia biol\u00f3gica y cl\u00ednica, y la falta de m\u00e9todos de an\u00e1lisis espec\u00edficos para estas especies, existe un gran inter\u00e9s en el desarrollo de estrategias anal\u00edticas para llevar a cabo estudios cl\u00ednicos sobre estas prote\u00ednas que permitan sus an\u00e1lisis no solo estructural sino cuantitativo (absoluto).  en este sentido, en la presente tesis doctoral se han desarrollado nuevos m\u00e9todos (exactos, precisos y absolutos) para la estandarizaci\u00f3n de los ensayos rutinarios utilizados en el diagn\u00f3stico de patolog\u00edas cl\u00ednicas. En consecuencia, nos pareci\u00f3 de inter\u00e9s establecer como objetivo general de la presente tesis doctoral:la puesta a punto de metodolog\u00edas anal\u00edticas para el estudio cualitativo y cuantitativo de ferroprote\u00ednas utilizados como biomarcadores de patolog\u00edas cl\u00ednicas mediante la combinaci\u00f3n de t\u00e9cnicas de ms, elemental y molecular. as\u00ed, en la primera parte del trabajo (cap\u00edtulo 1) se han puesto a punto m\u00e9todos de an\u00e1lisis de prote\u00ednas intactas por espectrometr\u00eda de masas estructural comparando la instrumentaci\u00f3n de maldi-tof con la de electrospray-q-tof. Adem\u00e1s, la metodolog\u00eda h\u00edbrida hplc-icp-ms aplicada a un ejemplo cl\u00e1sico de especiaci\u00f3n de fe se ha adaptado a la separaci\u00f3n de  las sialoformas de la transferrina de suero humano demostrando una elevada eficacia y sensibilidad para la detecci\u00f3n de estas especies, importantes biomarcadores de alcoholismo cr\u00f3nico. La metodolog\u00eda es adem\u00e1s eficaz para la evaluaci\u00f3n cualitativa de las diferencias entre individuos control y pacientes alcoh\u00f3licos. Finalmente, la creaci\u00f3n de un modelo matem\u00e1tico basado en el an\u00e1lisis diof\u00e1ntico ha resultado ser una herramienta complementaria a la t\u00e9cnica de esi-q-tof para establecer una base de datos ajustada a las necesidades de interpretaci\u00f3n de los espectros de masas de los diferentes glicoconjugados de la transferrina tanto de suero humano como de l\u00edquido cefalorraqu\u00eddeo. en el segundo cap\u00edtulo se han abordado los aspectos cuantitativos del problema anterior desarrollando y aplicando, por primera vez, un m\u00e9todo de an\u00e1lisis por diluci\u00f3n isot\u00f3pica especiada de una metaloprote\u00edna, la transferrina de suero humano, y se han podido obtener concentraciones individuales de las distintas sialoformas de esta especie. La metodolog\u00eda se ha validado a trav\u00e9s del an\u00e1lisis de un material de referencia certificado con excelentes resultados cuantitativos. a continuaci\u00f3n, y mediante el empleo de estrategias de saturaci\u00f3n de la transferrina s\u00e9rica con hierro natural y hierro isot\u00f3picamente enriquecido ha sido posible obtener la cuantificaci\u00f3n directa de par\u00e1metros de inter\u00e9s cl\u00ednico como son el tibc, el porcentaje de saturaci\u00f3n de la transferrina, cantidad total de fe s\u00e9rico y el uibc. Todos estos par\u00e1metros, que de forma rutinaria se obtienen mediante ensayos independientes pueden ser obtenidos con solo dos medidas anal\u00edticas. La validaci\u00f3n de las metodolog\u00edas de an\u00e1lisis se ha llevado a cabo satisfactoriamente a trav\u00e9s del uso de materiales de referencia certificados, del empleo de metodolog\u00edas alternativas y de la comparaci\u00f3n con otros laboratorios gracias a la colaboraci\u00f3n del hospital central de asturias. finalmente, en la \u00faltima parte de la tesis se aborda satisfactoriamente la determinaci\u00f3n de la glicohemoglobina (ghb) en gl\u00f3bulos rojos a trav\u00e9s de la medida del fe presente en el grupo hemo a trav\u00e9s de estrategias de especiaci\u00f3n empleando la cromatograf\u00eda de cambio cati\u00f3nico como m\u00e9todo de separaci\u00f3n y la diluci\u00f3n isot\u00f3pica de fe v\u00eda icp-ms como sistema de detecci\u00f3n. La estrategia proporciona buenos resultados en materiales de referencia y permite discriminar los pacientes diab\u00e9ticos respecto a los individuos control.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Nuevas estrategias analiticas para el estudio de ferroproteinas usadas en el diagnostico mediante espectrometria de masas<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Nuevas estrategias analiticas para el estudio de ferroproteinas usadas en el diagnostico mediante espectrometria de masas <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Mar\u00eda  Estela Del Castillo Busto <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Oviedo<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 30\/01\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Alfredo Sanz Medel<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: jose Barbosa torralbo <\/li>\n<li>Juan  Jos\u00e9 Calvete chornet (vocal)<\/li>\n<li>elisa Blanco gonz\u00e1lez (vocal)<\/li>\n<li>j\u00ed\u00b6rg Feldmann (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Mar\u00eda Estela Del Castillo Busto La glicosilaci\u00f3n y la glicaci\u00f3n de prote\u00ednas son modificaciones post-trasducionales que afectan [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[28949,8846,3178,18,3665],"tags":[1684,69228,189468,13821,56559,189467],"class_list":["post-91457","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-espectroscopia-de-masas","category-oviedo","category-proteinas","category-quimica-analitica","category-quimica-clinica","tag-alfredo-sanz-medel","tag-elisa-blanco-gonzalez","tag-jirg-feldmann","tag-jose-barbosa-torralbo","tag-juan-jose-calvete-chornet","tag-maria-estela-del-castillo-busto"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/91457","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=91457"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/91457\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=91457"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=91457"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=91457"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}